羅嫄 張潔

成都市食品藥品檢驗(yàn)研究院，四川 成都610045

頭孢呋辛鈉為一種半合成第二代頭孢菌素，對革蘭氏陽性菌的活性與第一代頭孢相仿，對革蘭氏陰性菌的作用較第一代頭孢強(qiáng)。因其水溶液穩(wěn)定性較差，故靜脈給藥制劑做成注射用粉針劑型。國內(nèi)注射用頭孢呋辛鈉生產(chǎn)企業(yè)77 家，批準(zhǔn)文號310 個，分為0.75g、1.0g、1.5g 和2.0g 四種規(guī)格，國外注射用頭孢呋辛鈉有明可欣、安可欣和西力欣。因國產(chǎn)制劑的輔料、生產(chǎn)工藝和進(jìn)口制劑有一定差異，故本文將以塞浦路斯的安可欣為參比，比較25 批次國產(chǎn)注射用頭孢呋辛鈉制劑的質(zhì)量。進(jìn)口注射用頭孢呋辛鈉的標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)與含量測定項(xiàng)與國產(chǎn)制劑所采用標(biāo)準(zhǔn)（《中國藥典》2015 版二部［1］）不同，此次對比均采用國產(chǎn)制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為判定標(biāo)準(zhǔn)［2］。

1 儀器與試藥

Waters 2695-2998 液相色譜儀；島津SCL-10Avp液相色譜儀；梅特勒BP211D 電子天平；梅特勒MS205DU電子天平；島津AEG220 電子天平；梅特勒FE20pH計(jì)；梅特勒V30 水分儀。乙腈為色譜純（Fisher Scientific）；水為超純水；其余試劑均為分析純。頭孢呋辛對照品（中國食品藥品檢定研究院，130493-201105，含量92.1%）；注射用頭孢呋辛鈉制劑7 個廠家共25 批（以1～25 代替）；安可欣1 批（批號：C309AH，規(guī)格：0.75g）。

2 方法與結(jié)果

2.1 性狀 進(jìn)口制劑呈類白色粉末狀，其余制劑顏色均較進(jìn)口制劑偏黃，程度不一，但均符合《中國藥典》2015 版二部“注射用頭孢呋辛鈉”項(xiàng)下規(guī)定。

2.2 溶液的顏色 取5 瓶，按標(biāo)示量分別加0.05mol/L乙二胺四醋酸二鈉溶液制成每1mL 中含0.1g 的溶液，目視比較。進(jìn)口制劑顏色與黃色5 號相當(dāng)，25 批國產(chǎn)制劑中有4 批（編號為9、19、21、22）顏色淺于進(jìn)口制劑，有3 批（編號為3、10、18）與進(jìn)口制劑相當(dāng)，有18批顏色比進(jìn)口制劑深。

2.3 聚合物

2.3.1 色譜條件。色譜柱：自制葡聚糖凝膠G-10 聚合物柱；流動相A：pH7.0 的0.025 mol/L 磷酸鹽緩沖液，流動相B：水；流速：1.5mL/min；檢測波長：254nm；進(jìn)樣量：20μL。

2.3.2 溶液的配制。稱取藍(lán)色葡聚糖2000 約12.5mg，置25mL 量瓶中，加水稀釋至刻度，即得0.5mg/mL 的藍(lán)色葡聚糖2000 溶液。精密稱取頭孢呋辛鈉約0.2g，加0.5mg/mL 的藍(lán)色葡聚糖2000 溶液稀釋至10mL，即得系統(tǒng)適用性溶液。精密稱取頭孢呋辛鈉約0.2g，加水稀釋至10mL，即得供試品溶液。精密稱定頭孢呋辛鈉對照品11.52mg，置100mL 量瓶中，加水稀釋至刻度，精密量取4mL，加水稀釋至10mL，即得40μg/mL 的對照品溶液。

