侯麗娟，王文文，翟建軍，孫燕

首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京同仁醫(yī)院，北京100176

宮頸癌是臨床常見女性惡性腫瘤，由于其病變位置不易觀察，易被患者忽略，多數(shù)患者就診時(shí)已進(jìn)展至中晚期，失去最佳治療時(shí)機(jī)［1］。目前，腫瘤標(biāo)志物是篩查宮頸癌及評(píng)估病情嚴(yán)重程度的重要輔助指標(biāo)，逐漸成為宮頸癌早期診斷的主要途徑之一。缺氧誘導(dǎo)因子1α（HIF-1α）是缺氧細(xì)胞應(yīng)答的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，具有促進(jìn)細(xì)胞增殖、抑制細(xì)胞凋亡作用［2］。誘騙受體3（DcR3）屬于腫瘤壞死因子受體超家族的新成員，能協(xié)助腫瘤細(xì)胞實(shí)現(xiàn)免疫逃避，參與腫瘤疾病的發(fā)生、進(jìn)展［3］。惡性腫瘤特異生長因子（TSGF）是一種廣譜腫瘤標(biāo)志物，在肺癌、結(jié)直腸癌等多種惡性腫瘤疾病診斷中具有較高的靈敏度［4］。但目前鮮有三者聯(lián)合檢測在宮頸癌篩查中的報(bào)道。本研究觀察了宮頸癌患者血清 HIF-1α、DcR3、TSGF 水平變化，并探討其在宮頸癌診斷及疾病進(jìn)展中的作用?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取 2018 年 1 月～2019 年 8 月于我院體檢的女性2 250例，根據(jù)體檢及病理診斷結(jié)果分為健康組1 342 例、宮頸良性病變組836 例、宮頸癌組72 例。排除標(biāo)準(zhǔn)：①既往有宮頸癌病史；②合并其他部位惡性腫瘤；③合并血液系統(tǒng)疾?。虎? 個(gè)月內(nèi)服用抗腫瘤相關(guān)藥物。健康組年齡32～65（42.11 ± 4.20）歲，宮頸良性病變組為 33～64（41.80 ± 3.87）歲，宮頸癌組為 31～66（42.46 ±5.02）歲。三組年齡具有可比性。本研究通過醫(yī)院倫理委員會(huì)審核，參與者均簽署知情同意書。

1.2 血清HIF-1α、DcR3、TSGF水平檢測方法 采用ELISA 法。采集三組清晨空腹靜脈血4 mL，2 500 r/min 離心 15 min，離心半徑為 15 cm，取上清液，-70 ℃保存待檢。采用ELISA 法檢測血清HIF-1α、DcR3、TSGF水平，試劑盒及酶標(biāo)儀購自美國Ab?cam公司，所有操作步驟嚴(yán)格參照試劑盒說明書。

1.3 相關(guān)資料采集與分析方法 收集宮頸癌患者的臨床資料，包括年齡、腫瘤直徑、FIGO 分期［5］、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分化程度、宮頸浸潤深度，比較不同臨床病理參數(shù)的宮頸癌患者血清HIF-1α、DcR3、TSGF 水平。采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)量資料以-x±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用t檢驗(yàn)。繪制血清HIF-1α、DcR3、TSGF 單獨(dú)及聯(lián)合診斷宮頸癌的受試者工作特征（ROC）曲線，比較曲線下面積（AUC）、靈敏度、特異度等。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組血清HIF-1α、DcR3、TSGF 水平比較 宮頸癌組血清HIF-1α、DcR3、TSGF 水平均高于宮頸良性病變組、健康組（P均＜0.05）。見表1。

表1 三組血清HIF-1α、DcR3、TSGF水平比較（-x± s）

2.2 血清HIF-1α、DcR3、TSGF 單獨(dú)及聯(lián)合診斷宮 頸癌的價(jià)值比較 見表2。

表2 血清HIF-1α、DcR3、TSGF單獨(dú)及聯(lián)合診斷宮頸癌的價(jià)值比較

2.3 不同臨床病理參數(shù)的宮頸癌患者血清HIF-1α、DcR3、TSGF 水平比較 FIGO 分期Ⅲ～Ⅳ期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)低分化、宮頸浸潤深度≥2/3 的宮頸癌患者血清HIF-1α、DcR3、TSGF水平均高于FIGO分期Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)中高分化、宮頸浸潤深度＜2/3者（P均＜0.05）。不同年齡、腫瘤直徑患者血清HIF-1α、DcR3、TSGF 比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。見表3。

