牟秋杰，姜 婧，王 鑫，李昱頡，田會(huì)玲，王 順，嵇 波＊＊，李志剛＊＊

（1. 北京中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院 北京 100029；2. 北京中醫(yī)藥大學(xué)護(hù)理學(xué)院 北京 100029；3. 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京中醫(yī)醫(yī)院 北京 100010；4. 北京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院 北京 100029）

阿爾茨海默?。ˋlzheimer's disease，AD），又稱老年癡呆，其臨床特征主要表現(xiàn)為起病隱匿和認(rèn)知功能障礙漸進(jìn)性加重，屬中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，是癡呆最常見的原因[1]，約占癡呆總數(shù)的60%-80%[2]。目前，全球的癡呆患者人數(shù)約5000 萬(wàn)，預(yù)計(jì)到2050 年將增至1.52 億。中國(guó)作為人口大國(guó)，癡呆患者的人數(shù)已超過950 萬(wàn)，約占世界總數(shù)的20%，預(yù)計(jì)到2030 年將超過1600 萬(wàn)[3]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2018 年全球用于癡呆的花費(fèi)就已達(dá)到了1 萬(wàn)億美元，預(yù)計(jì)到2030 年將會(huì)達(dá)到2 萬(wàn)億美元；僅2015 年，在中國(guó)用于癡呆的花費(fèi)就達(dá)到了1677.4 億美元，預(yù)計(jì)到 2030 年將增至 5074.9 億美元[4]。由此可知，AD 給世界和中國(guó)帶來了沉重的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)負(fù)擔(dān)。由于AD 的病因、病機(jī)十分復(fù)雜，目前尚無(wú)特異性的治療方案，已成為當(dāng)今世界公共衛(wèi)生領(lǐng)域所面臨的重大難題?，F(xiàn)有的治療藥物，如鹽酸多奈哌齊、利凡斯的明、加蘭他明、美金剛和甘露特鈉等，僅能改善患者的臨床癥狀，延緩疾病的發(fā)展進(jìn)程，并不能根治AD，且副作用較大。針灸作為傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的重要組成部分，多項(xiàng)研究[5,6]均表明其對(duì)AD 具有較好的療效，且安全可靠，在AD 的防治過程中發(fā)揮著重要作用。近年來，業(yè)界對(duì)針灸治療AD 進(jìn)行了系統(tǒng)、全面且較為深入的研究，取得了大量客觀、可靠的研究成果，在此基礎(chǔ)上，本文對(duì)近5年的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究成果進(jìn)行匯總、分析，以期為今后的實(shí)驗(yàn)研究提供參考，并為AD 的針灸臨床治療提供相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 文獻(xiàn)檢索

1.1 文獻(xiàn)檢索方法

查閱從 2015 年 1 月 1 日至 2019 年 12 月 31 日期間中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)（CNKI）、萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)（WANFANG）、維普全文期刊數(shù)據(jù)庫(kù)（VIP）、中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)服務(wù)系統(tǒng)（SinoMed）、Pubmed、Medline 和Web of Science 數(shù)據(jù)庫(kù)發(fā)表的文獻(xiàn)。中文檢索詞：①針刺，②電針，③灸，④艾灸，⑤針灸，⑥阿爾茨海默病，⑦老年癡呆；檢索式為：[①or②or③or④or⑤]and[⑥or⑦]。英文檢索詞：①acupuncture，②electroacupuncture，③moxibustion，④moxa-moxibustion，⑤acupuncture and moxibustion，⑥alzheimer's disease，⑦senile dementia；檢索式為：[①or②or③or④or⑤]and[⑥or⑦]。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)

①研究類型為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的文獻(xiàn)；②治療組的干預(yù)方式為單純的普通針刺、電針、艾灸或普通針刺加艾灸的文獻(xiàn)；③研究對(duì)象為單純AD 動(dòng)物模型的文獻(xiàn)；④文獻(xiàn)語(yǔ)種限定為中文和英文。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn)

