高婷 郭瑢 黃勝 陳德滇

惡性腫瘤一直以來(lái)都是威脅人類(lèi)健康的重大疾病，備受關(guān)注。目前，用于研究惡性腫瘤的臨床前模型主要是細(xì)胞系和患者源性的腫瘤異種移植。盡管其為腫瘤的研究做出貢獻(xiàn)，但仍有缺陷。近年來(lái)，一個(gè)新興起的領(lǐng)域—類(lèi)器官，為腫瘤的研究提供了新的平臺(tái)。類(lèi)器官能夠在體外高度重現(xiàn)體內(nèi)腫瘤的原始特征，在藥物研究、預(yù)測(cè)患者對(duì)治療的反應(yīng)以及為患者提供個(gè)性化醫(yī)療方案方面，擁有廣闊的前景。目前，已經(jīng)成功培養(yǎng)出如胃腸［1］、肝［2］、前列腺［3］和乳腺［4］等多種類(lèi)器官。類(lèi)器官的出現(xiàn)，無(wú)疑給腫瘤的研究提供了更多的可能。本文將對(duì)類(lèi)器官的研究現(xiàn)狀及其在腫瘤研究中的應(yīng)用前景進(jìn)行綜述。

1 現(xiàn)有的腫瘤研究模型

人類(lèi)腫瘤較為復(fù)雜，不同的腫瘤患者對(duì)相同的臨床治療反應(yīng)可能存在很大差異。目前，腫瘤進(jìn)展的機(jī)制以及藥物療效和耐藥的產(chǎn)生機(jī)制仍不明確［5］。大量通過(guò)Ⅰ期藥物安全性測(cè)試的抗癌藥物在Ⅱ、Ⅲ期的療效測(cè)試中被淘汰［6］。因此，需要優(yōu)化臨床前療效模型來(lái)改進(jìn)對(duì)臨床治療反應(yīng)的預(yù)測(cè)，降低臨床試驗(yàn)的失敗率。目前，正在使用的幾種人類(lèi)臨床前模型包括細(xì)胞系（cell lines）、患者源性的腫瘤異種移植（patient-derived tumor xenografts，PDTX）和患者源性的腫瘤類(lèi)器官（patientderived tumor organoid，PDTO）［5］。

1.1 細(xì)胞系

細(xì)胞系可能是這些技術(shù)中最常見(jiàn)和最完善的。與大多數(shù)其他體外模型相比，細(xì)胞系操作起來(lái)更容易，成本更低，且易于進(jìn)行基因修飾。細(xì)胞系還能夠在短時(shí)間內(nèi)對(duì)多種藥物和化合物進(jìn)行高通量篩選［7］。但細(xì)胞系通常來(lái)源于單個(gè)細(xì)胞，而腫瘤通常由多種不同的細(xì)胞類(lèi)型組成，可能具有不同的治療敏感性，因此細(xì)胞系不能完整的概括腫瘤多樣性［8］。傳統(tǒng)的細(xì)胞系模型缺乏許多關(guān)鍵的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子，這些因子對(duì)細(xì)胞的增殖、分化和存活起重要作用。因此，利用傳統(tǒng)的細(xì)胞系模型在體外條件下預(yù)測(cè)患者對(duì)治療的體內(nèi)反應(yīng)，可能不夠準(zhǔn)確［7］。此外，細(xì)胞系培養(yǎng)的細(xì)胞是單一的，不能模擬體內(nèi)腫瘤細(xì)胞與其他細(xì)胞（如基質(zhì)細(xì)胞、免疫細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞）的相互作用［9］。

1.2 PDTX

PDTX 是將癌細(xì)胞或組織移植到免疫缺陷的小鼠體內(nèi)建成的臨床前模型［7］。目前，多種癌癥類(lèi)型已經(jīng)建立了PDTX 模型，包括結(jié)直腸癌［10］、胰腺癌［11］和胃癌［12］。PDTX 模型允許移植細(xì)胞或組織在具有脈管系統(tǒng)的腫瘤結(jié)構(gòu)和環(huán)境中生長(zhǎng)［13］。有研究利用原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌的PDTX模型與供體組織相比較，發(fā)現(xiàn)供體組織中檢測(cè)到的突變總數(shù)，僅43%突變出現(xiàn)在相應(yīng)的PDTX 模型中，4 個(gè)原發(fā)腫瘤中不存在的突變出現(xiàn)在PDTX 模型的早期傳代中［14］。由此可見(jiàn)，PDTX 模型無(wú)法完全還原原始腫瘤的基因特性。此外，其還具有諸如耗資耗力、培養(yǎng)周期長(zhǎng)、效率低和難以開(kāi)展高通量藥物篩選工作等局限性［9］。

