張 瀟，位 蘭，李新正，李國建，肖曙光，邢啟銀，楊建平

(1.河南牧業(yè)經(jīng)濟學院 動物科技學院，河南 鄭州 450046； 2.河南科技大學 動物科技學院，河南 洛陽 471000)

硼(B)是微量元素之一，資源豐富，廣泛分布于自然界中。硼是動物機體可能的必需微量元素之一，通過影響多種酶的活性及能量底物的利用，進而調(diào)節(jié)機體多種生理功能[1]。硼對動物機體礦物質(zhì)代謝、蛋白質(zhì)代謝、脂肪代謝和免疫功能具有調(diào)節(jié)作用[2-5]。商常發(fā)等[6]研究了肉仔雞骨骼、肌肉、腦組織中硼的含量。動物機體可以通過食物和飲水來獲取硼，攝取的硼能快速吸收進入體液。目前有關(guān)硼對肉雞免疫功能影響的研究較少。試驗在肉雞飲水中添加不同劑量的硼，研究硼對肉雞免疫功能的影響，探討硼的最佳添加劑量。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗動物

600只1日齡健康A(chǔ)A肉仔雞購自鄭州正德牧業(yè)種雞場。

1.2 試驗試劑

硼酸(AR)、氯化鈉(AR)和乙醇(AR)均購自國藥集團化學試劑有限公司。

1.3 基礎(chǔ)日糧

基礎(chǔ)日糧為玉米-豆粕型，參考《雞飼料標準》(NY/T33-2004)進行配制，基礎(chǔ)日糧的組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.4 試驗設(shè)計

試驗采用單因子完全隨機設(shè)計。試驗設(shè)置5個組：對照組和試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組，每組6個重復，每個重復20只，共600只。對照組飲用自來水(硼含量0.17 mg/L)；試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組飲水中硼添加量分別為40 mg/L、80 mg/L、160 mg/L、320 mg/L，試驗期42 d。

1.5 飼養(yǎng)管理

試驗雞舍為密閉式雞舍，試驗雞采用3層立體式籠養(yǎng)，自由飲水，自由采食。及時清理糞便，保持雞舍內(nèi)清潔衛(wèi)生。雞舍消毒和雞的免疫按照常規(guī)程序進行。

1.6 指標的測定方法

21 d、42 d時，從各重復組中隨機選取5只體重接近的肉雞，空腹稱重。采用一次性采血促凝管，每只雞翅下采血10 mL。頸靜脈放血處死后取法氏囊、胸腺和脾臟，稱重并計算免疫器官指數(shù)，器官指數(shù)=器官重(mg)/活體重(g)。為促凝血，3000 r/min離心5 min后，取上層血清，于-20 ℃保存，采用間接酶聯(lián)免疫吸附分析法測定血清免疫球蛋白含量。

表1 基礎(chǔ)日糧的組成和營養(yǎng)水平 %

(2)粗蛋白質(zhì)和鈣的含量為實測值，其它為計算值

1.7 試驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件的one-wayANOVA進行單因素方差分析，數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示。差異顯著時，用Duncan氏法進行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 飲水中添加硼對肉雞免疫器官指數(shù)的影響

飲水中添加不同劑量硼對肉雞胸腺指數(shù)、脾臟和法氏囊指數(shù)的影響結(jié)果見表2。由表2可知，試驗Ⅰ、Ⅲ組雞胸腺指數(shù)在試驗21 d時與對照組相比，差異不顯著(P>0.05)，試驗Ⅱ、Ⅳ組表現(xiàn)差異顯著(P<0.05)，但在試驗42 d時Ⅰ、Ⅳ組差異性不變，試驗II組與對照組相比差異不顯著(P>0.05)，試驗Ⅲ組與對照組相比差異顯著(P<0.05)；試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組雞脾臟、法氏囊指數(shù)在試驗21 d時與對照組相比差異不顯著(P>0.05)，試驗Ⅳ組與對照組相比差異顯著(P<0.05)。但在試驗42 d時，試驗III組與對照組相比，由差異不顯著變?yōu)椴町愶@著；其它組與對照組相比，差異性不變。

試驗結(jié)果可知，飲水中添加硼劑量為80 mg/L，能顯著提高肉雞胸腺指數(shù)，而對脾臟和法氏囊指數(shù)影響不大；添加低劑量硼使雞胸腺、脾臟和法氏囊指數(shù)略有升高，而高劑量添加使胸腺、脾臟和法氏囊指數(shù)明顯降低。

表2 飲水硼對肉雞免疫器官指數(shù)的影響 mg/g

2.2 飲水中添加硼對肉雞血清免疫球蛋白的影響

飲水中添加不同劑量硼對肉雞血清中IgA、IgG、IgM有不同程度的影響，結(jié)果見表3。由表3可知，試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組IgA含量在試驗21 d時，與對照組相比差異不顯著(P>0.05)，試驗Ⅳ組差異顯著(P<0.05)；在試驗42 d時，試驗II組IgA含量與對照組相比,由差異不顯著變?yōu)椴町愶@著，其它組與對照組相比,差異性不變；試驗Ⅱ、Ⅳ組IgG含量在試驗21 d時與對照組相比差異顯著(P<0.05)，試驗Ⅰ、Ⅲ組差異不顯著(P>0.05)，在試驗42 d時，試驗Ⅲ組與對照組相比差異顯著(P<0.05)，其它組與對照組相比差異性不變；試驗21 d時，試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組IgM含量與對照組相比均差異不顯著(P>0.05)，42 d時，試驗Ⅱ、Ⅳ組與對照組相比差異顯著(P<0.05)，試驗Ⅰ、Ⅲ組與對照組相比差異性不變。