①綜述、系統(tǒng)評(píng)價(jià)和Meta 分析、醫(yī)家經(jīng)驗(yàn)、個(gè)案報(bào)道、理論探討、述評(píng)、臨床研究、學(xué)位論文及會(huì)議論文等；②重復(fù)發(fā)表或重復(fù)檢出的文獻(xiàn)；③無(wú)法獲取全文或信息不全的文獻(xiàn)；④沒有采用針灸治療的文獻(xiàn)；⑤采用針灸聯(lián)合其他方法治療的文獻(xiàn)；⑥研究數(shù)據(jù)不明確或統(tǒng)計(jì)學(xué)方法不恰當(dāng)?shù)奈墨I(xiàn)。

1.4 篩選方法

由2 名文獻(xiàn)評(píng)價(jià)員閱讀題目和摘要，按納排標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行初篩，對(duì)符合標(biāo)準(zhǔn)的文獻(xiàn)進(jìn)行全文下載并閱讀。存疑文獻(xiàn)經(jīng)小組討論后決定是否納入，如仍有爭(zhēng)議則請(qǐng)專家稽波教授和李志剛教授仲裁。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)檢索結(jié)果

根據(jù)檢索策略，共檢索出中文文獻(xiàn)269篇，英文文獻(xiàn)53 篇，通過閱讀文章的題目、摘要，并結(jié)合全文閱讀，排除不符合納入標(biāo)準(zhǔn)的中文文獻(xiàn)212篇，英文文獻(xiàn)42篇，最終納入中文文獻(xiàn)57篇，英文文獻(xiàn)11篇。

2.2 文獻(xiàn)年度分布情況

2015-2019年，針灸治療AD 的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的總體趨勢(shì)呈波動(dòng)狀態(tài)，其中2016年達(dá)到高峰，2016-2018年呈下降趨勢(shì)，2019 年回升。具體年度分布情況如下：2015年17篇，2016年19篇，2017年11篇，2018年5篇，2019年16篇。

2.3 納入研究的基本概況

2.3.1 動(dòng)物的選取及模型制備

所選動(dòng)物的品系主要有APP/PS1 雙轉(zhuǎn)基因小鼠、SAMP8小鼠、SD大鼠和Wistar大鼠四種。關(guān)于模型動(dòng)物的性別，有55 篇選用雄性，6 篇選用雌性，6 篇選用雌雄各半或雌雄不拘，另有1 篇未闡明性別。文獻(xiàn)中所選用模型鼠的鼠齡差異較大，為1.5-15 月齡不等，其中APP/PS1 雙轉(zhuǎn)基因小鼠選用最多的為5 月齡和7月齡，SAMP8 小鼠選用最多的為6 月齡和7 月齡，SD大鼠選用最多的為2月齡和15月齡（其中有12篇文獻(xiàn)所選模型鼠的鼠齡不詳），Wistar 大鼠選用最多的為4-5 月齡，另有1 篇文獻(xiàn)同時(shí)選用了4 月齡、6 月齡和9月齡的模型鼠進(jìn)行了研究。樣本量的選取，最少的為15 只，最多的為 115 只，出現(xiàn)頻次較多的有 40 只、60只、48 只和50 只等，所納入文獻(xiàn)的平均樣本量約為48只。造模方法主要有雙側(cè)海馬注射Aβ（Aβ1-40、Aβ1-42 或Aβ25-35）、雙側(cè)側(cè)腦室注射鏈脲佐菌素、腹腔注射D-半乳糖、氫溴酸東莨菪堿或直接選用APP/PS1、SAMP8 模型鼠。其中直接選用APP/PS1 雙轉(zhuǎn)基因小鼠的有12篇，直接選用SAMP8小鼠的有15篇，選用雙側(cè)海馬注射Aβ1-42 的有18 篇，選用雙側(cè)海馬注射Aβ1-40 的有 8 篇，選用雙側(cè)海馬注射 Aβ25-35 的有 7 篇，選用雙側(cè)側(cè)腦室注射鏈脲佐菌素的有5 篇，剩余3 篇?jiǎng)t分別選用腹腔注射D-半乳糖加腹腔注射氫溴酸東莨菪堿、腹腔注射D-半乳糖加雙側(cè)海馬注射Aβ1-40和腹腔注射D-半乳糖加雙側(cè)側(cè)腦室注射鵝膏蕈氨酸進(jìn)行造模（表1）。