1.3 PDTO

類(lèi)器官，來(lái)源于組織特異性干細(xì)胞的三維體外細(xì)胞結(jié)構(gòu)，具有自我組織形成類(lèi)似于原始組織的“微型器官”的能力，可以彌補(bǔ)傳統(tǒng)的培養(yǎng)技術(shù)在治療反應(yīng)預(yù)測(cè)方面的不足。有研究從乳腺癌患者切除的腫瘤中獲得腫瘤組織，通過(guò)機(jī)械破壞和酶解結(jié)合的方式去除正常組織并分離出乳腺癌細(xì)胞，在體外三維培養(yǎng)條件下，成功的建成了可長(zhǎng)期培養(yǎng)的乳腺癌類(lèi)器官［4］。與細(xì)胞系相比，PDTO 模型在細(xì)胞形態(tài)和空間結(jié)構(gòu)方面，能更好地顯示與原始腫瘤的相似性。與PDTX 相比，類(lèi)器官更容易進(jìn)行基因修飾［15］，也更適合高通量藥物和治療測(cè)試。盡管PDTO 是一項(xiàng)相對(duì)較新的技術(shù)，但正常組織干細(xì)胞來(lái)源的類(lèi)器官和癌癥干細(xì)胞來(lái)源的類(lèi)器官已經(jīng)在癌癥生物學(xué)和個(gè)性化醫(yī)學(xué)領(lǐng)域做出巨大的貢獻(xiàn)［7］。來(lái)源于正常組織的類(lèi)器官更加接近正常的生理狀態(tài)，可用來(lái)研究人體的生理過(guò)程，藥物研究時(shí)可用來(lái)測(cè)試藥物的內(nèi)臟毒性，期待未來(lái)可以建成用于器官移植的健康類(lèi)器官。來(lái)源于腫瘤組織的類(lèi)器官因其能夠高度還原原始腫瘤特性的特點(diǎn)，在為患者提供個(gè)性化醫(yī)療方面，具有很大的優(yōu)勢(shì)，同時(shí)也為腫瘤進(jìn)展、侵襲和藥物反應(yīng)的研究提供了一個(gè)很好的平臺(tái)。然而，由于缺乏神經(jīng)支配、血管和免疫細(xì)胞，類(lèi)器官的發(fā)展也受到一定的限制［9］。

2 類(lèi)器官的應(yīng)用

類(lèi)器官的應(yīng)用匯總，見(jiàn)圖1。

圖1 類(lèi)器官的應(yīng)用

2.1 藥物研究

在過(guò)去的幾十年里，許多從傳統(tǒng)的細(xì)胞系篩選而來(lái)的抗癌藥物在臨床研究中均失敗。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞毒性藥物，在腫瘤細(xì)胞系中觀察到廣泛的活性，但對(duì)患者的臨床療效卻是有限的。有研究［16］曾評(píng)估體外細(xì)胞系在預(yù)測(cè)臨床療效方面是否可靠。應(yīng)用細(xì)胞系來(lái)預(yù)測(cè)針對(duì)乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、卵巢癌和結(jié)腸癌的細(xì)胞毒性抗癌藥物的藥物活性。結(jié)果表明，體外細(xì)胞系模型對(duì)結(jié)腸癌無(wú)預(yù)測(cè)作用，對(duì)其他3種癌具有預(yù)測(cè)作用。由于腫瘤類(lèi)器官是接近生理的結(jié)構(gòu)，保留了母瘤的特定功能，并能準(zhǔn)確地再現(xiàn)藥物反應(yīng)。因此，類(lèi)器官技術(shù)填補(bǔ)了基于傳統(tǒng)細(xì)胞系的藥物篩選與臨床試驗(yàn)之間的空白。研究表明，類(lèi)器官可以作為評(píng)價(jià)癌癥患者特異性反應(yīng)的良好模型［17-18］。此外，還可用來(lái)探索耐藥性背后的詳細(xì)因果和遺傳改變。目前，一些癌癥的類(lèi)器官生物庫(kù)已經(jīng)建立，用于識(shí)別和測(cè)試新藥物，而健康組織的類(lèi)器官可以用于測(cè)試藥物毒理學(xué)［19］。

