鄒 燦，劉祖明，沈 豐，宋曉芳

(湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬東風(fēng)醫(yī)院, 湖北省十堰市442008)

在中國，年齡<60歲男性癌癥患者的肝細(xì)胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)發(fā)病率位居首位[1]。由于HCC發(fā)病癥狀不明顯，易錯過最佳的治療時間，其5年生存率大約為53.3%[2-3]。臨床上HCC治療方案正在不斷完善，但HCC患者預(yù)后生存率并未得到較大改善，這可能與HCC早期診斷延誤，病情發(fā)展較快有關(guān)。大量數(shù)據(jù)顯示，早期診斷是提高HCC患者生存率的關(guān)鍵[4]。目前對于HCC患者預(yù)后判斷主要參考HCC分化程度、腫瘤轉(zhuǎn)移、TNM分期等病理因素，需要增加如分子標(biāo)記物等更為準(zhǔn)確的參數(shù)來對HCC患者預(yù)后進(jìn)行預(yù)測。白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)是重要的細(xì)胞因子，屬于致癌基因ras的下游效應(yīng)物，在免疫防御、細(xì)胞分化、細(xì)胞增殖中具有重要作用。microRNA-155(miR-155)是多功能基因，下游基因可介導(dǎo)分化免疫造血細(xì)胞等，屬于致癌或抑癌基因[5-6]。本研究主要探討血清miR-155聯(lián)合IL-6檢測對HCC患者預(yù)后的評估價值，為臨床HCC診斷及預(yù)后判斷提供理論依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料和方法

1.1 研究對象

選取本院2016年2月—2018年6月手術(shù)切除肝癌組織的HCC患者50例(HCC組)，男42例，女8例，年齡(43.80±4.21)歲(37～74歲)，體質(zhì)量(44.17±3.12) kg (38～75 kg)；病理分級：Ⅰ級16例，Ⅱ級14例，Ⅲ級19例，Ⅳ級1例；腫瘤直徑<5 cm 23例；≥5 cm 27例。另外選擇同期50例體檢健康者作為對照組，男28例，女22例，年齡(45.13±5.10)歲(32～75歲)，體質(zhì)量(45.34±3.54) kg(41～78 kg)。兩組性別、年齡、體質(zhì)量等一般資料比較差異無顯著性(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，研究對象及家屬知情同意。

HCC組納入標(biāo)準(zhǔn)：①病理學(xué)確診為HCC；②均未接受過化療、放療等相關(guān)治療；③病程1年以上。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①嚴(yán)重心、肝、腎等臟器功能障礙者；②肝外組織嚴(yán)重感染或惡性腫瘤者；③存在精神障礙和認(rèn)知障礙者；④已發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移；⑤患有HCC以外的惡性腫瘤；⑥資料不全者。

1.2 檢測方法

采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測IL-6水平，熒光定量PCR法檢測miR-155水平。比較兩組miR-155、IL-6水平，ROC曲線分析IL-6聯(lián)合miR-155水平與HCC患者預(yù)后的關(guān)系，比較其靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度，同時對HCC患者預(yù)后進(jìn)行多元回歸分析。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 兩組血清IL-6、miR-155水平的比較

HCC組IL-6、miR-155水平明顯高于對照組(P<0.05；表1)。

表1 兩組血清IL-6、miR-155水平的比較

2.2 IL-6聯(lián)合miR-155水平對HCC預(yù)后預(yù)測的ROC曲線

IL-6=9.7 μg/L和miR-155=2.5為截斷點，IL-6聯(lián)合miR-155測定對HCC患者預(yù)后的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度均高于IL-6或miR-155單獨測定(P<0.05；圖1，表2)。

圖1 IL-6、miR-155水平對HCC預(yù)后預(yù)測的ROC曲線

表2 IL-6、miR-155水平與HCC患者預(yù)后的相關(guān)性分析

2.3 影響HCC患者預(yù)后的單因素分析

TNM分期、腫瘤直徑、病理分級、淋巴轉(zhuǎn)移、門靜脈侵犯、高水平miR-155、高水平IL-6是患者預(yù)后的危險因素(P<0.05；表3)。

表3 臨床病理變量與血清IL-6、miR-155水平的關(guān)系

2.4 影響HCC患者預(yù)后的多因素分析

腫瘤大小、淋巴轉(zhuǎn)移、門靜脈侵犯、高水平miR-155及高水平IL-6是影響HCC患者預(yù)后的獨立危險因素(P<0.05；表4)。

表4 影響HCC患者預(yù)后的多因素分析

3 討 論

HCC屬于侵襲性很高的惡性腫瘤，目前，臨床上對HCC的治療主要以肝移植及手術(shù)切除為主，而術(shù)后療效和患者遠(yuǎn)期生存情況與術(shù)后肝癌復(fù)發(fā)具有較大聯(lián)系[7]。因此，如何有效改善患者術(shù)后遠(yuǎn)期生存情況，預(yù)防肝癌復(fù)發(fā)是治療的關(guān)鍵。本研究通過多因素Cox回歸分析發(fā)現(xiàn)，腫瘤大小、淋巴轉(zhuǎn)移、門靜脈侵犯、高水平miR-155及高水平IL-6是影響HCC患者預(yù)后的獨立危險因素。