2.3.3 系統(tǒng)適應(yīng)性結(jié)果。理論板數(shù)按藍(lán)色葡聚糖2000計(jì)為1081（A 相）和939（B 相）；拖尾因子為0.9（A 相）和0.8（B 相）；在兩種系統(tǒng)中藍(lán)色葡聚糖2000 峰保留時間比值為1.04；A 相中供試品溶液聚合物峰與藍(lán)色葡聚糖2000 峰保留時間比值為0.98；B 相中對照品溶液峰與藍(lán)色葡聚糖2000 峰保留時間比值為1.02；系統(tǒng)適應(yīng)性溶液中高聚體的峰高與單體與高聚體之間的谷高比大于2.0。

2.3.4 測定結(jié)果。聚合物含量所有制劑均較低，在0.002%～0.05%范圍內(nèi)。進(jìn)口制劑測定結(jié)果為0.003%，有3 批國產(chǎn)制劑（編號為5、18、24）聚合物含量與之相當(dāng)，其余均大于進(jìn)口制劑測定值。樣品圖譜見圖1。

圖1 聚合物樣品圖

2.4 酸堿度 精密稱取供試品約1g，加水10mL 溶解，制成0.1g/mL 的溶液，測定。此項(xiàng)測定結(jié)果國產(chǎn)制劑和進(jìn)口制劑相差較為明顯。進(jìn)口制劑結(jié)果為7.7，國產(chǎn)制劑有3 批（編號為3、18、22）與之相同，其余均高于進(jìn)口制劑，在7.9～8.4 之間。

2.5 水分 進(jìn)口制劑測定結(jié)果為2.1%，有2 批國產(chǎn)制劑（編號為13、14）低于此結(jié)果，為2.0%，有5 批（編號為6、10、16、19、21）與進(jìn)口制劑結(jié)果相同，其余均高于此結(jié)果，在2.2%～2.4%之間。

2.6 有關(guān)物質(zhì)

2.6.1 色譜條件：色譜柱：Agilent C8 柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動相A：pH3.4 醋酸鹽緩沖液，流動相B：乙腈，梯度洗脫程序見表1；流速：1.5mL/min；檢測波長：273nm；進(jìn)樣量：20μL。見表1。

表1 HPLC 梯度洗脫程序

2.6.2 溶液的配制。稱取頭孢呋辛鈉對照品約5mg，置10mL 量瓶中，加水稀釋至刻度，置60℃水浴放置30 min，放冷，即得系統(tǒng)適用性溶液。精密稱取頭孢呋辛鈉約50mg，加水稀釋至100mL，即得0.5mg/mL 的供試品溶液。精密量取供試品溶液1mL，加水稀釋至100mL，即得5μg/mL 的對照品溶液。

2.6.3 系統(tǒng)適應(yīng)性結(jié)果。頭孢呋辛峰與去氨甲酰頭孢呋辛峰的分離度為5.4；頭孢呋辛峰與后相鄰雜質(zhì)峰的分離度為5.4。

2.6.4 測定結(jié)果。有關(guān)物質(zhì)中統(tǒng)計(jì)了最大單個雜質(zhì)含量、總雜質(zhì)含量以及雜質(zhì)個數(shù)（計(jì)峰面積大于對照溶液主峰面積0.05%的雜質(zhì)），有個別批次雜質(zhì)含量明顯偏高。樣品圖譜見圖2，測定結(jié)果見表2。

2.7 含量測定

2.7.1 色譜條件。色譜柱：AgilentC8 柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動相：pH3.4 醋酸鹽緩沖液：乙腈（85：15）；流速：1.0mL/min；檢測波長：273nm；進(jìn)樣量：20μL。

圖2 有關(guān)物質(zhì)樣品圖

2.7.2 溶液的配制。稱取供試品約5mg，置10mL 量瓶中，加水稀釋至刻度，置60℃水浴放置30 分鐘，放冷，即得系統(tǒng)適用性溶液。精密稱取頭孢呋辛鈉對照品約10mg，加水稀釋至100mL，即得0.1mg/mL 的對照品溶液。精密稱取供試品約100mg，加水稀釋至100mL，搖勻，精密量取此溶液1mL，加水稀釋至10mL，即得0.1mg/mL 的供試品溶液。

2.7.3 系統(tǒng)適應(yīng)性結(jié)果。頭孢呋辛峰與去氨甲酰頭孢呋辛峰的分離度為3.0；頭孢呋辛峰與相對保留時間約為1.1 處雜質(zhì)峰的分離度為4.4。