表3 不同臨床病理參數(shù)的宮頸癌患者血清HIF-1α、DcR3、TSGF水平比較（±s）

表3 不同臨床病理參數(shù)的宮頸癌患者血清HIF-1α、DcR3、TSGF水平比較（±s）

臨床病理參數(shù)年齡（歲）≥50＜50 FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期Ⅰ～Ⅱ期淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有 無組織學(xué)分化程度低分化中高分化腫瘤直徑（cm）≥4＜4宮頸浸潤深度≥2/3＜2/3 n 41 31 33 39 30 42 28 44 27 45 25 47 HIF-1α（pg/mL）209.25±39.46 213.48±42.01 240.29±46.17 186.35±35.04 244.18±44.09 187.42±33.16 250.06±50.11 186.26±37.25 212.08±38.42 210.46±40.09 253.64±52.14 188.43±41.07 P 0.663＜0.01＜0.01＜0.01 0.867＜0.01 DcR3（pg/mL）617.14±126.20 612.24±130.19 691.25±130.34 560.59± 90.05 680.37±121.08 568.36± 92.23 683.21±125.30 571.64± 96.79 618.16±117.28 613.15±120.03 687.15±128.19 576.67±102.34 P 0.873＜0.01＜0.01＜0.01 0.863＜0.01 TSGF（U/mL）85.22±14.09 82.64±15.11 100.27±22.23 70.44±10.15 105.18±24.46 69.06±12.20 103.31±21.79 71.89±15.48 85.12±14.27 83.50±16.02 104.25±20.91 73.40±12.33 P 0.458＜0.01＜0.01＜0.01 0.667＜0.01

3 討論

宮頸癌是造成女性死亡的主要惡性腫瘤疾病，其病死率僅次于乳腺癌，患者的5 年生存率與臨床分期顯著相關(guān)，故及早確診、及時(shí)采取治療措施對(duì)延長生存期、提高生存率具有重要意義［6］。腫瘤標(biāo)志物主要是指預(yù)示腫瘤發(fā)生的一類物質(zhì)，可存在于體液、血液、組織、細(xì)胞內(nèi)，多被應(yīng)用于腫瘤疾病的篩查、診斷［7-8］。因此，積極探索客觀、可靠的腫瘤標(biāo)志物，對(duì)于及早發(fā)現(xiàn)、明確診斷宮頸癌至關(guān)重要。

研究證實(shí)，缺氧是腫瘤發(fā)生與進(jìn)展的共同機(jī)制，不僅能改變基因組穩(wěn)定性、抑制細(xì)胞凋亡、加快細(xì)胞增殖，也是降低腫瘤放化療敏感性的主要原因［9-10］。HIF-1α 是一種重要的缺氧誘導(dǎo)因子，可結(jié)合缺氧應(yīng)答靶基因，促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)、血管生成、細(xì)胞增殖、組織轉(zhuǎn)移等多種細(xì)胞生命活動(dòng)［11］。劉家利等［12］報(bào)道顯示，HIF-1α 在子宮內(nèi)膜癌組織中的陽性表達(dá)率升高，說明其參與了子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生過程。本研究結(jié)果顯示，宮頸癌組血清HIF-1α 水平高于宮頸良性病變組、健康組，與上述研究結(jié)果相符。推測原因，HIF-1α 過表達(dá)可通過誘導(dǎo)局部缺氧環(huán)境，加重局部組織氧化應(yīng)激反應(yīng)及炎癥反應(yīng)，從而提高宮頸上皮細(xì)胞病變風(fēng)險(xiǎn)，最終引發(fā)宮頸癌［13］。本研究還表明，F(xiàn)IGO 分期Ⅲ～Ⅳ期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)低分化、宮頸浸潤深度≥2/3 的宮頸癌患者血清HIF-1α 水平升高，提示HIF-1α 與宮頸癌病情密切相關(guān)，可能與其能提高腫瘤細(xì)胞活性、增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞DNA 擴(kuò)增速度及侵襲能力有關(guān)。

