劉光偉 鄧巧恩 趙 棟 綦 航 趙俊霞

雙相情感障礙是一種臨床表現(xiàn)復(fù)雜、重性、高致殘性的精神疾病，其特點(diǎn)是發(fā)作頻繁、自殺率高、病程長、疾病負(fù)擔(dān)重等，其終生患病率在1.0%～2.4%[1]。由于生活壓力、生活環(huán)境及遺傳等因素，雙相情感障礙患者在緩解期仍有殘留癥狀，整體功能轉(zhuǎn)歸較差，影響復(fù)發(fā)等不良預(yù)后發(fā)生[2]。近年來關(guān)于緩解期雙相情感障礙診斷和治療研究較多，但由于患者臨床癥狀復(fù)雜多變，探究其發(fā)生發(fā)展中相關(guān)影響因素和因子仍有重要意義。童年期創(chuàng)傷指發(fā)生在16歲以前的不良生活事件，包括童年忽視、虐待、親情缺失等，與精神障礙發(fā)生有關(guān)[3]。Maria RD等[4]研究表明，童年期創(chuàng)傷對緩解期雙相情感障礙患者情緒認(rèn)知功能有顯著影響。呂崢等[5]研究發(fā)現(xiàn)，長鏈非編碼RNA 51A(Long non-coding RNA 51A，lncRNA 51A)在阿爾茨海默病患者血漿中表達(dá)水平高于健康對照組，可反映患者認(rèn)知功能。由于lncRNA 51A在童年期創(chuàng)傷及雙相情感障礙疾病中未有研究，本研究通過檢測有童年創(chuàng)傷緩解期雙相情感障礙患者血漿中l(wèi)ncRNA 51A水平，分析其與患者情緒認(rèn)知功能關(guān)系，初步探究其在有童年創(chuàng)傷緩解期雙相情感障礙進(jìn)展中的意義。

1 對象與方法

1.1 對象 選取2018年3月～2019年11月石家莊市第八醫(yī)院收治的緩解期雙相情感障礙患者100例作為研究組，其中男63例，女37例，年齡18～65歲，平均(28.04±8.13)歲。根據(jù)兒童期創(chuàng)傷問卷評估將緩解期雙相情感障礙患者分為有童年創(chuàng)傷組34例，無童年創(chuàng)傷組66例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)根據(jù)國際疾病分類第10版(ICD-10)[6]確診為雙相情感障礙；(2)患者臨床癥狀消失>6個月，且漢密爾頓抑郁量表(Hamilton Depression Scale，HAMD)評分<8分[7]，楊氏躁狂量表(Young Mania Rating Scale，YMRS)評分<6分[8]；(3)能夠完成量表和認(rèn)知測查，右利手，且受教育年限≥9年。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并其他精神病性或顯著軀體疾病所致精神障礙；(2)心、腎、肝臟功能嚴(yán)重不足者；(3)合并患有惡性腫瘤、嚴(yán)重腦疾病或其他軀體疾??；(4)有癲癇發(fā)作史或家族史。對照組為同期招募的自愿參加本研究的健康人100名，其中男61名，女39名，年齡17～63歲，平均(27.59±7.65)歲。所有受試者對本研究表示知情并簽署知情同意書，本研究經(jīng)相關(guān)倫理委員會批準(zhǔn)同意。

1.2 方法

1.2.1 主要儀器和試劑 實(shí)時熒光定量(Quantitative Real-Time PCR，qRT-PCR)儀(型號：ABI 7500，美國ABI公司)，qRT-PCR試劑盒(貨號：RR820A，大連寶生物公司)，總RNA提取試劑盒、反轉(zhuǎn)錄試劑盒(貨號分別為：QN0926-EZK、ALH266-PTO，北京百奧萊博科技有限公司)。

1.2.2 童年創(chuàng)傷及情緒認(rèn)知功能評估 根據(jù)兒童期創(chuàng)傷問卷進(jìn)行各項(xiàng)童年創(chuàng)傷評估，包括情感虐待(Emotional Abuse，EA)、軀體虐待(Physical Abuse，PA)、性虐待(Sexual Abuse，SA)、情感忽視(Emotional Neglect，EN)和軀體忽視(Physical Neglect，PN)[9]。采用情緒面孔識別[10]進(jìn)行患者情緒認(rèn)知功能評估，記錄患者對6種情緒表情(高興、悲傷、憤怒、驚訝、恐懼、厭惡)的識別正確率，每種表情30張圖片(選自北京師范大學(xué)心理研究中心編制的中國人情緒面孔圖片庫)。

