龐欣欣，邢玉鳳，彭紫凝，石秀杰，張雅歌，韓佳瑞

IgA腎病(IgA Nephropathy，IgAN)是全球最常見(jiàn)的免疫相關(guān)性腎小球炎癥疾病，約占原發(fā)性腎小球疾病的20%～47%，主要以半乳糖缺陷型IgA與抗體復(fù)合物沉積于腎小球系膜區(qū)為病理特征[1]。大多數(shù)IgAN患者呈慢性進(jìn)展性發(fā)展，約有15%～40%的IgAN患者在確診后20年內(nèi)發(fā)展為終末期腎病[2]。臨床中IgAN多以血尿、蛋白尿、高血壓及腎功能損害為主要表現(xiàn)，但由于其發(fā)病機(jī)制尚不明確，傳統(tǒng)的激素、免疫抑制劑、ACEI類等西藥藥物治療不能完全阻止IgAN病情的進(jìn)展，部分患者不可避免的進(jìn)入終末期腎病，甚至需要透析治療[3-4]。

傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為IgAN病機(jī)多與血瘀、熱邪有關(guān)，多將其歸于尿血、癃閉等范疇[5]。赤芍為毛茛科芍藥或川赤芍的干燥根，味苦、微寒，歸肝經(jīng)，具有清熱涼血、散瘀鎮(zhèn)痛之功效[6]。其化學(xué)成分復(fù)雜，主要包括單萜苷類化合物、鞣花酸、谷甾醇、兒茶素等成分[7]。現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)證明，赤芍具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗炎、降血脂、降血壓、抗動(dòng)脈硬化、抗腫瘤、保肝等作用[8]。以赤芍為組方的方藥對(duì)IgAN有良好的治療效果[9]。目前,關(guān)于赤芍的研究多集中在化學(xué)成分、藥理作用等方面，缺乏對(duì)其在特定疾病中藥物作用機(jī)制的探討。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是近年來(lái)的新興技術(shù)，在中藥抗病機(jī)制研究方面具有優(yōu)勢(shì)，能夠通過(guò)建立“藥物-靶點(diǎn)-基因-疾病”相互作用關(guān)系網(wǎng)絡(luò)，從多靶點(diǎn)角度對(duì)藥物成分作用于疾病的機(jī)制進(jìn)行綜合分析?；虮磉_(dá)綜合(Gene Expression Omnibus，GEO)數(shù)據(jù)庫(kù)，收錄了生物學(xué)領(lǐng)域大量的高通量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，能夠?qū)εc疾病發(fā)展密切聯(lián)系的基因進(jìn)行分析，與網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)合更加符合中醫(yī)藥學(xué)整體性和系統(tǒng)性的基本特點(diǎn)[10]。本研究以網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法為指導(dǎo)系統(tǒng)分析了中藥赤芍可能治療IgAN的活性成分和作用機(jī)制，同時(shí)采用GEO數(shù)據(jù)庫(kù)來(lái)驗(yàn)證關(guān)鍵靶點(diǎn)，證實(shí)本研究的可行性，為赤芍治療IgAN活性成分的開(kāi)發(fā)和作用機(jī)制研究提供參考。

1 方法

1.1 赤芍有效成分和靶點(diǎn)篩選 通過(guò)中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)分析平臺(tái)(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform，TCMSP)挖掘赤芍的所有化學(xué)成分，根據(jù)各個(gè)成分的吸收(Absorption)、分布(Distribution)、代謝(Metabolism)及排泄(Excretion)，即ADME參數(shù)篩選有效成分，其中篩選條件為藥物口服生物利用度(Oralbioavailability，OB)≥30%，類藥性(Drug like，DL)≥0.18。同時(shí)以“Chishao”為關(guān)鍵詞在該數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)赤芍有效成分進(jìn)行靶點(diǎn)篩選，采用Cytoscape 3.7.2軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

1.2 IgAN的相關(guān)靶點(diǎn)檢索 GeneCards是公共集成數(shù)據(jù)庫(kù)，提供了約150個(gè)網(wǎng)絡(luò)來(lái)源的以人類基因?yàn)橹行牡娜婊蜃⑨尯皖A(yù)測(cè)信息，包括基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、遺傳信息學(xué)、臨床基因信息等。以“IgA nephropathy”為關(guān)鍵詞在GeneCards里篩選與IgAN有關(guān)的所有靶點(diǎn)，并在DrugBank、DisGeNET、GAD等數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選補(bǔ)充。