miR-155是一種潛在的抑癌或致癌基因，屬于典型的多功能基因，可通過異常表達(dá)抑制細(xì)胞周期，促進(jìn)腫瘤蛋白表達(dá)減少，通過降低Caspase-3活性而達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞凋亡的目的，同時還可參與介導(dǎo)炎癥相關(guān)的基因調(diào)節(jié)過程[8-10]。miR-155下游基因可介導(dǎo)心血管疾病、炎癥、免疫造血細(xì)胞分化等較多病理生理過程[11]。有研究結(jié)果顯示，正常乳腺組織與乳腺癌患者的miR-155水平具有較大差異[12]，這說明腫瘤的生物學(xué)及病理特征與miR-155水平具有一定聯(lián)系。也有研究證實，在胰腺癌細(xì)胞株、胰腺癌組織中miR-155常表現(xiàn)為高水平，可作為診斷胰腺癌的重要標(biāo)志物[13-14]。同時，在甲狀腺癌組織、腎透明細(xì)胞癌組織中miR-155水平均高于正常組織[15]。這說明，miR-155可能在一定程度上促進(jìn)腫瘤的發(fā)展。但目前臨床缺乏關(guān)于HCC患者組織及預(yù)后與miR-155關(guān)系的相關(guān)研究。在本研究結(jié)果中，HCC組miR-155水平高于對照組，這說明肝癌組織miR-155水平高于正常肝組織，這可能與miR-155水平升高引發(fā)非小細(xì)胞肺腺癌H157細(xì)胞、肺腺癌A549細(xì)胞增殖加快有關(guān)。

IL-6是一種白細(xì)胞趨化因子，具有生物活性多肽物質(zhì)中的多種功能，主要由內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、多種腫瘤細(xì)胞及單核-巨噬細(xì)胞所分泌。IL-6可通過旁分泌及自分泌來抑制或刺激腫瘤細(xì)胞增殖[16-17]。關(guān)于IL-6抑制或刺激腫瘤細(xì)胞增殖的具體機制目前并不清楚，但有相關(guān)研究表明，IL-6與腫瘤的轉(zhuǎn)移、增殖、細(xì)胞癌基因表達(dá)失控具有緊密聯(lián)系，如骨髓瘤、腎癌等多種腫瘤細(xì)胞增殖均取決于IL-6的分泌能力[18]。在本研究中，HCC組IL-6水平高于對照組，這說明肝癌組織IL-6水平高于正常肝組織。導(dǎo)致肝癌組織IL-6水平升高的原因主要與癌組織浸潤巨噬細(xì)胞，促使IL-6水平升高，腫瘤組織可自行分泌IL-6，細(xì)胞T細(xì)胞增殖反應(yīng)與IL-6的級聯(lián)影響等有關(guān)[19]。

本研究利用ROC曲線發(fā)現(xiàn)，IL-6水平在9.7 μg/L，miR-155水平在2.5時，預(yù)測價值對HCC患者來說最高，且IL-6水平低于9.7 μg/L，miR-155水平低于2.5時患者生存率明顯高于IL-6水平大于9.7 μg/L，miR-155水平大于2.5的患者。通過多因素Cox回歸分析得出，高水平miR-155及高水平IL-6是影響HCC患者預(yù)后的獨立危險因素。同時，在本研究發(fā)現(xiàn)腫瘤大小、淋巴轉(zhuǎn)移、門靜脈侵犯均是影響HCC患者預(yù)后的獨立危險因素。這些因素也很有可能與IL-6及miR-155具有一定聯(lián)系，有待進(jìn)一步研究。

綜上，IL-6與miR-155的高表達(dá)可作為HCC診斷的指標(biāo)之一，同時也可作為評估HCC患者預(yù)后的獨立預(yù)測因子。但由于本研究存在樣本量較少及觀察時間較短的局限性，有待加大樣本量，延長觀察時間，進(jìn)一步深入探討。