2.1.1 藥物篩選 PDTO 在高通量藥物篩選，為患者選擇合適有效的治療方案方面具有很大潛力。目前，已經(jīng)有研究將類(lèi)器官應(yīng)用于藥物篩選［20］。有研究［21］通過(guò)對(duì)20例結(jié)直腸癌患者的腫瘤類(lèi)器官進(jìn)行藥物測(cè)試，證實(shí)腫瘤類(lèi)器官適用于高通量藥物篩選，并可以檢測(cè)基因-藥物關(guān)聯(lián)性。Pauli 等［22］提到在藥物庫(kù)中篩選ER+乳腺癌患者源性病例和BRAF 突變黑色素瘤患者源性病例，發(fā)現(xiàn)他莫昔芬、BRAF 和MEK抑制劑為最佳推薦藥物，表明高通量篩選可以確定臨床已驗(yàn)證的靶向藥物。該研究還認(rèn)為僅基因組學(xué)信息不能夠?yàn)榇蠖鄶?shù)晚期癌癥患者確定治療方案，因此使用PDTO進(jìn)行高通量藥物篩選，以發(fā)現(xiàn)有效的治療方案。并通過(guò)分析2 例子宮惡性腫瘤和2 例結(jié)腸癌來(lái)源的腫瘤細(xì)胞，確定有效的藥物組合，并使用3-D 培養(yǎng)模型和PDTX 模型對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證。上述研究均表明，利用腫瘤類(lèi)器官可進(jìn)行高通量藥物篩選，檢測(cè)基因—藥物關(guān)聯(lián)性，為患者提供個(gè)性化的治療方案。

2.1.2 藥代動(dòng)力學(xué)研究 類(lèi)器官技術(shù)可以應(yīng)用于藥代動(dòng)力學(xué)測(cè)試，這是藥物開(kāi)發(fā)的關(guān)鍵［19］。有研究發(fā)現(xiàn)［23］，由人類(lèi)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞生成的腸類(lèi)器官，具有藥代動(dòng)力學(xué)功能。并發(fā)現(xiàn)在一些小分子化合物的作用下，類(lèi)器官中可檢測(cè)到藥物轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、通過(guò)AB?CB1/MDR1 的外排轉(zhuǎn)運(yùn)活性以及核受體配體對(duì)藥物代謝酶CYP3A4的誘導(dǎo)作用。由此可看出，運(yùn)用類(lèi)器官技術(shù)，可以進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)研究。

2.1.3 藥物毒理學(xué)研究 在藥物開(kāi)發(fā)中，類(lèi)器官技術(shù)的另一個(gè)主要優(yōu)勢(shì)是可以生成和利用正常的類(lèi)器官來(lái)篩選僅針對(duì)腫瘤細(xì)胞而不傷害健康細(xì)胞的藥物［19］。在臨床試驗(yàn)中，不可耐受不良反應(yīng)是導(dǎo)致藥物失敗的主要原因，包括肝臟毒性、心臟毒性和腎臟毒性［19］。肝類(lèi)器官可以用于測(cè)試藥物的肝毒性［24］。藥物相關(guān)的肝毒性主要是通過(guò)細(xì)胞色素P450酶介導(dǎo)的，肝類(lèi)器官能夠接近生理水平觀察到細(xì)胞色素P450酶的作用［25］。心臟毒性反應(yīng)如心律失常和心功能降低也可以在類(lèi)器官中測(cè)試［26］。此外，腎類(lèi)器官也被用于藥物毒理學(xué)研究［27］。將類(lèi)器官技術(shù)應(yīng)用于藥物臨床前的毒理學(xué)研究，有助于降低藥物臨床試驗(yàn)的失敗率，減少藥物臨床試驗(yàn)階段不良事件的發(fā)生（圖2）。