1.3 赤芍-IgAN作用靶點(diǎn)篩選及PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 將獲得的赤芍有效成分靶點(diǎn)和IgAN靶點(diǎn)基因進(jìn)行Venn分析，獲得兩者交集靶點(diǎn)基因。藥物調(diào)控機(jī)體的病理生理過(guò)程網(wǎng)絡(luò)關(guān)系復(fù)雜，除直接作用靶點(diǎn)外，有多重間接調(diào)控方式，蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用(Protein-Protein Interaction，PPI)網(wǎng)絡(luò)可以輔助探索蛋白質(zhì)之間的潛在相互作用，發(fā)現(xiàn)新的藥物靶點(diǎn)，為數(shù)據(jù)的構(gòu)建與挖掘提供新方式。STRING數(shù)據(jù)庫(kù)可以預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)之間的相互關(guān)系并構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)，利用該數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)建赤芍作用靶點(diǎn)與IgAN靶點(diǎn)的交集PPI網(wǎng)絡(luò)并篩選核心靶點(diǎn)。篩選參數(shù)設(shè)置主要有生物機(jī)體選擇為人類，最低要求交互分?jǐn)?shù)設(shè)置最高置信度0.4。

1.4 赤芍治療IgAN網(wǎng)絡(luò)調(diào)控可視化 基于赤芍和IgAN的蛋白互作靶點(diǎn)數(shù)據(jù)，引入赤芍可作用于IgAN的有效成分，提取兩者交集，采用Cytoscape 3.7.2軟件把這些數(shù)據(jù)制作成可視化網(wǎng)絡(luò)圖，其中“圓形”代表靶蛋白，“三角形”代表分子，以“邊”表示不同成分與靶點(diǎn)之間的關(guān)系，挖掘其相互之間的作用關(guān)系。即得到赤芍治療IgAN的疾病-藥物-分子-靶點(diǎn)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)圖。

1.5 GEO芯片差異基因驗(yàn)證 利用GEO數(shù)據(jù)庫(kù)，搜索“IgA Nephropathy”，物種選擇人類，選擇基因數(shù)據(jù)，下載基因矩陣與平臺(tái)數(shù)據(jù)文件，運(yùn)用Perl腳本將下載的探針對(duì)應(yīng)為基因ID。采用R語(yǔ)言中“Limma”安裝包，篩選在IgAN組和正常組模型中高表達(dá)或低表達(dá)的差異基因，獲取高表達(dá)和低表達(dá)的差異基因，其中限定條件P<0.05。

1.6 GO和KEGG富集分析 DAVID(The Database for Annotation，Visualization and Integrated Discovery)數(shù)據(jù)庫(kù)廣泛應(yīng)用于基因注釋，可通過(guò)該數(shù)據(jù)庫(kù)挖掘基因與疾病的相關(guān)性。GO分析是生物學(xué)領(lǐng)域中用于基因產(chǎn)物細(xì)胞功能、分子功能和生物功能的分類系統(tǒng)，可以通過(guò)DAVID工具進(jìn)行GO富集分析。同時(shí)應(yīng)用DAVID工具對(duì)赤芍和IgAN交集蛋白靶標(biāo)基因進(jìn)行KEGG通路富集分析，得到赤芍治療IgAN的主要作用通路。GO和KEGG富集分析，考察赤芍的潛在靶標(biāo)可能具有的生物學(xué)功能，參與的生物學(xué)通路。校正統(tǒng)計(jì)學(xué)超幾何分布定量(P.adjust值)來(lái)評(píng)估存在于各GO和KEGG注釋中的蛋白生物學(xué)功能和通路富集情況的顯著性，P.adjust值在圖中顏色越紅，顯著性越強(qiáng)。

2 結(jié)果

2.1 赤芍有效成分及靶點(diǎn)篩選結(jié)果 檢索TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)中赤芍所有成分，按照OB≥30%和DL≥0.18篩選出赤芍有效成分29個(gè)。再對(duì)赤芍有效成分進(jìn)行所有靶點(diǎn)篩選，刪除未有靶點(diǎn)富集的成分，得到13個(gè)有效成分和80個(gè)相關(guān)靶點(diǎn)，并對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，表1、圖1。