2.3.2 針灸干預(yù)方式及穴位的選取

針灸對(duì)AD 模型動(dòng)物的干預(yù)方法主要有普通針刺、電針、艾灸和普通針刺加艾灸4種。其中采用普通針刺進(jìn)行治療的文獻(xiàn)有12 篇、電針治療的有34 篇，艾灸治療的有14 篇，普通針刺加艾灸治療的有8 篇。單次治療時(shí)間最短的為20-30 s，最長(zhǎng)的為2 h，其中普通針刺的單次治療時(shí)間選取最多的為15 min 和30 min，電針選取最多的為20 min、30 min 和15 min，艾灸選取最多的為20 min和5 min，普通針刺加艾灸選取最多的為 30 min 和15 min。療程由 3 天至 90 天不等，其中普通針刺的療程選取最多的為28天，電針選取最多的為14 天和15 天，艾灸選取最多的為18 天，普通針刺加艾灸選取最多的為14 天。所納入的68 篇文獻(xiàn)中，共有58 篇選用了穴方進(jìn)行治療，10 篇選用了單穴進(jìn)行治療，共涉及穴方20 首，其中使用頻次較多的有“百會(huì)+腎俞”、“百會(huì) + 印堂 + 人中”、“膻中 + 中脘 + 氣海 +血海+足三里”和“百會(huì)+涌泉”等；共涉及穴位27個(gè)，其中使用頻次較多的有百會(huì)、腎俞、足三里、印堂和大椎等（表2）。

此外，有3 篇文獻(xiàn)同時(shí)使用了脈沖電針和音樂電針治療，并比較了2 種電針之間的療效差異；有2 篇文獻(xiàn)比較了不同穴位之間的療效差異；有2 篇文獻(xiàn)比較了不同艾灸因素（艾煙、艾灸和無(wú)煙艾灸）之間的療效差異。關(guān)于電針頻率，在采用電針治療的34 篇文獻(xiàn)中，有 14 篇選用了 2 Hz，3 篇選用了 1/50 Hz，2 篇選用了 20 Hz，各有 1 篇選用了 30 Hz、1/20 Hz、2/15 Hz、2/50 Hz、4/30 Hz、20/30 Hz、20/100 Hz 和80/100 Hz；共有7篇同時(shí)選用了2種（2 Hz和50 Hz）或3種（2 Hz、30 Hz和50 Hz）電針頻率，并比較了不同電針頻率之間的療效差異。

表1 動(dòng)物的選取及模型制備情況

表2 針灸干預(yù)方式及穴位、穴方的選取情況

2.3.3 對(duì)照組的設(shè)置及療效對(duì)比

所納入的68 篇文獻(xiàn)中，僅有10 篇設(shè)置了陽(yáng)性藥物對(duì)照組，其中鹽酸多奈哌齊7 篇、雷帕霉素2 篇、美金剛1 篇；11 篇設(shè)置了假針刺或非穴對(duì)照組，分別為2篇和9 篇。療效對(duì)比結(jié)果顯示，無(wú)論是普通針刺、電針、艾灸還是普通針刺加艾灸，其療效都優(yōu)于或等于陽(yáng)性藥物；同時(shí)，普通針刺和電針的療效明顯優(yōu)于假針刺或非穴（表3）。

