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        百合多糧白酒半固態(tài)法釀造工藝及風(fēng)味研究

        2021-04-08 11:29:34游湘淘麻成金
        食品與機(jī)械 2021年3期

        游湘淘 余 佶 張 敏 張 斌 麻成金,

        (1. 吉首大學(xué)林產(chǎn)化工工程湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖南 張家界 427000;2. 食藥兩用資源研究與高值化利用湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 湖南 吉首 416000;3. 吉首大學(xué)食品科學(xué)研究所,湖南 吉首 416000)

        百合(Liliumbrowniivar.viridulumBaker)為百合科植物卷丹的干燥肉質(zhì)鱗葉,是中國(guó)衛(wèi)健委首批通過的藥食兩用植物。百合富含淀粉、蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分[1],還含有生物堿、黃酮類、多酚、皂苷等活性成分[2],具有較高的保健功能價(jià)值;其淀粉含量在70%以上[3],且保留百合大部分原本的生物活性成分,具有抗氧化、降血糖、消炎等功效[4],可以添加至其他產(chǎn)品中提高產(chǎn)品附加值。目前,百合發(fā)酵類產(chǎn)品的研究已有百合發(fā)酵醋[5]、百合發(fā)酵酒[6]、百合酵素[7]、百合發(fā)酵乳[8]等。

        中國(guó)白酒歷史悠遠(yuǎn),生產(chǎn)技術(shù)與產(chǎn)品風(fēng)格的獨(dú)特性,在國(guó)內(nèi)外都享盛譽(yù)[9]。中國(guó)白酒常用的釀造方法主要有固態(tài)法、半固態(tài)法、液態(tài)法等,其中半固態(tài)法釀造技術(shù)也即固液結(jié)合法釀酒技術(shù),由于生產(chǎn)周期較短、產(chǎn)量大,加工成本低,受到白酒生產(chǎn)企業(yè)的青睞。目前,高粱、玉米、大米、小麥等為白酒常用釀造原料,以單一糧食或多糧混合的原料形式進(jìn)行發(fā)酵是主要傳統(tǒng)釀酒方法[10],近年來(lái),多糧混合釀造白酒相關(guān)研究逐漸增多[11-15],但未見以百合為原料的多糧白酒研究報(bào)道。

        研究擬以百合、高粱為主要原料,輔以大米和玉米,小曲為糖化發(fā)酵劑,采用半固態(tài)法釀造百合多糧白酒,應(yīng)用正交試驗(yàn)和響應(yīng)面法優(yōu)化釀造工藝參數(shù),并分析其風(fēng)味物質(zhì)成分,旨在為百合相關(guān)深加工產(chǎn)品的研發(fā)應(yīng)用提供實(shí)踐參考。

        1 材料與方法

        1.1 材料與儀器

        1.1.1 材料與試劑

        百合干片:湖南省龍山縣百合基地;

        紅高粱、大米、玉米:吉首市農(nóng)貿(mào)市場(chǎng);

        小曲、白酒曲:湖北安琪酵母股份有限公司;

        硫酸、鹽酸、冰乙酸、氫氧化鈉、無(wú)水乙醇、硫酸銅、乙酸鋅、酒石酸鉀鈉、亞鐵氰化鉀、亞甲藍(lán)、酚酞等均為國(guó)產(chǎn)分析純。

        1.1.2 主要儀器設(shè)備

        恒溫水浴鍋:HH-S2X型,金壇市成輝儀器廠;

        組合式震蕩培養(yǎng)箱:QH2-123A型,常州市國(guó)旺儀器有限公司;

        蒸煮鍋:CFXB型,廣東紅三角電器實(shí)業(yè)有限公司;

        電子天平:FA2004型,上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司;

        電熱鼓風(fēng)干燥箱:101-0/1/2型,北京中興偉業(yè)儀器有限公司;

        氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用儀:7890A-5975C型,美國(guó)Agilent公司。