表1 赤芍有效活性成分

圖1 赤芍活性成分及有效靶點(diǎn)六邊形代表赤芍，三角形代表赤芍13個(gè)成分，圓形代表赤芍的所有靶點(diǎn)

2.2 IgAN的相關(guān)靶點(diǎn)檢索結(jié)果 在GeneCards、DrugBank、DisGeNET、GAD等數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選IgAN相關(guān)靶點(diǎn)，刪除重復(fù)值，共得到1 267個(gè)與疾病相關(guān)的靶點(diǎn)。

2.3 赤芍-IgAN作用靶點(diǎn)及靶蛋白互作關(guān)系分析 將80個(gè)赤芍有效成分靶點(diǎn)和1 267個(gè)IgAN靶點(diǎn)基因進(jìn)行Venn分析，得到35個(gè)共同靶基因，圖2。采用STRING數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行PPI分析，得到271條PPI關(guān)系，圖3。依據(jù)其富集節(jié)點(diǎn)數(shù)目，對(duì)靶點(diǎn)做出柱狀圖，得到赤芍-IgAN核心靶點(diǎn)。其中橫軸為富集節(jié)點(diǎn)數(shù)目，縱軸為靶點(diǎn)基因名稱，核心靶點(diǎn)圖，圖4，主要有蛋白激酶-1(AKT1)、炎癥因子-6(IL-6)、c-JUN氨基末端激酶(JUN)、環(huán)氧合酶-2(PTGS2)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-A(VEGFA)、半胱氨酸依賴性天冬氨酸特異性蛋白酶家族胱天蛋白酶(CASP3)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP9)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、趨勢(shì)因子白細(xì)胞介素-8(CXCL8)、磷酸化c-FOS抗體(FOS)等。

圖2 赤芍活性成分有效靶基因與IgAN相關(guān)靶基因

圖3 赤芍與IgAN的PPI關(guān)系圖黃色：蛋白互作關(guān)系；黑色：基因共表達(dá)的關(guān)系；淺藍(lán)色：蛋白同源性；深藍(lán)色：基因共進(jìn)化；紅色：基因融合；綠色：基因臨接

圖4 赤芍治療IgAN的核心作用靶點(diǎn)

2.4 赤芍治療IgAN網(wǎng)絡(luò)可視化分析 通過(guò)進(jìn)行赤芍治療IgAN的疾病-藥物-分子-靶點(diǎn)互相作用網(wǎng)絡(luò)的可視化分析，納入上述PPI網(wǎng)絡(luò)篩選的35個(gè)基因和分析篩選得到11個(gè)赤芍可用有效成分，同時(shí)在網(wǎng)絡(luò)中加入疾病和藥物使網(wǎng)絡(luò)圖更加直觀，圖5。

圖5 赤芍-IgAN-有效成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)關(guān)系圖六邊形代表赤芍，菱形代表IgAN，三角形代表赤芍11個(gè)有效作用成分，圓形代表赤芍作用于IgAN的35個(gè)靶點(diǎn)

2.5 GEO芯片差異基因驗(yàn)證 獲取GEO數(shù)據(jù)庫(kù)下載的GSE93798芯片與平臺(tái)數(shù)據(jù)。共計(jì)樣本42個(gè)，其中正常樣本22個(gè)，IgAN樣本20個(gè)。分析得到具有顯著性差異基因347個(gè)，基因高表達(dá)為紅色，基因低表達(dá)為綠色，得到熱圖圖6。通過(guò)分析差異基因，驗(yàn)證赤芍治療IgAN的前10個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)，其中將具有顯著性差異的靶點(diǎn)FOS、JUN做出箱式圖，圖7，P表示差異性。

圖6 GSE93798芯片分析熱圖

圖7 關(guān)鍵靶基因FOS和JUN差異分析圖*P<0.01

2.6 GO功能富集分析 通過(guò)DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)赤芍和IgAN交集蛋白靶基因進(jìn)行GO富集分析，得到赤芍可治療IgAN的作用靶點(diǎn)的生物學(xué)功能50種，綜合分析后取前20種功能特性，表2。