2.3.4 檢測(cè)方法及結(jié)局指標(biāo)的選取

結(jié)局指標(biāo)主要分為行為學(xué)指標(biāo)和生化指標(biāo)，其中38 篇同時(shí)選取了行為學(xué)指標(biāo)和生化指標(biāo)，6 篇只選取了行為學(xué)指標(biāo)，22篇只選取了生化指標(biāo)，1篇僅采用了HE 染色進(jìn)行觀察。行為學(xué)檢測(cè)方法主要有Morris 水迷宮、Y 迷宮和穿梭箱實(shí)驗(yàn)3 種，在進(jìn)行行為學(xué)檢測(cè)的44 篇文獻(xiàn)中，使用 Morris 水迷宮的有 42 篇，Y 迷宮和穿梭箱實(shí)驗(yàn)的各1 篇；所涉及的行為學(xué)指標(biāo)共有14個(gè)，其中使用頻次較多的有逃避潛伏期、穿越平臺(tái)次數(shù)、目標(biāo)象限游泳時(shí)間、目標(biāo)象限游泳時(shí)間/總時(shí)間和首次穿越平臺(tái)時(shí)間等。生化指標(biāo)的檢測(cè)方法共涉及16 種，使用頻次較多的有Western blot、免疫組化、ELISA、免疫熒光和RT-PCR 等；所檢測(cè)的生化指標(biāo)共有118 個(gè)，其中使用頻次較多的有Aβ1-42、Aβ、IL-1β、18F-FDG、TNF-α和APP等。所檢測(cè)部位共涉及13個(gè)，其中主要的檢測(cè)部位為海馬、皮質(zhì)和血清等（表4）。

3 討論

在長(zhǎng)期的醫(yī)療實(shí)踐中，針灸對(duì)AD 的有效性和安全性已被大量研究所證實(shí)。既往對(duì)針灸治療AD 的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究主要從調(diào)控腦內(nèi)蛋白質(zhì)的異常表達(dá)[7,8]、調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞的生理病理狀態(tài)[5,6,9]、發(fā)揮神經(jīng)元保護(hù)效應(yīng)[10]、調(diào)控氧化應(yīng)激反應(yīng)[11]和改善突觸可塑性[12-14]等方面進(jìn)行探究。本文通過文獻(xiàn)整理發(fā)現(xiàn)，近5 年針灸治療AD的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究主要從調(diào)控線粒體自噬[15]、調(diào)控表觀遺傳修飾[16]和調(diào)控能量代謝[17,18]等方面進(jìn)行探究。研究人員采用了多種針灸干預(yù)方法，對(duì)不同品系和鼠齡的AD 模型進(jìn)行了不同時(shí)程的治療，并采用多種檢測(cè)方法，對(duì)行為學(xué)和多個(gè)腦區(qū)的不同生化指標(biāo)進(jìn)行了檢測(cè)分析，基于不同作用機(jī)制對(duì)其進(jìn)行了系統(tǒng)、全面且較為深入的研究，已取得了長(zhǎng)足的進(jìn)展，但其中還有一些內(nèi)容值得關(guān)注，現(xiàn)論述如下。

表3 對(duì)照組的設(shè)置及療效對(duì)比情況

表4 檢測(cè)方法及結(jié)局指標(biāo)的選取情況

3.1 側(cè)重比較不同穴位和不同穴方之間的療效差異

現(xiàn)有的臨床研究和實(shí)驗(yàn)研究均證實(shí)針灸特定的穴位或穴方對(duì)AD 均有較好療效，但對(duì)于不同穴位和不同穴方之間的療效差異目前尚無(wú)深刻認(rèn)識(shí)。本研究所納入的文獻(xiàn)中，涉及的穴方多達(dá)20 首，穴位多達(dá)27 個(gè)，但對(duì)不同穴方之間療效差異進(jìn)行對(duì)比研究的文獻(xiàn)為零篇，而對(duì)不同穴位之間療效差異進(jìn)行對(duì)比研究的也只有2篇，僅占總文獻(xiàn)量的2.94%。其中1篇研究表明，艾灸神闕、足三里或“神闕＋足三里”均能提高AD 模型大鼠血清及脂肪組織中脂聯(lián)素及脂聯(lián)素受體的水平，從而改善其學(xué)習(xí)記憶能力，且神闕、足三里和“神闕+足三里”三者的療效相當(dāng)[19]；另一篇研究表明，電針三陰交和關(guān)元均能改善AD 模型鼠的學(xué)習(xí)記憶能力和下丘腦-垂體-卵巢軸的性腺激素水平，且三陰交的療效明顯優(yōu)于關(guān)元[20]。由此可知，確定不同穴位和不同穴方之間的療效差異，篩選療效較好的穴位或穴方，能夠?yàn)榕R床選穴、組方提供充足的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，進(jìn)而提高臨床療效。