DcR3 是一種分泌型蛋白，可特異性結(jié)合LIGHT、TLIA、FasL 等配體，并對(duì)其介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡產(chǎn)生負(fù)調(diào)控作用，達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞凋亡的目的［14］。研究顯示，DcR3在肝癌、胰腺癌中呈高表達(dá)，提示其參與了多種惡性腫瘤的發(fā)生［15-16］。JIANG等［17］對(duì)12 篇DcR3 與女性生殖系統(tǒng)腫瘤的相關(guān)研究進(jìn)行Meta 分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)DcR3 在1 127 例女性生殖道腫瘤患者癌組織中高表達(dá)，是女性生殖道腫瘤的高危因素。本研究結(jié)果顯示，宮頸癌患者血清DcR3 水平較高，且ROC 曲線顯示其單獨(dú)診斷宮頸癌的 AUC 高達(dá) 0.812，高于 HIF-1α 和 TSGF，可見DcR3 水平檢測對(duì)宮頸癌具有較高的診斷價(jià)值。DcR3 能通過負(fù)調(diào)控腫瘤細(xì)胞凋亡，提高腫瘤細(xì)胞的存活率，還能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞免疫逃避，從而加速宮頸癌發(fā)生。劉芳等［18］認(rèn)為，血清DcR3 與腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，血清DcR3與宮頸癌FIGO分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、宮頸浸潤深度、組織學(xué)分化程度等多種臨床病理參數(shù)均密切相關(guān)，說明DcR3 可從多方面加快宮頸癌病情進(jìn)展，可作為判斷病情程度的有效指標(biāo)。

TSGF 屬于多肽類物質(zhì)，是一種新型腫瘤標(biāo)志物，由腫瘤血管生成、分泌［19］。研究顯示，TSGF是與其他腫瘤標(biāo)志物不相關(guān)的獨(dú)立物質(zhì)，可于其他腫瘤標(biāo)志物未發(fā)生改變的癌變早期即呈現(xiàn)出異常表達(dá)狀態(tài)［20］。本研究結(jié)果顯示，與健康者、宮頸良性病變者相比，宮頸癌患者血清TSGF水平明顯升高，且當(dāng)其＞65.51 U/mL 時(shí)診斷宮頸癌的靈敏度為69.44%、特異度為80.85%，說明TSGF 可作為診斷宮頸癌的一項(xiàng)血清學(xué)指標(biāo)。分析原因，TSGF具有促進(jìn)惡性腫瘤血管增生，加速腫瘤病變形成等作用，從而促使其血清水平在惡性腫瘤早期明顯升高［21］。但本研究結(jié)果顯示，血清TSGF 與宮頸癌的FIGO 分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、宮頸浸潤深度、組織學(xué)分化程度有關(guān)，但與腫瘤直徑無明顯相關(guān)性。與余曉輝等［22］研究結(jié)果不一致，可能是由于選取研究對(duì)象差異性、血清檢測方法不同等因素造成。同時(shí)本研究結(jié)果顯示，血清HIF-1α、DcR3、TSGF 聯(lián) 合 診 斷 宮 頸 癌 的 靈 敏 度 為75.00%、特異度為86.74%，明顯優(yōu)于三者單獨(dú)診斷，提示三組聯(lián)合檢測可為宮頸癌的診斷提供更可靠依據(jù)。但本研究選取樣本量較少，可能造成數(shù)據(jù)偏移，需作進(jìn)一步分析與探討。

綜上可知，宮頸癌患者血清HIF-1α、DcR3、TSGF水平均升高，三者聯(lián)合檢測在宮頸癌的診斷中具有可靠價(jià)值，且三者與FIGO分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分化程度、宮頸浸潤深度均密切相關(guān)，有助于為臨床評(píng)估病情提供參考依據(jù)。