胡 艷 李傳應 吳 成

牛奶蛋白過敏(cow's milk protein allergy, CMPA)是嬰幼兒常見過敏性疾病，可引起多器官受累，嚴重者可影響患兒的生活質量及生長發(fā)育。目前CMPA治療主要是采用游離氨基酸蛋白替代品，然而單一游離氨基酸蛋白替代品治療CMPA患兒總有效率約為50%。研究發(fā)現，維生素D具有良好的免疫調節(jié)作用，可誘導過敏性皮炎、過敏性哮喘等多種過敏性疾病的免疫耐受，阻止過敏反應的發(fā)展并促進機體功能恢復；嬰幼兒體內較低水平的維生素D與CMPA的發(fā)生密切相關。而有關報道輔助性維生素D治療CMPA臨床效果的文獻較少。為此，本文對60例重癥CMPA患兒采用隨機對照研究方法，探討輔助性維生素D聯合游離氨基酸治療CMPA的臨床療效，為臨床進一步提高CMPA的治療效果提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年3月至2020年6月在安徽省兒童醫(yī)院確診的60例重癥CMPA患兒為研究對象，其中男性36例，女性24例；年齡2～6個月，平均(3.37±0.95)個月。按照隨機數字表法分為觀察組及對照組，各30例。兩組患兒的性別、年齡、臨床癥狀等一般資料比較，差異均無統計學意義(

P

>0.05)。見表1。

表1 兩組患兒一般資料比較

1.2 納入與排除標準 納入標準：①所有患兒符合中華醫(yī)學會2013版《中國嬰幼兒牛奶蛋白過敏診治循證建議》中CMPA的診斷標準；②患兒無先天性疾?。虎鬯谢純壕鶠榕Ｄ倘斯の桂B(yǎng)的正常足月兒；④患者親屬對本研究知情同意并簽署知情同意書。排除標準：①患兒在確診CMPA前2周內有抗組胺使用史；②患兒伴有細菌或者病毒感染者。本研究獲安徽省兒童醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準(EYLL-2017-006)。

1.3 方法

1.3.1 對照組 對照組患兒采用游離氨基酸配方奶粉(紐迪希亞貿易上海有限公司)替代傳統奶粉進行按需喂養(yǎng)，連續(xù)喂養(yǎng)28天。

1.3.2 觀察組 觀察組患兒在對照組基礎上同時給予維生素D軟膠囊(大連水產藥業(yè)有限公司，國藥準字H20073445)400 U，每天1次輔助治療，同時戶外接受陽光照射1小時，共持續(xù)28天。

1.4 觀察指標及判定標準 兩組患兒分別按上述方法干預后第28天，通過門診隨訪，檢測并比較兩組治療總有效率，血清25羥基維生素D、白細胞介素-10(interleukin，IL-10)、調節(jié)性T細胞 (regulatory T cells, Treg)、STAT蛋白磷酸化水平?？傆行?[(顯效例數+有效例數)/總例數]×100%。顯效：皮疹面積減少80%以上，消化道和呼吸道癥狀消失或明顯改善(腹瀉次數≤2次/天，大便性狀恢復正常,咳嗽消失)；有效：皮疹面積減少50%～80%，消化道和呼吸道癥狀改善(腹瀉次數≤4次/天，大便水分明顯減少，咳嗽次數明顯減少)；無效：皮疹面積減少不足30%，消化道和呼吸道癥狀無明顯變化。采用酶聯免疫法檢測患兒血清25羥基維生素D、IL-10水平。采用流式細胞分析術檢測患兒外周血單個核細胞懸液Treg水平。采用蛋白免疫印跡法對患兒外周血單個核細胞信號傳導與轉錄激活因子3(signal transducer and activator of transcription, STAT3)、p-STAT3、STAT5、p-STAT5表達水平進行定量測定。

2 結果

2.1 總有效率比較 治療28天后，觀察組患兒治療總有效率高于對照組，差異有統計學意義(

P

<0.05)。見表2。

表2 兩組患兒治療總有效率比較

2.2 實驗室指標比較 治療前，兩組患兒外周血25羥基維生素D、IL-10、外周血Treg比例、p-STAT3/STAT3比值、p-STAT5/STAT5比值比較，差異均無統計學意義(

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>0.05)；觀察組上述指標治療前后差值均高于對照組，差異均有統計學意義(

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<0.05)。見表3。

表3 兩組治療前后實驗室指標比較

續(xù)表3

3 討論

CMPA是機體對牛奶蛋白抗原產生的，由免疫介導的不良反應，多見于嬰幼兒，可以引起多器官受累，目前最佳的治療方法為牛奶蛋白回避，同時予低過敏原性配方替代治療， 而配方奶喂養(yǎng)重癥CMPA患兒主要推薦氨基酸配方替代治療，以滿足患兒的生長需要。 近年來研究發(fā)現維生素D對多種類型的食物過敏具有一定防治作用，輔助性維生素D治療能有效抑制過敏性皮炎、過敏性哮喘患者的癥狀。Wu 等通過動物實驗研究發(fā)現輔助性維生素D療法可能對CMPA具有一定的療效。本文探討輔助性維生素D對CMPA患兒過敏癥狀及免疫反應的影響，旨為提高臨床CMPA的療效提供參考依據。

本組資料顯示，觀察組患兒治療總有效率顯著高于對照組(

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<0.05)，表明輔助性維生素D聯合游離氨基酸治療CMPA可提高臨床療效。此與余高平等研究結果相似，可能與上調維生素D受體表達，減少嗜酸性粒細胞介質的基因轉錄，減少嗜酸粒細胞介質的釋放，降低機體特異性，減輕過敏癥狀有關。本組患兒治療28天后，觀察組患兒25羥基維生素D含量、IL-10治療前后差值較對照組顯著升高(

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<0.05)，表明輔助性維生素D聯合游離氨基酸治療可提高患兒25羥基維生素D含量與IL-10水平，因維生素D在體內經肝臟羥化成25羥基維生素D，后經腎小管1ɑ-羥化酶的催化成生物活性很強的1,25羥基維生素D3，1,25羥基維生素D3具有很強的免疫調節(jié)活性，能夠對多種炎癥細胞因子網絡進行調節(jié)，并通過對輔助性T細胞亞群進行調節(jié)，降低Th1和Th17亞群比例，并提高Treg細胞亞群比例水平及上調IL-10水平。本組資料顯示，觀察組治療前后Treg亞群比例差值顯著高于對照組(

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<0.05)，表明輔助性維生素D聯合游離氨基酸治療可提高患兒Treg細胞水平。此與Oraei 等研究結果相似，可能與維生素D增加CD4T細胞中FOXP3、IL-10和轉化生長因子-β1基因的表達，維生素D參與甲基化過程，從而誘導FOXP3基因的表達及Treg細胞的分布有關。本組治療28天后，觀察組患兒磷酸化p-STAT3/STAT3比值顯著低于對照組、磷酸化p-STAT5/STAT5比值水平顯著高于對照組，但觀察組上述兩個指標治療前后差值均高于對照組(

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<0.05)，表明輔助性維生素D療法能夠增加p-STAT5/STAT5磷酸化比值水平，STAT家族中STAT5促進了Treg細胞的分化，上調Treg細胞比例以及抗炎細胞因子IL-10水平，從而誘導免疫耐受，減輕過敏癥狀。

綜上所述，輔助性維生素D聯合游離氨基酸治療CMPA患兒效果優(yōu)于單一游離氨基酸治療效果。