表2 赤芍治療IgAN作用靶點(diǎn)GO功能富集分析(前20位)

赤芍有效成分靶點(diǎn)主要通過(guò)肽鏈內(nèi)切酶活性、DNA結(jié)合轉(zhuǎn)錄激活活性、RNA聚合酶II型特異性、血紅素結(jié)合性、四吡咯結(jié)合性、泛素蛋白連接酶結(jié)合性等生物學(xué)功能特性治療IgAN，圖8。氣泡顏色越紅，則P.adjust值越高，顯著性越強(qiáng)，氣泡越大，則該生物學(xué)功能富集的靶點(diǎn)越多。

圖8 赤芍治療IgAN的相關(guān)生物學(xué)功能“count”值代表與該生物學(xué)功能相關(guān)的靶點(diǎn)數(shù)量，P.adjust值表示顯著性

2.7 KEGG信號(hào)通路富集分析 采用DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行KEGG信號(hào)通路分析，得到赤芍治療IgAN的信號(hào)通路有120條，綜合分析后取前20條信號(hào)通路，表3。

表3 赤芍治療IgAN有效靶點(diǎn)KEGG信號(hào)通路富集分析(前20位)

KEGG分析顯示，赤芍治療IgAN的有效靶點(diǎn)主要通過(guò)乙型肝炎(Hepatitis B)通路、卡波西肉瘤相關(guān)皰疹病毒感染(Kaposi sarcoma-associated herpesvirus infection)通路、IL-17信號(hào)通路、腫瘤壞死因子(TNF)信號(hào)通路等多條信號(hào)通路產(chǎn)生作用，圖9。其中柱形圖顏色越紅，則P.adjust值越高，顯著性越強(qiáng)，柱形越長(zhǎng)，則該通路富集的靶點(diǎn)越多。

圖9 赤芍治療IgAN關(guān)鍵信號(hào)通路橫軸代表在該信號(hào)通路上的靶點(diǎn)數(shù)量，P.adjust值表示顯著性

3 討論

IgAN發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，單純的西醫(yī)治療不能有效阻止疾病進(jìn)展。近年來(lái)，中醫(yī)藥在防治IgAN發(fā)生發(fā)展、延緩腎功能惡化等方面取得了較大進(jìn)展，臨床實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，活血化瘀藥可以減輕IgAN患者的血尿等癥狀[11]。反復(fù)發(fā)作性血尿是其主要特征之一，醫(yī)家們認(rèn)為“出血證多伴有瘀血”等觀點(diǎn)，正如唐容川所云[12]：“離經(jīng)之血,與好血不相合，是謂瘀血”，同時(shí)王麗萍等[13]發(fā)現(xiàn)血瘀證與IgAN腎組織病理?yè)p害有一定正相關(guān)性，能夠反映IgAN的腎臟病變輕重程度，提示瘀血是貫穿IgAN始終的重要因素。另外，熱邪侵襲也可導(dǎo)致IgAN患者血尿的生成，如《金匱要略》“熱在下焦者,則尿血”，熱邪入血，血熱互結(jié)，血受熱煎，不暢而瘀，正如《醫(yī)林改錯(cuò)》曰：“血受熱則煎熬成塊”。陳香美等[14]對(duì)IgAN中醫(yī)證候的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，熱邪和血瘀證是IgAN最為常見(jiàn)的標(biāo)證,分別占31.6%和28.9%，這也進(jìn)一步說(shuō)明，除血瘀證外，熱邪也是IAgN的重要病機(jī)。

赤芍性寒、歸肝經(jīng)，為我國(guó)傳統(tǒng)的清熱活血類中藥,有著悠久的用藥歷史,《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》記載“化瘀血，赤者較優(yōu)……為其能化毒熱之瘀血不使?jié)⒛撘病盵15]，臨床常用于治療瘀滯疼痛、癰腫瘡毒、出血等。血尿是臨床上IgAN患者最常見(jiàn)的癥狀之一，可由血瘀所致[16]。李康康等[17]發(fā)現(xiàn)，以赤芍為君藥的活血通絡(luò)方能夠改善IgAN患者肌膚甲錯(cuò)、腰痛固定、舌紫黯等血瘀癥狀，并可以有效降低患者尿紅細(xì)胞數(shù)目、血肌酐、尿素氮等。同時(shí)有研究者發(fā)現(xiàn)[18]，在大量臨床IgAN治療醫(yī)案中，以赤芍為組方的枸芪復(fù)腎丸也能夠改善IgAN患者血尿情況。這些研究提示，赤芍對(duì)于改善IgAN患者癥狀具有良好效果。

