李 軍，黃佐興，李 偉，侯小林，黃 新，張 賓，韓猛立，吳桐忠*

（1.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第十師北屯市畜牧獸醫(yī)工作站，新疆 北屯836000；2.新疆農(nóng)墾科學(xué)院/省部共建綿羊遺傳改良與健康養(yǎng)殖國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆 石河子832000）

小反芻獸疫（Peste des petits ruminants，PPR）是由小反芻獸疫病毒（Peste des petits ruminants virus，PPRV）感染小型反芻動(dòng)物如山羊、綿羊?qū)е碌囊环N以發(fā)熱、腹瀉、口炎、肺炎為主要臨床特征的急性烈性接觸性傳染病[1，2]。PPR的發(fā)病率和病死率分別高達(dá)100%和90%[3]，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為法定報(bào)告動(dòng)物疫病，我國(guó)則將其列為一類動(dòng)物疫病，世界糧農(nóng)組織將其列為緊急預(yù)防系統(tǒng)規(guī)劃的重點(diǎn)疾病[4]。據(jù)報(bào)道，該病自1942年于西非的科特迪瓦被首次發(fā)現(xiàn)以來(lái)[5]，目前已蔓延至亞洲、中東和非洲等全球70多個(gè)國(guó)家，致使超過(guò)17億只山羊和綿羊（占全球總量的80%）處于嚴(yán)重威脅狀態(tài)下[6，7]。PPR自2007年傳入我國(guó)西藏阿里地區(qū)，并被迅速控制撲滅，至2013年底開(kāi)始，又在我國(guó)多個(gè)省份爆發(fā)[8]，2014年我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部（原農(nóng)業(yè)部）將其列為強(qiáng)制免疫病種。

為了進(jìn)一步了解2017-2020年第十師北屯市（以下簡(jiǎn)稱師市）PPR免疫抗體水平，評(píng)估師市轄區(qū)內(nèi)PPR的防疫效果，也為了檢驗(yàn)師市政府購(gòu)買重大動(dòng)物疫病免疫的實(shí)踐成效，查漏補(bǔ)缺，為今后繼續(xù)擴(kuò)大政府購(gòu)買服務(wù)的范圍，確保服務(wù)質(zhì)量，處理好政府、第三方服務(wù)機(jī)構(gòu)、服務(wù)對(duì)象之間的關(guān)系，明確責(zé)權(quán)利，提供參考依據(jù)。

1 材料方法

1.1 樣品來(lái)源

多數(shù)樣品采集于2018-2020年每年集中的春秋防疫結(jié)束后25～40 d，采取配額抽樣與隨機(jī)抽樣相結(jié)合的方法進(jìn)行，確保樣品的代表性和覆蓋性；少數(shù)樣品為定點(diǎn)檢測(cè)時(shí)采集。采樣時(shí)按照師市畜牧獸醫(yī)工作站統(tǒng)一制作的采樣單和采樣要求進(jìn)行。共采集來(lái)自師市所屬8個(gè)單位的4 010份有效血清樣本（詳見(jiàn)表1）。

表1 師市各單位不同年份血清樣本采集數(shù)據(jù) 份

1.2 疫苗試劑

小反芻獸疫活疫苗為政府統(tǒng)一采購(gòu)自天康生物股份有限公司產(chǎn)品，小反芻獸疫阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒產(chǎn)自青島立見(jiàn)診斷技術(shù)發(fā)展中心。

1.3 儀器耗材

酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、離心機(jī)、微量移液器、恒溫培養(yǎng)箱、微型振蕩器、超純水儀等。

1.4 檢測(cè)方法

嚴(yán)格按照小反畜獸疫ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)對(duì)血清樣品進(jìn)行檢測(cè)，具體步驟如下：

對(duì)照孔每孔依次加入50μL PPR陽(yáng)性、陰性血清，稀釋液（酶標(biāo)單抗對(duì)照），各做2個(gè)平行。樣品孔每孔加入25μL樣品稀釋液和25μL待測(cè)血清樣品，輕振混勻（勿溢出），37℃孵育60 min。