        1.2 方法

        1.2.1 工藝流程

        原料(百合、高粱、大米、玉米)→原料預(yù)處理→潤(rùn)料→預(yù)蒸煮→混合蒸煮→攤涼→培菌糖化→補(bǔ)水→酒精發(fā)酵→蒸餾→陳釀→勾調(diào)→成品

        1.2.2 操作要點(diǎn)

        (1) 原料預(yù)處理:在相關(guān)文獻(xiàn)[16]的基礎(chǔ)上,進(jìn)行前期預(yù)試驗(yàn),選擇原料配方(質(zhì)量分?jǐn)?shù);以干重計(jì))為百合25%、高粱35%、大米30%和玉米10%。百合干片破碎至0.2~0.5 cm大小,玉米破碎至0.1~0.2 cm大小,高粱、大米為整粒。

        (2) 潤(rùn)料與蒸煮:按原料配方稱取原料,60 ℃熱水浸泡高粱12 h;百合、大米、玉米常溫浸泡2 h,至原料充分吸水;清洗1次,瀝干、蒸煮;高粱上大汽后蒸煮2 h,潑灑涼水,補(bǔ)充水分,繼續(xù)蒸煮1 h,然后加入百合、大米、玉米浸泡料混合蒸煮40~50 min,至原料充分熟透,內(nèi)無(wú)生心。

        (3) 固態(tài)糖化:原料蒸煮完成后迅速冷卻至30 ℃,加入小曲進(jìn)行固態(tài)糖化。

        (4) 酒精發(fā)酵:在糖化完成后,按設(shè)定料水比進(jìn)行補(bǔ)水,加入白酒曲進(jìn)行酒精發(fā)酵。

        (5) 蒸餾接酒與陳釀:采取掐頭去尾的方法進(jìn)行酒醅蒸餾接酒,蒸餾前期約50 mL所接酒為酒頭,當(dāng)所接酒酒度低于40%Vol時(shí)停止接酒(剩余餾出酒為酒尾),酒尾可在下次蒸餾接酒時(shí)倒入待蒸餾發(fā)酵醅中;自然陳釀90 d 以上,勾調(diào)后灌裝即得成品。

        1.2.3 糖化階段單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)

        (1) 初始含水率:固定糖化溫度28 ℃,糖化時(shí)間16 h,糖化曲用量0.5%,以不同初始含水率(45%,50%,55%,60%,65%)為變量,以總酸含量及感官評(píng)分為評(píng)價(jià)指標(biāo)。

        (2) 糖化溫度:固定初始含水率55%,糖化時(shí)間16 h,糖化曲用量0.5%,以不同糖化溫度(20,24,28,32,36 ℃)為變量,以總酸含量及感官評(píng)分為評(píng)價(jià)指標(biāo)。

        (3) 糖化時(shí)間:固定初始含水率55%,糖化溫度28 ℃,糖化曲用量0.5%,以不同糖化時(shí)間(12,14,16,18,20 h)為變量,以總酸含量及感官評(píng)分為評(píng)價(jià)指標(biāo)。

        (4) 糖化曲用量:固定初始含水率55%,糖化溫度28 ℃,糖化時(shí)間16 h,以不同糖化曲用量(0.2%,0.4%,0.6%,0.8%,1.0%)為變量,以總酸含量及感官評(píng)分為評(píng)價(jià)指標(biāo)。

        1.2.4 糖化階段正交試驗(yàn)設(shè)計(jì) 以單因素試驗(yàn)結(jié)果為基礎(chǔ),以初始含水量、糖化溫度、糖化時(shí)間、糖化曲用量為變量因素,感官評(píng)分及總酸含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行L9(34)正交試驗(yàn),優(yōu)化糖化工藝參數(shù)。

        1.2.5 酒精發(fā)酵階段單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)

        (1) 發(fā)酵溫度:固定料液比(m糖化料∶V水)1∶2 (g/mL),發(fā)酵時(shí)間8 d,發(fā)酵曲用量1.0%,以不同發(fā)酵溫度(24,26,28,30,32 ℃)為變量,以總酯含量及酒醅酒精度為評(píng)價(jià)指標(biāo)。