圖2 用類(lèi)器官進(jìn)行藥物篩選

2.2 腫瘤發(fā)生發(fā)展機(jī)制的研究

類(lèi)器官通?？梢詮恼５娜祟?lèi)上皮細(xì)胞中獲取，可在體外對(duì)所有階段的惡性腫瘤進(jìn)行突變建模。有研究提示［28］，在體外培養(yǎng)各種類(lèi)型的癌前結(jié)腸瘤具有可行性?；蛲蛔兪悄[瘤發(fā)生發(fā)展的基礎(chǔ)。為此，多個(gè)研究團(tuán)隊(duì)通過(guò)對(duì)類(lèi)器官進(jìn)行基因修飾，來(lái)研究腫瘤的發(fā)生發(fā)展機(jī)制。有研究認(rèn)為［29］，Kras突變或p53缺失的小鼠胰腺和胃類(lèi)器官，會(huì)導(dǎo)致其發(fā)育異常和過(guò)度增生，將這些類(lèi)器官移植到小鼠體內(nèi)后可形成腫瘤。有研究利用CRISPR-Cas9技術(shù)將4種通常在結(jié)直腸癌中發(fā)生突變的基因（KRAS、TP53、SMAD4 和APC）引入到人類(lèi)腸道組織干細(xì)胞中［30-31］。Drost 等［31］通過(guò)從培養(yǎng)基中去除單個(gè)生長(zhǎng)因子來(lái)選擇突變體，并將其移植到小鼠體內(nèi)，可生長(zhǎng)為具有浸潤(rùn)性癌特征的腫瘤。Matano 等［30］在四突變體的基礎(chǔ)上引入另外一個(gè)突變—PIK3CA，并將此五突變體移植到小鼠的腎囊中，同樣可以形成腫瘤。隨后，Drost 等［32］又利用CRISPR-Cas9 技術(shù)敲除人類(lèi)結(jié)腸類(lèi)器官中關(guān)鍵的DNA 修復(fù)基因，并對(duì)其進(jìn)行全基因組測(cè)序。該研究還發(fā)現(xiàn)，錯(cuò)配修復(fù)基因MLH1缺失的類(lèi)器官可以準(zhǔn)確地模擬錯(cuò)配修復(fù)缺失的結(jié)直腸癌中觀察到的突變譜。有學(xué)者通過(guò)胰腺類(lèi)器官研究證實(shí)KRAS突變可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞成瘤表型，從而促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)［33］。上述研究均闡明了類(lèi)器官的能力，可用于揭示癌癥基因組的復(fù)雜性以及基因突變?cè)谀[瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的重要作用，有助于癌癥精準(zhǔn)治療的藥物靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)。

2.3 臨床治療的研究

2.3.1 個(gè)性化醫(yī)療 個(gè)性化醫(yī)療，也稱(chēng)為精準(zhǔn)醫(yī)療，旨在通過(guò)在分子和藥物基因組學(xué)水平上更好地描述疾病特征，為每個(gè)患者制定有效的治療策略［19］。類(lèi)器官在為患者制定個(gè)性化治療方案上具有巨大的潛力。如測(cè)量來(lái)自囊性纖維化患者的直腸類(lèi)器官中囊性纖維化跨膜電導(dǎo)調(diào)節(jié)器的功能，可以確定哪些人將受益于囊性纖維化跨膜電導(dǎo)調(diào)節(jié)器矯正治療［34］。為了證實(shí)原發(fā)腫瘤的遺傳基因組學(xué)特征能否在類(lèi)器官中被保留下來(lái)，有研究［35］對(duì)來(lái)自14 例轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者的類(lèi)器官的1 977 個(gè)癌癥相關(guān)基因進(jìn)行了基因分析。結(jié)果表明，90%的體細(xì)胞突變?cè)趤?lái)自同一患者的類(lèi)器官和活檢標(biāo)本中是相同的，并且類(lèi)器官和相應(yīng)的原始腫瘤的DNA拷貝數(shù)圖譜的相關(guān)系數(shù)為0.89。表明類(lèi)器官可以很好的捕獲原始腫瘤的遺傳特性，為類(lèi)器官在個(gè)性化醫(yī)療中的應(yīng)用提供有力的證據(jù)。盡管目前類(lèi)器官技術(shù)在個(gè)性化醫(yī)療中還處于不成熟階段，但更深入的研究將完善該模型，拓寬個(gè)性化醫(yī)療的視野，替代傳統(tǒng)的“一刀切”治療方式［19］。