試驗結(jié)果可知，在飲水中添加適量硼可提高肉雞血清IgA、IgG、IgM含量，以80 mg/L的添加水平效果最佳。當飲水中硼添加量為320 mg/L時，血清中的各種免疫球蛋白含量與對照組相比顯著降低。

表3 飲水硼對肉雞血清免疫球蛋白的影響 g/L

3 討論

3.1 飲水中添加硼對肉雞免疫器官指數(shù)的影響

胸腺、法氏囊和脾臟是家禽的重要中樞免疫器官，其中胸腺參與細胞免疫，法氏囊主要參與機體的體液免疫，脾臟是過濾血液和產(chǎn)生免疫應答的重要場所[7-8]。免疫器官指數(shù)是機體生長發(fā)育情況的反映，也可用于評價機體的免疫功能狀態(tài)[9]。研究發(fā)現(xiàn)，在試驗周期內(nèi)，當飲水中添加低劑量硼時，使得肉雞胸腺、脾臟和法氏囊指數(shù)略有升高，當硼添加劑量為80 mg/L時,能顯著提高肉雞胸腺指數(shù)。表明飲水中添加適量硼，可促進雞免疫器官的發(fā)育，提高雞免疫器官指數(shù)。但當飲水中添加高劑量硼時，肉雞胸腺、脾臟和法氏囊指數(shù)明顯降低，表明硼的攝入量增加影響了機體對其他微量元素的吸收利用[10]。研究結(jié)果與其他學者研究結(jié)果相似：如李升和等[11]研究發(fā)現(xiàn),硼中毒后期的雞耐受量增加，其胸腺得以恢復；商常發(fā)等[6]研究表明，硼中毒對免疫器官有抑制作用，影響機體細胞免疫和體液免疫。高含量硼影響免疫器官發(fā)育，可能進一步影響機體的代謝和呼吸；且硼可結(jié)合兒茶酚胺及腎上腺素，使免疫器官喪失免疫作用。Armstrong 等[12]研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，硼能影響巨噬細胞Fc受體、白細胞介素6，并能促進腫瘤壞死因子α和γ干擾素的表達。硼還能通過影響機體內(nèi)部分激素的水平進調(diào)節(jié)機體內(nèi)糖類、蛋白質(zhì)等的代謝。綜上所述，硼可能影響蛋白質(zhì)和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)代謝從而增加淋巴細胞和免疫器官的發(fā)育。

3.2 飲水中添加硼對肉雞血清免疫球蛋白的影響

動物血清中含有大量的免疫球蛋白，免疫球蛋白參與機體的體液免疫，以此來抵御外源病原體的入侵。其它多種微量元素參與免疫球蛋白的合成及免疫表達水平。研究發(fā)現(xiàn)，日糧中適量添加硼，可明顯提高豬血清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和INF-γ的水平[12]，增加血液白細胞的數(shù)量和分葉核嗜中性粒細胞的比例，提高抗病能力[13]。研究發(fā)現(xiàn)，在試驗周期內(nèi)，飲水中添加適量的硼能提高肉仔雞血清中的免疫球蛋白，當飲水硼添加量為80 mg/L時可顯著提高21 d肉雞血清中IgG含量和42 d肉雞血清中IgA、IgG、IgM的含量。但當飲水中添加高劑量硼時，血清中的各種免疫球蛋白含量與對照組相比顯著降低，表明一定濃度的硼可促進免疫球蛋白的合成。但硼含量較高時，會影響細胞的正常代謝，這與 Fairbrother 等的研究結(jié)果相似。Fairbrother 等[14]研究發(fā)現(xiàn)，增加硼的攝入量可促進反嘴鷸的生長，增加血液和中性粒細胞和淋巴細胞的比例以及淋巴細胞對刀豆 A 的增殖活性，進而增強機體免疫功能，這表明硼對機體免疫功能具有明顯的促進作用。一方面，硼通過影響機體多種代謝酶的活性，進而提高機體抗氧化酶 SOD 和 GASH-Px 的活性，增強機體抗氧化功能，及時清除免疫器官內(nèi)的氧自由基，減弱脂質(zhì)過氧化反應，促進淋巴細胞增殖分化[15，16]。另一方面，硼還參與能量底物的代謝，其與煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)或環(huán)腺苷二磷酸(cADP)核糖結(jié)合，抑制細胞 Ca2+釋放，進而影響淋巴細胞增殖分化[17]。

4 結(jié)論

在AA肉雞飲水中添加適量硼，可以不同程度提高免疫器官指數(shù)和血清中IgA、IgG、IgM含量，推薦臨床添加量為80 mg/L。