每孔加入300μL洗滌液1×，洗板4次，拍干，每孔加入50μL酶標(biāo)抗體，37℃孵育30 min。

每孔加入300μL洗滌液1×，洗板4次，拍干，每孔加入50μL底物溶液，室溫避光反應(yīng)15 min。

每孔加入50μL的終止液，測(cè)定450 nm波長(zhǎng)處的OD值。

1.5 結(jié)果判斷

操作和結(jié)果判斷嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行；陽(yáng)性血清抑制率即PIPC＞60，陰性血清抑制率即PINC＜40，實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效；否則重新進(jìn)行試驗(yàn)；樣品抑制率PIs＞50，結(jié)果為陽(yáng)性；PIs≤50，結(jié)果為陰性。樣品合格率達(dá)70%以上為合格單位（社/戶），（注：個(gè)體（表觀）免疫合格率（AP）=個(gè)體免疫合格數(shù)/檢測(cè)樣品總數(shù)×100%，群體（表觀）免疫合格率（HAP）=免疫合格場(chǎng)數(shù)/檢測(cè)場(chǎng)數(shù)×100%）。

2 檢測(cè)結(jié)果

2.1 總體情況

本次調(diào)查涉及八個(gè)單位四年來(lái)采集的4 010份樣品，抗體合格率為84.69%（3 396/4 010），符合國(guó)家防疫要求。具體每個(gè)單位檢測(cè)合格率依次為A 84.20%（1 103/1 310），B 82.08%（435/530），C 82.56%（355/430），D 76.11%（137/180），E 87.22%（157/180），F(xiàn) 84.12%（143/170），G 86.45%（268/310），H 88.67%（798/900）；高于平均合格率的有三家單位，分別是E、G、H，其中H單位的合格率最高，D單位的合格率最低。

2.2 年份統(tǒng)計(jì)

按照不同年份對(duì)8個(gè)單位的抗體檢測(cè)結(jié)果（見(jiàn)表2）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果表明2017年各單位合格率為85.22%（865/1 015），2018年為79.13%（819/1 035），2019年為87.18%（911/1 045），2020年為87.65%（802/915），其中2018年最低，2020年最高。

表2 不同年份各單位小反芻獸疫抗體檢測(cè)情況 份

2.3 類別統(tǒng)計(jì)

按照不同年份合作社和養(yǎng)殖大戶的抗體檢測(cè)結(jié)果（見(jiàn)表3）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果表明養(yǎng)殖合作社的抗體合格率為84.81%（1 340/1 580），略高于養(yǎng)殖大戶的84.65%（2 057/2 430），差異不顯著（P＞0.05），均接近于平均合格率84.69%（3 396/4 010）。

表3 不同年份各養(yǎng)殖合作社和大戶小反芻獸疫抗體檢測(cè)情況份

3 討論分析

從小反芻獸疫抗體檢測(cè)整體情況來(lái)看，2017-2020年師市轄區(qū)內(nèi)整體免疫血清抗體合格率為84.69%（3 396/4 010），符合國(guó)家農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的相關(guān)要求。

從各單位檢測(cè)情況來(lái)看，各單位之間的抗體檢測(cè)結(jié)果參差不齊，且抗體合格率最高的H單位為88.67%（798/900），較最低的D單位76.11%（137/180）高出近12.00%。利用IBM spss25.0軟件分析，結(jié)果顯示8個(gè)單位分為兩個(gè)大組A、B、C、D和E、F、G、H，差異極顯著（P＜0.01）（如表2所示）。從不同年份檢測(cè)情況來(lái)看，除2019年和2020年檢測(cè)結(jié)果差異不顯著（P＞0.05）外，其余年份之間差異均極顯著（P＜0.01）（如表3所示）。從不同類別統(tǒng)計(jì)結(jié)果小反芻獸疫抗體群間分布來(lái)看，養(yǎng)殖合作社和養(yǎng)殖大戶之間的差異不顯著（P＞0.05），整體水平趨于一致。