3.2 關(guān)注干預(yù)時(shí)長(zhǎng)和療程對(duì)針灸療效的影響

眾所周知，干預(yù)時(shí)長(zhǎng)和療程是影響針灸療效的兩個(gè)關(guān)鍵因素。本研究納入的文獻(xiàn)中，所涉及的干預(yù)時(shí)長(zhǎng)多達(dá) 14 種，最短的為 20-30 s[21]，最長(zhǎng)的為 2 h[22]，療程多達(dá) 17 種，最短的為 3 天[23]，最長(zhǎng)的為 90 天[21]，研究證實(shí)這些不同的干預(yù)時(shí)長(zhǎng)和療程均會(huì)對(duì)AD 的治療產(chǎn)生積極作用，但是對(duì)不同干預(yù)時(shí)長(zhǎng)和不同療程之間進(jìn)行療效對(duì)比研究的文獻(xiàn)為0 篇。因此，在今后的實(shí)驗(yàn)研究中應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注這兩個(gè)關(guān)鍵因素對(duì)針灸療效的影響，篩選出療效更好的干預(yù)時(shí)長(zhǎng)和療程，以期更好的服務(wù)臨床。

3.3 重視不同針灸干預(yù)方法和不同刺激參數(shù)之間的療效對(duì)比

本研究納入文獻(xiàn)所涉及的針灸干預(yù)方法主要有普通針刺、電針、艾灸和普通針刺加艾灸4 種，各種干預(yù)方法對(duì)AD 均有較好的療效，但缺乏對(duì)它們之間進(jìn)行療效對(duì)比的研究，因此在AD 的臨床治療中，對(duì)具體針灸方法的選取也缺乏科學(xué)合理的指導(dǎo)。電針主要包括脈沖電針和音樂電針，對(duì)兩種電針治療AD 的療效進(jìn)行對(duì)比研究的文獻(xiàn)只有3 篇，僅占文獻(xiàn)總量的4.41%，這3篇研究均表音樂電針的療效優(yōu)于或等于脈沖電針[9,18,24]；同樣，對(duì)于不同艾灸因素治療AD 的療效進(jìn)行對(duì)比研究的文獻(xiàn)也相對(duì)較少，只有2篇，僅占文獻(xiàn)總量的2.94%，這2 篇研究表明艾煙、艾灸和無(wú)煙艾灸的療效相當(dāng)[25,26]。此外，不同刺激參數(shù)也影響針灸的療效，如不同頻率的電針在AD 的治療中也存在療效差異，有研究表明，電針治療作用的強(qiáng)弱與電針頻率密切相關(guān)，高頻（50 Hz）電針的療效要優(yōu)于中頻（30 Hz）和低頻（2 Hz）[27-33]。由此可知，把握不同針灸干預(yù)方法和不同刺激參數(shù)之間的療效差異，是提高針灸治療AD臨床療效的重要保障。

4 結(jié)語(yǔ)

本文對(duì)近5 年針灸治療AD 的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究文獻(xiàn)從動(dòng)物的選取及模型制備、針灸干預(yù)方式及穴位的選取、對(duì)照組的設(shè)置及療效對(duì)比、檢測(cè)方法及結(jié)局指標(biāo)的選取等諸多方面進(jìn)行了較為全面、細(xì)致的整理分析，發(fā)現(xiàn)針灸對(duì)AD 模型動(dòng)物的行為學(xué)和生化指標(biāo)均有較好的改善作用，肯定了其有效性和安全性。針灸治療AD 的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，其最終目的是指導(dǎo)臨床，提高臨床療效，因此，在今后應(yīng)注重以下幾方面的研究：①加強(qiáng)對(duì)不同穴位和不同穴方之間的療效對(duì)比研究，明確治療AD 的特異性穴位和優(yōu)勢(shì)穴方；②重點(diǎn)關(guān)注不同干預(yù)時(shí)長(zhǎng)和不同療程對(duì)針灸療效的影響，篩選出適宜AD 的干預(yù)時(shí)長(zhǎng)和療程；③動(dòng)態(tài)把握不同針灸干預(yù)方法（普通針刺、電針和艾灸等）和不同刺激參數(shù)（電針頻率、捻轉(zhuǎn)角度和捻轉(zhuǎn)頻率等）之間的療效差異，有效提高針灸治療AD的臨床療效。