1.2.3 qRT-PCR法檢測血漿lncRNA 51A表達(dá)水平 所有受試者于入組后清晨(7:00～9:00)空腹?fàn)顟B(tài)下采集外周靜脈血5 ml，靜置于EDTA-K2抗凝管中20 min后在3 000 r/min條件下離心10 min，分離上層清液(即血漿)至新EP管中，-80 ℃保存?zhèn)溆?。使用試劑盒提取總RNA后，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，于-20 ℃保存，用于qRT-PCR實(shí)驗(yàn)。20 μl反應(yīng)體系如下：10 μl SYBR?Mix Taq II，2 μl cDNA，0.4 μl ROX，0.8 μl上游引物，0.8 μl下游引物，6.0 μl ddH2O。具體反應(yīng)步驟如下：95 ℃ 32 s，1循環(huán)；95 ℃ 5 s，61 ℃ 33 s，40循環(huán)。每個樣本重復(fù)3次，用2-ΔΔCT法計(jì)算lncRNA 51A表達(dá)水平，所用引物如表1所示。GAPDH作為內(nèi)參基因。引物由寶生物工程(大連)有限公司合成。

2 結(jié)果

2.1 研究組和對照組一般資料比較 研究組與對照組年齡、性別、民族、婚姻狀況、受教育年限、身體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、吸煙、飲酒比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，研究組HAMD、YRMS評分均高于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 研究組和對照組一般資料比較

2.2 研究組和對照組童年創(chuàng)傷評分及情緒認(rèn)知功能比較 研究組兒童期創(chuàng)傷問卷總分及EA、PA、SA、EN、PN評分均高于對照組(P<0.05)，研究組情緒面孔識別中對悲傷、憤怒、高興、驚訝、恐懼、厭惡識別的正確率均低于對照組(P<0.05)。見表3。

表3 研究組和對照組童年創(chuàng)傷評分及情緒認(rèn)知功能比較

2.3 有童年創(chuàng)傷組和無童年創(chuàng)傷組童年創(chuàng)傷評分及情緒認(rèn)知功能比較 有童年創(chuàng)傷組兒童期創(chuàng)傷問卷總分及EA、PA、SA、EN、PN評分均高于無童年創(chuàng)傷組(P<0.05)，情緒面孔識別中對悲傷、憤怒、高興、驚訝、恐懼、厭惡識別正確率均低于無童年創(chuàng)傷組(P<0.05)。見表4。

表4 有童年創(chuàng)傷組和無童年創(chuàng)傷組童年創(chuàng)傷評分及情緒認(rèn)知功能比較

2.4 不同組別血漿lncRNA 51A表達(dá)水平比較 研究組血漿lncRNA 51A表達(dá)水平高于對照組[(4.65±1.32)vs(1.02±0.33)，t=26.679，P=0.000]；有童年創(chuàng)傷組血漿lncRNA 51A表達(dá)水平高于無童年創(chuàng)傷組[(5.64±1.73)vs(3.42±1.11)，t=7.784，P=0.000]。

2.5 研究組血漿lncRNA 51A表達(dá)水平與童年創(chuàng)傷評分、情緒認(rèn)知功能的相關(guān)性分析 研究組血漿中l(wèi)ncRNA 51A水平與兒童期創(chuàng)傷問卷EA、SA、PA評分均呈正相關(guān)(P<0.05)，與悲傷識別、恐懼識別正確率均呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。見表5。

表5 研究組血漿lncRNA 51A表達(dá)水平與童年創(chuàng)傷評分、情緒認(rèn)知功能的相關(guān)性

2.6 發(fā)生緩解期雙相情感障礙的危險(xiǎn)因素分析 以本研究資料為樣本，以緩解期雙相情感障礙是否發(fā)生為因變量(發(fā)生=1，未發(fā)生=0)，以差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的HAMD評分、YRMS評分及l(fā)ncRNA 51A水平、童年創(chuàng)傷為自變量建立Logistic回歸模型。結(jié)果可知，高HAMD評分、高YRMS評分、高lncRNA 51A水平、童年創(chuàng)傷是影響緩解期雙相情感障礙發(fā)生的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表6。

表6 影響緩解期雙相情感障礙發(fā)生的危險(xiǎn)因素分析

3 討論

雙相情感障礙可表現(xiàn)為抑郁發(fā)作、狂躁發(fā)作及混合發(fā)作。抑郁發(fā)作時患者出現(xiàn)情緒低落、睡眠增加、體質(zhì)量增加、易激惹、更多的自殺欲望和共病焦慮，狂躁發(fā)作時患者出現(xiàn)心境高漲、活動增多、思維奔逸、精力充沛、意志行為增強(qiáng)等，混合發(fā)作時狂躁癥狀和抑郁癥狀在同一時間出現(xiàn)。以上癥狀通過干擾患者生理和心理狀態(tài)，影響患者生活質(zhì)量和生命安全[11]。探尋雙相情感障礙發(fā)生發(fā)展中相關(guān)生物標(biāo)志物，對控制疾病進(jìn)展有一定價值。