此次小反芻獸疫抗體檢測(cè)結(jié)果與疆內(nèi)外其他地區(qū)的差異不大，免疫抗體合格率均在70.00%以上，如2019年哈密市伊州區(qū)小反芻獸疫抗體檢測(cè)的總體合格率為80.16%（楊嫻靜等[9]）；2017-2019年河南省羊群小反芻獸疫抗體檢測(cè)的個(gè)體合格率為83.23%，平均場(chǎng)群合格率為86.75%（趙勝杰等[10]）；2017年、2018年榆林市橫山區(qū)小反芻獸疫抗體檢測(cè)的合格率分別為87.93%、90.12%（魯印國(guó)等[11]）；2017-2019年山西全省小反芻獸疫免疫抗體平均個(gè)體和群體合格率分別為82.96%、81.19%（王治維等[12]），云南西雙版納州規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)和散養(yǎng)戶羊小反芻獸疫免疫抗體合格率分別為74.44%、81.98%（閆曉霞等[13]）等。各地檢測(cè)的結(jié)果顯示PPR免疫抗體合格率雖有差異，但均高于國(guó)家農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求最低標(biāo)準(zhǔn)（70.0%），表明我國(guó)目前的小反芻獸疫免疫防控效果較好，為下一步開(kāi)展PPR凈化工作奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

對(duì)以上結(jié)果進(jìn)行分析，首先可能與各單位重視程度有直接關(guān)系，導(dǎo)致各單位防疫結(jié)果出現(xiàn)較大差距；其次可能與2018年防疫行業(yè)部門(mén)組織管理形式調(diào)整有關(guān)，2019年開(kāi)始實(shí)施政府購(gòu)買重大動(dòng)物疫病防疫工作服務(wù)，由第三方機(jī)構(gòu)來(lái)承擔(dān)具體的防疫工作，職能部門(mén)做好監(jiān)督檢驗(yàn)，從防疫結(jié)果來(lái)看，達(dá)到了預(yù)期的效果，具備推廣的基礎(chǔ)和價(jià)值；最后從合作社和養(yǎng)殖大戶檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，體現(xiàn)出師市轄區(qū)內(nèi)防疫水平和防疫意識(shí)沒(méi)有差異，具有普遍性，間接地體現(xiàn)出廣大養(yǎng)殖戶和防疫人員對(duì)重大動(dòng)物疫病防控思想上重視、行動(dòng)上認(rèn)真與落實(shí)上不打折扣。

存在的不足是此次統(tǒng)計(jì)單位、年份和類別之間跨度較大，統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析的還不夠細(xì)致，如春季和秋季防疫、城郊區(qū)和邊境區(qū)、養(yǎng)殖合作社和養(yǎng)殖大戶的數(shù)量等，在今后的工作中加以改進(jìn)。還有一點(diǎn)值得關(guān)注，就是關(guān)于重大動(dòng)物疫病師市動(dòng)物防疫部門(mén)只做血清抗體檢測(cè)，未做相對(duì)應(yīng)的病原學(xué)檢測(cè)，如后續(xù)條件允許可開(kāi)展相關(guān)工作。

4 結(jié)論

第十師北屯市轄區(qū)內(nèi)8個(gè)單位的羊小反芻獸疫免疫抗體檢測(cè)結(jié)果顯示不同年份、單位之間雖有波動(dòng)，但均達(dá)到了國(guó)家農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，且養(yǎng)殖合作社與養(yǎng)殖大戶免疫抗體合格率之間差異不顯著，但部分單位仍需提高認(rèn)識(shí)，狠抓落實(shí)，以便進(jìn)一步提高免疫合格率。還有一點(diǎn)，此次對(duì)檢測(cè)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)分析表明，師市轄區(qū)內(nèi)重大動(dòng)物疫病免疫形式已由以前的政府全程負(fù)責(zé)順利過(guò)渡到政府履行防疫主體責(zé)任、職能部門(mén)負(fù)責(zé)監(jiān)督監(jiān)管、第三方專業(yè)機(jī)構(gòu)承擔(dān)具體防疫任務(wù)與服務(wù)，呈現(xiàn)權(quán)責(zé)明晰，任務(wù)具體，效果顯著的市場(chǎng)化運(yùn)作狀態(tài)，為進(jìn)一步拓寬畜牧獸醫(yī)行業(yè)市場(chǎng)化服務(wù)奠定了基礎(chǔ)和提供了實(shí)踐先例。