本研究利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法篩選出赤芍中有13個(gè)主要活性成分及80個(gè)靶點(diǎn)，在GeneCards、DrugBank、DisGeNET、GAD等數(shù)據(jù)庫(kù)中得到IgAN靶點(diǎn)基因1 267個(gè)，與赤芍的靶點(diǎn)映射得到赤芍治療IgAN的靶基因35個(gè)?？芍嗌种委烮gAN具有多成分、多靶點(diǎn)的特點(diǎn)。綜合分析“藥物-疾病靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)和PPI網(wǎng)絡(luò)，發(fā)現(xiàn)赤芍治療IgAN的關(guān)鍵化合物有芍藥苷、兒茶素、鞣花酸、黃芩甙元、β-谷甾醇、谷甾醇、菠菜甾醇、豆甾醇、(2 r,3 r)4-methoxyl-distylin、7-豆甾烯-3β-醇、菜油甾-5烯-3β-醇等，關(guān)鍵靶點(diǎn)涉及AKT1、IL6、JUN、PTGS2、VEGFA、CASP3、MMP9、CAT、CXCL8、FOS等。通過(guò)對(duì)GEO數(shù)據(jù)庫(kù)臨床樣本GSE93798芯片的基因矩陣與平臺(tái)數(shù)據(jù)文件進(jìn)行分析，篩選差異基因，驗(yàn)證了在赤芍治療IgAN的前10關(guān)鍵靶點(diǎn)中FOS和JUN具有顯著性差異，進(jìn)一步證實(shí)了本研究的結(jié)論。

赤芍總苷是赤芍的主要活性成分，其中又以芍藥苷為主。赤芍總苷具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎作用[8]。有研究發(fā)現(xiàn)[19]，赤芍總苷能夠阻斷體內(nèi)免疫調(diào)節(jié)Toll樣受體的活化、抑制巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)，降低腎病大鼠24 h尿蛋白排泄率，改善腎功能，延緩腎臟疾病進(jìn)展。赤芍的另一活性成分兒茶素也具有降低蛋白尿、改善腎功能的作用。有研究發(fā)現(xiàn)，兒茶素可通過(guò)抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)、調(diào)節(jié)腎小球系膜細(xì)胞周期調(diào)控蛋白表達(dá),抑制腎臟系膜細(xì)胞增殖,改善腎小球基底膜通透性,降低蛋白濾過(guò),改善血脂代謝及腎臟功能,延緩腎臟病理慢性進(jìn)展[20]。本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法發(fā)現(xiàn)赤芍可能主要利用以上化合物對(duì)IgAN發(fā)揮治療作用。

為進(jìn)一步分析赤芍治療IgAN靶點(diǎn)所涉及的信號(hào)通路和生物過(guò)程，本研究對(duì)赤芍治療IgAN的靶點(diǎn)進(jìn)行了KEGG信號(hào)通路和GO功能富集分析。KEGG信號(hào)通路富集分析得到與赤芍治療IgAN相關(guān)的信號(hào)通路有120條，其中主要涉及Hepatitis B通路、卡波西肉瘤相關(guān)皰疹病毒感染通路、IL-17信號(hào)通路、TNF信號(hào)通路等。這些通路大多數(shù)與免疫調(diào)節(jié)、炎癥有關(guān)，符合IgAN的病理診斷特點(diǎn)。其中Hepatitis B通路主要指HBV感染。HBV感染具有廣嗜性，除肝臟外，還能在其他多種臟器中復(fù)制，損害相應(yīng)臟器，而腎臟是最常受累的肝外組織之一。大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為IgAN是由免疫復(fù)合物IgA沉積導(dǎo)致的免疫損傷造成的,且認(rèn)為HBV所形成的HBsAg抗原抗體免疫復(fù)合物在腎小球內(nèi)沉積導(dǎo)致的免疫損傷是引發(fā)乙肝相關(guān)性腎炎的主要原因[21]。熊子波等[22]研究發(fā)現(xiàn)，伴有HBV感染的IgAN患者，其HBsAg主要在腎小球系膜區(qū)沉積。同時(shí)有學(xué)者研究顯示，HBV感染率與IgAN發(fā)病率呈正相關(guān)[23]。這在一定程度上說(shuō)明了HBV感染與IgAN密切相關(guān)。相關(guān)文獻(xiàn)表明[24]赤芍能夠通過(guò)降低HBsAg表達(dá)，抑制HBV復(fù)制，提示赤芍可能是通過(guò)影響HBV通路，改善機(jī)體免疫能力來(lái)治療IgAN。