lncRNA是一類長度大于200 nt的具有調(diào)控功能的非編碼RNA，參與多種疾病進(jìn)展。Tomoe S等[12]研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA在大腦中表達(dá)異常時可通過影響神經(jīng)調(diào)節(jié)過程參與調(diào)控抑郁癥發(fā)生發(fā)展。余天浩等[13]研究表明，冠心病合并抑郁患者血清lncRNA LIPCAR表達(dá)水平高于冠心病組和對照組，且與抑郁癥嚴(yán)重程度有關(guān)。有研究報(bào)道[14]，lncRNA NONHSAT在精神分裂癥外周血中表達(dá)水平升高，可能與患者多巴胺信號通路調(diào)控密切相關(guān)。以上研究提示，lncRNA可能與精神疾病進(jìn)展有關(guān)。

lncRNA 51A是分揀蛋白相關(guān)受體1(Sortilin-related Receptor 1，SORL1)內(nèi)含子1的反義鏈[15]。Shamseddin A等[16]研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA 51A可通過參與神經(jīng)原纖維纏結(jié)在阿爾茨海默病中起重要作用。Han Z等[17]研究報(bào)道，阿爾茨海默病患者大腦中l(wèi)ncRNA 51A表達(dá)上調(diào)，SORL1表達(dá)下調(diào)，與疾病發(fā)生有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，研究組血漿lncRNA 51A表達(dá)水平升高，高于對照組，與Han Z等[17]在阿爾茨海默病中研究結(jié)果相似。有研究表明，HAMD、YMRS評分升高與穩(wěn)定期雙相情感障礙患者認(rèn)知功能下降有關(guān)[18]。本研究結(jié)果顯示，與對照組相比，研究組HAMD、YRMS評分均升高，且情緒面孔識別對悲傷、憤怒、高興、驚訝、恐懼、厭惡識別正確率均降低，與朱頎峰等[19]研究結(jié)果相似，提示緩解期雙相情感障礙患者情緒認(rèn)知功能下降。Blechingberg J等[20]研究證實(shí)，SORL1水平與阿爾茨海默病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)，SORL1可通過調(diào)節(jié)海馬靜息狀態(tài)功能連接影響阿爾茨海默病發(fā)展。有研究表明[21]，SORL1可能通過促進(jìn)患者認(rèn)知功能障礙，加速帕金森患者癡呆發(fā)生。lncRNA 51A可能靶向SORL1調(diào)控Aβ蛋白表達(dá)，進(jìn)而誘發(fā)阿爾茨海默病[20]。根據(jù)過往研究推測lncRNA 51A可能通過影響SORL1表達(dá)，調(diào)節(jié)海馬功能，促進(jìn)患者情緒認(rèn)知功能障礙發(fā)展，參與緩解期雙相情感障礙進(jìn)展。但具體機(jī)制尚需大量實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證和研究。

Etain B等[22]研究報(bào)道，童年創(chuàng)傷如性虐待、身體虐待與雙相情感障礙中自殺企圖、藥物濫用癥狀發(fā)生有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，研究組兒童期創(chuàng)傷問卷總分及EA、PA、SA、EN、PN評分均高于對照組，提示童年創(chuàng)傷可能促進(jìn)緩解期雙相情感障礙發(fā)生。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，有童年創(chuàng)傷組兒童期創(chuàng)傷問卷總分及EA、PA、SA、EN、PN評分均高于無童年創(chuàng)傷組，且情緒面孔識別對悲傷、憤怒、高興、驚訝、恐懼、厭惡識別正確率均低于無童年創(chuàng)傷組，提示童年創(chuàng)傷可能影響緩解期雙相情感障礙患者的情緒認(rèn)知功能。有童年創(chuàng)傷組血漿lncRNA 51A表達(dá)水平高于無童年創(chuàng)傷組，且研究組血漿中l(wèi)ncRNA 51A水平與EA、SA、PA評分均呈正相關(guān)，提示lncRNA 51A可能通過反映EA、SA、PA水平預(yù)示緩解期雙相情感障礙患者童年創(chuàng)傷水平。

本研究還發(fā)現(xiàn)，研究組血漿中l(wèi)ncRNA 51A水平與悲傷識別、恐懼識別正確率呈負(fù)相關(guān)，且高HAMD評分、高YRMS評分、高lncRNA 51A水平、童年創(chuàng)傷是影響緩解期雙相情感障礙發(fā)生的危險(xiǎn)因素。提示lncRNA 51A可能通過反映緩解期雙相情感障礙患者童年創(chuàng)傷水平，為評估患者情緒認(rèn)知功能及患病水平提供一定幫助。

綜上所述，緩解期雙相情感障礙患者血漿lncRNA 51A表達(dá)水平升高，與EA、SA、PA等童年創(chuàng)傷評分及悲傷識別、恐懼識別正確率等情緒認(rèn)知功能評價有關(guān)，可能作為有童年創(chuàng)傷緩解期雙相情感障礙發(fā)生影響因素，為臨床診斷和治療提供一定理論依據(jù)。但由于本研究樣本量較少，研究方法較為基礎(chǔ)，具體機(jī)制尚需進(jìn)一步深入研究。