        (2) 發(fā)酵時(shí)間:固定料液比(m糖化料∶V水)1∶2 (g/mL),發(fā)酵溫度28 ℃,發(fā)酵曲用量1.0%,以不同發(fā)酵時(shí)間(6,7,8,9,10 d)為變量,以總酯含量及酒醅酒精度為評(píng)價(jià)指標(biāo)。

        (3) 發(fā)酵曲用量:固定料液比(m糖化料∶V水)1∶2 (g/mL),發(fā)酵溫度28 ℃,發(fā)酵時(shí)間8 d,以發(fā)酵曲用量(0.4%,0.6%,0.8%,1.0%,1.2%)為變量,以總酯含量及酒醅酒精度為評(píng)價(jià)指標(biāo)。

        (4) 料液比:固定發(fā)酵溫度28 ℃,發(fā)酵時(shí)間8 d,發(fā)酵曲用量1.0%,以料液比[m糖化料∶V水分別為1.0∶1.0,1.0∶1.5,1.0∶2.0,1.0∶2.5,1.0∶3.0,1.0∶3.5 (g/mL)]為變量,以總酯含量及酒醅酒精度為評(píng)價(jià)指標(biāo)。

        1.2.6 發(fā)酵階段響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì) 在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,采用固定的料液比,選定發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間、發(fā)酵曲用量作為考察因子,以酒醅所含酒精度為試驗(yàn)結(jié)果評(píng)判的響應(yīng)值,進(jìn)行Box-Behnken響應(yīng)面設(shè)計(jì)試驗(yàn),得到酒精發(fā)酵階段優(yōu)化的工藝條件參數(shù)。

        1.2.7 風(fēng)味物質(zhì)GC-MS分析

        (1) 樣品處理:經(jīng)蒸餾后的基礎(chǔ)酒,調(diào)整酒度為60%Vol,直接進(jìn)樣,進(jìn)樣量為1 μL。

        (2) GC條件[17-18]:AgilentHP-5MS毛細(xì)管色譜柱,升溫程序?yàn)槌跏紲囟?5 ℃,以5 ℃/min升至80 ℃,再以8 ℃/min升至230 ℃,維持時(shí)間5 min。進(jìn)樣口溫度230 ℃,載氣為氦氣,分流比15∶1。

        (3) MS條件[17-18]:電離方式EI,電子能量70 eV,離子源溫度230 ℃,四級(jí)桿溫度140 ℃,質(zhì)量掃描范圍為m/z35~500,采集方式:全掃描模式。定性和定量分析:使用NIST2011數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)結(jié)果進(jìn)行譜圖分析,對(duì)檢測(cè)出的風(fēng)味物質(zhì)進(jìn)行定性分析,各檢出組分的相對(duì)含量采用峰面積歸一化法進(jìn)行計(jì)算。

        1.2.8 指標(biāo)測(cè)定方法

        (1) 酒精度:按GB/T 5009.225—2016第二法執(zhí)行。

        (2) 總酸(以乙酸計(jì))、總酯(以乙酸乙酯計(jì)):按GB/T 10345—2007執(zhí)行。

        (3) 還原糖測(cè)定:按GB 5009.7—2016執(zhí)行。

        (4) 出酒率計(jì)算[19]:

        (1)

        式中:

        Y——原料出酒率,%;

        s——原酒精度數(shù),%Vol;

        V——原酒精體積,mL;

        M——原糧質(zhì)量,g;

        50——以酒精度50%Vol計(jì)。

        1.2.9 糖化料感官品評(píng)標(biāo)準(zhǔn) 百合多糧白酒采用先糖化后發(fā)酵方式進(jìn)行釀造,參照GB/T 33404—2016及GB/T 33405—2016建立糖化料感官品評(píng)標(biāo)準(zhǔn)(表1)。參加評(píng)定人員為10名(5男、5女)經(jīng)過白酒品評(píng)訓(xùn)練的食品科學(xué)與工程專業(yè)大四學(xué)生,均有參加中國(guó)大學(xué)生品酒大賽的經(jīng)驗(yàn)。采取打分制原則進(jìn)行感官品評(píng),滿分為100分。