IL-17是一種強(qiáng)大的前炎性細(xì)胞因子，也是炎性反應(yīng)的微調(diào)因子，參與腎臟炎性反應(yīng)的發(fā)生和發(fā)展[25]。研究發(fā)現(xiàn)IgAN患者尿液中IL-17水平明顯增加[26]，而患者血清IL-17水平與24 h尿蛋白呈正相關(guān)[27]，這些結(jié)果提示IL-17可能參與IgAN的發(fā)病。林佳如等[28]發(fā)現(xiàn)，IL-17可促進(jìn)半乳糖缺陷型IgA的分泌及免疫復(fù)合物IgA的腎臟沉積，引起IgAN的發(fā)生，進(jìn)一步提示IL-17參與了IgAN免疫發(fā)病機(jī)制及進(jìn)展。在TNF信號(hào)通路中，TNF超家族成員13(TNFSF13)、TNF-α發(fā)揮了重要作用。其中TNFSF13已被確定為IgAN的易感基因，且血漿中高水平的TNFSF13與IgAN的預(yù)后較差有關(guān)[29]。而TNF-α作為一種由免疫細(xì)胞分泌的多效應(yīng)細(xì)胞因子，具有抗腫瘤、抗炎和調(diào)節(jié)免疫功能。Lai等[30]發(fā)現(xiàn)，當(dāng)發(fā)生IgAN時(shí)腎小球系膜細(xì)胞分泌的TNF-α上升，上調(diào)足細(xì)胞中TNF-α及TNF-αR2表達(dá)，進(jìn)而加重炎癥反應(yīng)。同時(shí)TNF-α也可導(dǎo)致足細(xì)胞相關(guān)蛋白下調(diào)，腎小球?yàn)V過(guò)膜通透性增加，進(jìn)而造成蛋白尿[31]。在多種慢性腎臟疾病中，赤芍具有調(diào)節(jié)腎臟TNF-α等炎癥因子表達(dá)、減輕蛋白尿的功能[32]。這些研究進(jìn)一步提示本研究預(yù)測(cè)通路的可行性。除此之外，本研究結(jié)果還顯示，富集群還包括沙門(mén)氏菌感染、人巨細(xì)胞病毒感染、HIV等疾病，同時(shí)直腸癌、小細(xì)胞肺癌等癌癥相關(guān)信號(hào)通路也被顯著富集。GO功能富集分析發(fā)現(xiàn)，赤芍主要通過(guò)肽鏈內(nèi)切酶活性、DNA結(jié)合轉(zhuǎn)錄激活活性、RNA聚合酶II型特異性、血紅素結(jié)合性、四吡咯結(jié)合性、泛素蛋白連接酶結(jié)合性等生物學(xué)功能特性治療IgAN，這些生物過(guò)程均與IgAN的發(fā)生有關(guān)，也體現(xiàn)了赤芍多成分、多靶點(diǎn)、多通路治療IgAN的特點(diǎn)。

綜上所述，本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的科學(xué)手段，對(duì)赤芍治療IgAN的機(jī)制進(jìn)行了初步探討，發(fā)現(xiàn)赤芍在治療IgAN方面的多成分、多靶點(diǎn)、多通路的特點(diǎn)，同時(shí)采用GEO數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行分析驗(yàn)證，證實(shí)本研究可行性，為深入探討其作用機(jī)制提供了科學(xué)依據(jù)。但是，本研究不可避免的存在一些不足之處，缺乏體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)探索，本課題組將對(duì)此進(jìn)行進(jìn)一步機(jī)制研究，為臨床治療IgAN提供新思路。