2.7.4 測定結(jié)果。無水物含量與水分值有關(guān)，但總的來說相差不大，有兩批較低，為91.5%和92.2%，一批較高，為96.0%；按裝量計(jì)算含量結(jié)果相差相對較大，在95.6%～102.9%之間，但結(jié)果均符合中國藥典規(guī)定。

3 討論

頭孢呋辛較不穩(wěn)定，降解以后最大的產(chǎn)物是去氨甲酰頭孢呋辛，外觀最明顯的變化是顏色會變深，從干燥狀態(tài)的粉末或溶解的溶液均可觀察到，所以其質(zhì)控的關(guān)鍵指標(biāo)是水分、光線及溫度［3，4］。此次比較的樣品來看，國產(chǎn)制劑的粉末顏色深于進(jìn)口制劑，除生產(chǎn)工藝處方配比的原因外，一是與生產(chǎn)日期是否接近相關(guān)，二是與保存環(huán)境是否適宜相關(guān)。

供靜脈注射或肌肉注射用的制劑的酸堿度會影響患者使用感受，故對于酸堿度會有一定的范圍規(guī)定。此次的所有制劑均在范圍內(nèi)，但根據(jù)本單位長期檢驗(yàn)進(jìn)口安可欣的情況來看，進(jìn)口制劑一般很少有pH 值高于8 的，但國產(chǎn)制劑高于8 比例較大，這應(yīng)該與處方的配比有一定關(guān)系。

聚合物是被發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生藥品不良反應(yīng)的因素之一，而水分是影響聚合物含量的重要因素，尤其是溶解之后的樣品聚合物含量會急劇增高，故此類藥品往往要求臨用新制。此次比較的所有制劑水分含量只有B 廠家兩個批次、D 廠家一個批次、E 廠家一個批次和G 廠家兩個批次稍微偏高，為2.4%，其余相差不大，而所有制劑聚合物含量也均較低，差異較小。雖然國產(chǎn)制劑所測結(jié)果較進(jìn)口制劑略微偏大，但并沒有非常明顯的增大，這一項(xiàng)檢查獲得較為滿意的結(jié)果。

表2 樣品測定結(jié)果（%）

有關(guān)物質(zhì)也是引起藥品不良反應(yīng)的主要因素［5］。此次檢測的國產(chǎn)制劑無論是最大單個雜質(zhì)還是總雜質(zhì)都與進(jìn)口制劑相差不大，僅有D 廠家和G 廠家有一個批次的最大單個雜質(zhì)有0.4%，其中D 廠家有兩個批次的總雜質(zhì)超過1%，可能與其生產(chǎn)環(huán)節(jié)有關(guān)。從雜質(zhì)個數(shù)上來講，B、D、E、F 這四個廠家各有一個批次≥6 個雜質(zhì)，與進(jìn)口制劑的相差不大，表明研究用樣品的安全性控制是達(dá)標(biāo)的。

含量測定結(jié)果與當(dāng)批制劑的水分和裝量有關(guān)，結(jié)果均符合規(guī)定，僅有E 廠家有一個批次在所有結(jié)果中偏低。這表明國產(chǎn)制劑的含量是得到保證的。

通過本次實(shí)驗(yàn)的比較可以看出，7 個廠家25 個批次國產(chǎn)制劑與進(jìn)口制劑在多個項(xiàng)目的檢查中體現(xiàn)出國產(chǎn)仿制藥與進(jìn)口的產(chǎn)品還是存在著質(zhì)量差異，不同廠家樣品之間也存在質(zhì)量差異。希望此次研究的結(jié)果能為臨床用藥帶來一定的參考意義。

開展藥品質(zhì)量評價(jià)對于促進(jìn)我國仿制藥整體水平的提升大有積極意義。臨床醫(yī)師和藥師作為藥品使用及臨床評價(jià)的最直接的反饋者，是藥品質(zhì)量評價(jià)不可或缺的一環(huán)，應(yīng)充分重視其作用，為臨床安全合理用藥提出寶貴的意見和建議。