        1.2.10 白酒感官定量描述分析 參照GB/T 33404—2016白酒感官定量描述分析方法,采用白酒風(fēng)味輪定性產(chǎn)品特征,采用數(shù)字標(biāo)度定量特征強(qiáng)度或滯留度。通過九點(diǎn)標(biāo)度對(duì)白酒進(jìn)行香氣及口味口感分析,并建立香氣特征柱形圖和口味口感特征剖面圖。

        表1 百合多糧白酒糖化料感官品評(píng)標(biāo)準(zhǔn)

        1.2.11 數(shù)據(jù)處理 所有試驗(yàn)均重測(cè)3次,數(shù)據(jù)用平均值表示,運(yùn)用Excel 2007、Origin 9.0 以及Design-Expert 8.0.6軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行繪圖以及統(tǒng)計(jì)處理。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 糖化工藝優(yōu)化

        在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,選擇初始含水率55%,糖化溫度28 ℃,糖化時(shí)間18 h,糖化曲用量0.6%進(jìn)行糖化階段正交試驗(yàn),各因素水平取值見表2,正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見表3。

        由表3可知,4個(gè)因素對(duì)感官得分影響效果依次為a>b>c>d,c項(xiàng)的影響最小,優(yōu)化組合為a2b2c2d2;4個(gè)因素對(duì)總酸含量影響效果依次為a>b>c>d,d項(xiàng)的影響最小,優(yōu)化組合為a2b2c1d1。感官評(píng)分更能全面地衡量糖化效果,因此,綜合考慮選擇a2b2c1d2,即初始含水量55%,糖化溫度28 ℃,糖化時(shí)間16 h,糖化曲用量0.6%。對(duì)最優(yōu)工藝條件進(jìn)行3組驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),感官得分平均為84.72分,總酸含量0.32 g/L,還原糖含量為4.87 g/100 g。

        2.2 發(fā)酵工藝優(yōu)化

        2.2.1 單因素試驗(yàn) 發(fā)酵階段發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間、發(fā)酵曲用量、料液比等因素對(duì)酒精度及總酯影響的單因素試驗(yàn)結(jié)果見圖1。

        由圖1可知,在釀造用水添加量與原料比值(m糖化料∶V水)為1∶2 (g/mL)時(shí),酒精度與總酯均為最高,繼續(xù)增加釀造用水酒精度出現(xiàn)下降;發(fā)酵溫度為28 ℃時(shí),酒精度達(dá)到最高,發(fā)酵溫度過低時(shí),菌種生產(chǎn)緩慢,發(fā)酵不完全,不利于產(chǎn)酒,酒精度較低;當(dāng)發(fā)酵溫度過高時(shí),菌種生長(zhǎng)旺盛,會(huì)造成發(fā)酵速度過快,并產(chǎn)生大量氣泡,因此發(fā)酵結(jié)束早,不利于產(chǎn)酯增香,因此選擇發(fā)酵溫度為28 ℃進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn);發(fā)酵時(shí)間的控制對(duì)酒的釀造有很大影響,隨發(fā)酵的進(jìn)行,前期產(chǎn)酒速度較快,發(fā)酵后期酒精濃度過高,對(duì)菌種的生長(zhǎng)存在一定的抑制作用,因此呈先增加后平緩的趨勢(shì)。發(fā)酵曲用量過低會(huì)導(dǎo)致發(fā)酵不完全,酒精濃度較低,用量過高時(shí),則會(huì)消耗過多底物,同樣不利于產(chǎn)酒,選擇發(fā)酵曲用量1.2%進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

        表2 正交設(shè)計(jì)因素水平表

        表3 正交試驗(yàn)結(jié)果及直觀分析表

        圖1 發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間、發(fā)酵曲用量和料液比對(duì)百合多糧白酒酒精度及總酯的影響Figure 1 Effects of fermentation temperature, fermentation time, fermentation Jiuqu dosage and different ratio of material to water on alcohol content and total ester of lily multi-grain liquor