2.3.2 預(yù)測(cè)患者對(duì)治療的反應(yīng) 預(yù)測(cè)患者對(duì)治療的反應(yīng)是類(lèi)器官技術(shù)的另一潛在應(yīng)用?？梢酝ㄟ^(guò)在體外對(duì)患者源性類(lèi)器官進(jìn)行一些治療操作，以此類(lèi)器官對(duì)治療的反應(yīng)來(lái)預(yù)測(cè)提供活檢組織的患者對(duì)治療的反應(yīng)，以便為患者選擇最合適的治療方案。Hubre?cht 類(lèi)器官技術(shù)基金會(huì)進(jìn)行了一項(xiàng)關(guān)于轉(zhuǎn)移性乳腺癌、結(jié)腸癌和非小細(xì)胞肺癌的大型多中心隊(duì)列研究［36］。在該項(xiàng)研究中，來(lái)源于轉(zhuǎn)移病灶活檢的腫瘤類(lèi)器官的藥物反應(yīng)與患者的臨床反應(yīng)呈正相關(guān)。但患者實(shí)際治療方案與體外藥物篩選方案中藥物劑量的差異，是需要進(jìn)一步去探索的難題。目前，已有學(xué)者用轉(zhuǎn)移性胃腸癌的類(lèi)器官來(lái)預(yù)測(cè)患者對(duì)治療的反應(yīng)，并比較了類(lèi)器官和基于患者源性類(lèi)器官的原位小鼠腫瘤異種移植模型對(duì)抗癌藥物的體外反應(yīng)和臨床試驗(yàn)中患者的反應(yīng)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值（預(yù)測(cè)某一特定藥物有效）為88%，陰性預(yù)測(cè)值（預(yù)測(cè)某一特定藥物無(wú)效）為100%［17］。提示患者來(lái)源的類(lèi)器官能夠在體外條件下預(yù)測(cè)患者對(duì)治療的反應(yīng)，為個(gè)性化醫(yī)療提供指導(dǎo)。

2.3.3 免疫治療 免疫治療是一種新穎而有前景的腫瘤治療策略，利用患者自身的免疫系統(tǒng)來(lái)殺死腫瘤細(xì)胞。免疫治療的先決條件是惡性細(xì)胞表現(xiàn)出足夠的免疫原性來(lái)觸發(fā)足夠的免疫反應(yīng)。癌細(xì)胞的突變狀態(tài)，有助于新抗原的產(chǎn)生，激活免疫反應(yīng)。然而，由癌細(xì)胞新抗原引起的免疫反應(yīng)強(qiáng)度不足，可以通過(guò)在體外激活和擴(kuò)增免疫細(xì)胞，應(yīng)用于患者體內(nèi)來(lái)解決［19］。多項(xiàng)研究為類(lèi)器官技術(shù)在免疫治療中的應(yīng)用帶來(lái)新的希望。如上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞在含有白介素-2、白介素-7 和白介素-15 的培養(yǎng)液中，與小鼠腸道類(lèi)器官共培養(yǎng)，可維持增殖狀態(tài)［37］；有研究成功的進(jìn)行T淋巴細(xì)胞與人原代乳腺上皮類(lèi)器官的共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)這些T 淋巴細(xì)胞可以有效地清除三陰性乳腺癌的癌細(xì)胞［38］。這表明，來(lái)自健康獻(xiàn)血者的T淋巴細(xì)胞可以被類(lèi)器官在體外擴(kuò)大和激活，之后用于體內(nèi)治療患者，且可使健康獻(xiàn)血者來(lái)源的T細(xì)胞對(duì)患者來(lái)源的類(lèi)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性效應(yīng)在體外測(cè)試成為可能［19］。將類(lèi)器官與免疫細(xì)胞進(jìn)行體外共培養(yǎng)，可以擴(kuò)增免疫細(xì)胞，增強(qiáng)免疫反應(yīng)，為后續(xù)的免疫治療提供強(qiáng)而有力的保障。此外，研究腫瘤微環(huán)境也離不開(kāi)類(lèi)器官與免疫細(xì)胞及其他細(xì)胞的共培養(yǎng)技術(shù)。