        2.2.2 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果 在單因素試驗(yàn)結(jié)果基礎(chǔ)上,固定料液比(m糖化料∶V水)為1∶2 (g/mL),以發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間、發(fā)酵曲用量為變量因素,酒醅所含酒精度為響應(yīng)值,進(jìn)行Box-Behnken響應(yīng)面試驗(yàn)。因素及水平表見表4,試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見表5。

        2.2.3 模型建立及顯著性檢驗(yàn) Box-Behnken響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果方差分析見表6。采用Design Expert軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行多元回歸擬合,得回歸方程:

        Y=14.39+0.19A+0.064B+0.32C+0.37AB+0.35AC+0.22BC-1.31A2-1.58B2-0.41C2。

        表4 響應(yīng)面試驗(yàn)因素及編碼水平設(shè)計(jì)表

        表5 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

        (2)

        2.2.4 響應(yīng)面分析及最優(yōu)條件的確定 3個(gè)因素交互項(xiàng)AB、AC、BC交互效應(yīng)的響應(yīng)面圖及等高線圖見圖2。3個(gè)因素之間均存在一定的交互作用,且影響顯著。圖3(a)和圖3(b)顯示發(fā)酵曲用量為0水平時(shí),隨著發(fā)酵溫度從26 ℃升至30 ℃,發(fā)酵時(shí)間從8 d延長(zhǎng)至10 d,酒精含量先增加后下降。圖3(c)及圖3(d)顯示,隨發(fā)酵溫度和發(fā)酵用曲量的升高,在發(fā)酵曲用量和發(fā)酵溫度的交互作用中,發(fā)酵溫度對(duì)產(chǎn)酒的影響更為明顯,可能原因是適宜的溫度有力于菌種的生長(zhǎng)代謝。圖3(e)和圖3(f)響應(yīng)面圖存在一定的曲面,表明發(fā)酵時(shí)間與發(fā)酵用曲量存在交互作用。

        表6 回歸方程方差分析表?

        圖2 酒精發(fā)酵階段三因素交互作用等高線圖及響應(yīng)面圖Figure 2 Contour map and response surface map of three factors interaction in alcohol fermentation stage

        采用Design-Expert 8.0.6 軟件優(yōu)化,得到百合多糧白酒發(fā)酵的優(yōu)化工藝條件參數(shù)為:發(fā)酵溫度28.29 ℃,發(fā)酵時(shí)間9.07 d、發(fā)酵曲用量1.39%。從實(shí)際操作出發(fā),調(diào)整工藝參數(shù)為發(fā)酵溫度28 ℃,發(fā)酵時(shí)間9 d,發(fā)酵曲用量1.4%。以優(yōu)化條件開展驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),測(cè)得酒醅所含酒精度的平均值為14.15%Vol,與模型的預(yù)測(cè)值14.48%Vol相比較誤差為2.28%,表明該模型可較好地預(yù)測(cè)發(fā)酵階段工藝條件參數(shù)與響應(yīng)值酒精度之間的關(guān)系。

        2.3 百合多糧白酒風(fēng)味物質(zhì)分析

        2.3.1 百合多糧白酒總酸和總酯含量 按上述工藝條件釀造的百合多糧白酒(新酒)。經(jīng)蒸餾后,出酒率為(43.57±0.58)%(以酒精度50%Vol計(jì));經(jīng)測(cè)定,總酸含量(0.61±0.28) g/L,總酯含量(2.83±0.64) g/L。

        2.3.2 百合多糧白酒基礎(chǔ)酒微量成分GC-MS分析 從GC-MS直接進(jìn)樣及NIST數(shù)據(jù)庫(kù)鑒定結(jié)果(表7)和物質(zhì)保留指數(shù)分析可知,鑒定出百合多糧白酒中32種主要風(fēng)味物質(zhì),主要包括醇類、醛類、酸類、酯類4大類風(fēng)味物質(zhì)。由表7可知,在微量成分含量上,酯類>醇類>酸類>醛類,其中酯類相對(duì)含量為46.33%,乙酸乙酯為主體成分,乙酸乙酯主要呈水果香,帶給酒體清香感,使百合多糧白酒具有清香型白酒的基本風(fēng)格特征。醇類化合物相對(duì)含量為37.16%,主體成分為異丁醇和異戊醇;酸類物質(zhì)相對(duì)含量為5.69%,主體成分為乙酸;醛類物質(zhì)相對(duì)含量為5.68%,主體成分為乙縮醛。酯類物質(zhì)是酒體中主要的呈香物質(zhì),較高的酯含量賦予酒體濃郁的酒香,乙酸乙酯主要呈水果香,帶給酒體清香感,有助于提升酒的品質(zhì)。高級(jí)醇也是白酒重要的呈香、呈味物質(zhì),適當(dāng)?shù)暮磕軌蚪o予酒體醇甜的口感,而含量過高則容易帶給酒體雜醇油氣味,應(yīng)在后續(xù)試驗(yàn)中,盡量降低異戊醇含量。

        2.3.3 百合多糧白酒感官定量描述分析結(jié)果 根據(jù)GB/T 33404—2016《白酒感官品評(píng)導(dǎo)則》對(duì)百合多糧白酒進(jìn)行香氣、口味口感描述分析,結(jié)果見圖3、圖4。由圖3、圖4可知,百合多糧白酒以發(fā)酵香和糧香為主,陳香則需陳釀后才會(huì)產(chǎn)生??诟型怀鎏鹞?,一定的酸感有利于增強(qiáng)酒體的協(xié)調(diào)感,苦味不明顯。口感以純凈度得分最高,持久度有所欠缺,柔和度及協(xié)調(diào)度略低,新酒經(jīng)陳釀后將有助于提升柔和度及協(xié)調(diào)度。

        綜合感官評(píng)語(yǔ)為:無(wú)色,無(wú)沉淀物和懸浮物,清亮透明;香氣自然,較純正清雅;酒體較柔和、凈爽;具有百合多糧的特征風(fēng)格。

        3 結(jié)論

        試驗(yàn)以半固態(tài)法釀造百合多糧白酒為目標(biāo),采用單因素試驗(yàn)、正交試驗(yàn)、響應(yīng)面試驗(yàn)分別優(yōu)化糖化階段和發(fā)酵階段工藝條件參數(shù),確定糖化優(yōu)化條件為物料初始含水量55%、糖化曲用量0.6%、糖化溫度28 ℃、糖化時(shí)間16 h;發(fā)酵條件為料液比(m糖化料∶V水)1∶2 (g/mL)、發(fā)酵溫度28 ℃、發(fā)酵時(shí)間9 d、發(fā)酵曲用量1.4%。經(jīng)蒸餾后得到一款香氣以發(fā)酵香和糧香為主,口感綿甜,爽凈的基礎(chǔ)酒。試驗(yàn)探索利用百合作為主要原料之一釀造多糧白酒,可為百合的精深加工提供新產(chǎn)品,進(jìn)而拓寬百合綜合利用的途徑。試驗(yàn)僅以釀造工藝研究為主,未對(duì)釀造機(jī)理進(jìn)行深入探討,可對(duì)此進(jìn)行后續(xù)研究。此外,白酒釀造較為復(fù)雜,新釀造白酒需陳釀勾調(diào)后才能使酒體更加豐滿協(xié)調(diào),后續(xù)需陳釀勾兌后才可得成品。

        表7 百合多糧白酒主要風(fēng)味物質(zhì)鑒定結(jié)果

        圖3 百合多糧白酒香氣特征柱形圖Figure 3 Bar chart of aroma characteristics of lily multi-grain liquor

        圖4 百合多糧白酒口味口感特征剖面圖Figure 4 Profile of taste characteristics of lily multi-grain liquor

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