2.4 腫瘤微環(huán)境

腫瘤微環(huán)境（tumor microenvironment，TME）在腫瘤的發(fā)生發(fā)展及治療過(guò)程中，發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，但目前的腫瘤類(lèi)器官模型普遍缺乏完整的微環(huán)境。然而，最近的研究表明，類(lèi)器官與TME細(xì)胞的共培養(yǎng)為研究TME 的某些特征提供了一種新的方法，如胰腺星狀細(xì)胞與胰腺癌類(lèi)器官共培養(yǎng)產(chǎn)生了典型的胰腺癌間質(zhì)纖維增生，并直接導(dǎo)致了胰腺癌的癌相關(guān)成纖維細(xì)胞（cancer associated fibroblast，CAF）亞型的發(fā)現(xiàn)，其中包括分泌白介素-6 以支持類(lèi)器官增殖的亞型［28］。另一關(guān)于PDTO-CAF 共培養(yǎng)的研究揭示了兩種不同CAF 亞型的生化途徑，以及在胰腺導(dǎo)管腺癌微環(huán)境中建立不同成纖維細(xì)胞群的機(jī)制，并闡明了選擇靶向支持腫瘤生長(zhǎng)的CAF的方法［39］。盡管如此，這些共培養(yǎng)系統(tǒng)仍在開(kāi)發(fā)中，目前尚未達(dá)到的目標(biāo)是確定這種PDTO-CAF 共培養(yǎng)是否會(huì)對(duì)傳統(tǒng)和正在研究的藥物產(chǎn)生耐藥性，以及其是否可以用于優(yōu)化體內(nèi)外治療反應(yīng)［28］。為了在體外模擬糖尿病血管病變，最近的一項(xiàng)研究報(bào)道了從多能干細(xì)胞形成人血管類(lèi)器官，這些多能干細(xì)胞自我組織成毛細(xì)血管網(wǎng)絡(luò)，包括內(nèi)皮細(xì)胞和外膜細(xì)胞，并被基底膜包圍［40］。該研究將這些類(lèi)器官移植到小鼠體內(nèi)后，形成了一個(gè)穩(wěn)定灌注的血管樹(shù)，包括動(dòng)脈、小動(dòng)脈和小靜脈。人體血管類(lèi)器官的建成，為研究TME 提供了新的可能。不僅可以采用PDTO與CAF、免疫細(xì)胞共培養(yǎng)，還可以實(shí)現(xiàn)PDTO 與血管類(lèi)器官的共培養(yǎng)，來(lái)模擬更多的TME成分。

3 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，來(lái)源于人體不同組織的類(lèi)器官，可用于藥物的研究，有利于藥物的篩選和新藥的研發(fā)；也可對(duì)其進(jìn)行基因編輯，來(lái)研究腫瘤的發(fā)生發(fā)展機(jī)制；還可在體外預(yù)測(cè)患者對(duì)臨床治療的反應(yīng)，有利于為患者制定個(gè)性化的醫(yī)療方案。雖然類(lèi)器官模型具有諸多優(yōu)勢(shì)但下述問(wèn)題仍亟需解決：1）提高生成效率，縮短類(lèi)器官模型的培養(yǎng)周期，降低培養(yǎng)成本［28］；2）目前的類(lèi)器官主要來(lái)源于上皮細(xì)胞，需要進(jìn)一步研究非上皮類(lèi)器官的培養(yǎng)方式［19］；3）目前暫無(wú)一個(gè)具有類(lèi)器官的最優(yōu)培養(yǎng)條件的標(biāo)準(zhǔn)化方案［9］；4）繼續(xù)完善除免疫細(xì)胞和成纖維細(xì)胞之外的TME成分與類(lèi)器官的共培養(yǎng)［28］。腫瘤是個(gè)復(fù)雜的疾病，無(wú)論發(fā)病機(jī)制、轉(zhuǎn)移機(jī)制，還是患者對(duì)治療的反應(yīng)和耐藥機(jī)制，均有很多尚未明確的問(wèn)題亟需探索。未來(lái)的研究需要不斷完善對(duì)TME 的模擬，以創(chuàng)造更為接近原始腫瘤特性的腫瘤類(lèi)器官模型，從而更為全面地了解惡性腫瘤。