韓麗歌，劉景春

(許昌市人民醫(yī)院 呼吸與危重醫(yī)學(xué)科，河南 許昌 461000)

肺癌是發(fā)病率、病死率均居首位的惡性腫瘤，其中約85%為非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)，發(fā)病早期無特殊癥狀，臨床確診時多屬于中晚期，喪失局部放療、手術(shù)切除治療的時機(jī)[1]。目前化療是治療NSCLC的主要手段，但患者對化療耐受性較差，毒副反應(yīng)大，效果不佳。隨著腫瘤免疫學(xué)、分子生物技術(shù)的發(fā)展，細(xì)胞免疫逐年應(yīng)用于NSCLC治療中，細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷(cytokine-induced killer，CIK)細(xì)胞免疫是將單個核細(xì)胞在體外利用多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)培養(yǎng)，獲取異質(zhì)性免疫細(xì)胞，增殖活性高，殺瘤活性強(qiáng)，殺瘤譜廣。本研究選取許昌市人民醫(yī)院收治的83例NSCLC患者作為研究對象，將CIK細(xì)胞免疫與TP(多西紫杉醇聯(lián)合順鉑)方案化療聯(lián)合使用，探討其治療NSCLC的效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2018年5月至2019年6月許昌市人民醫(yī)院收治的83例NSCLC患者作為研究對象，根據(jù)治療方法分為對照組(n=41)與研究組(n=42)。對照組接受TP方案(多西紫杉醇聯(lián)合順鉑)治療，研究組接受CIK細(xì)胞免疫聯(lián)合TP方案治療。研究組男27例，女15例；年齡43～76歲，平均(58.01±7.35)歲；鱗癌17例，腺癌19例，其他6例。對照組男28例，女13例；年齡43～78歲，平均(60.25±8.37)歲；鱗癌15例，腺癌18例，其他8例。兩組性別、年齡、肺癌分類比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)許昌市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)。

1.2 選取標(biāo)準(zhǔn)(1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理學(xué)、細(xì)胞學(xué)檢查確診為NSCLC；②預(yù)計生存期>3個月；③患者簽署知情同意書。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①其他惡性腫瘤；②顱內(nèi)轉(zhuǎn)移；③認(rèn)知障礙；④嚴(yán)重心、腎功能不全。

1.3 治療方法

1.3.1對照組 接受TP方案治療，第1天，多西紫杉醇(廣東星昊藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H20178011)75 mg·m-2；第1～3天，順鉑(齊魯制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H37021357)25 mg·m-2，4周為1個化療周期，化療前1 d靜脈推注5 mg地塞米松(石藥集團(tuán)歐意藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H20052359)，靜脈滴注0.6 g西咪替丁(山西諾成制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H20030076)，預(yù)防多西紫杉醇可能導(dǎo)致的液體潴留綜合征，12 h使用1次，連用3 d，同時行常規(guī)止吐等治療。治療2個化療周期。

1.3.2研究組 接受CIK細(xì)胞免疫聯(lián)合TP方案治療，TP方案同對照組，經(jīng)實驗室離心洗滌、培養(yǎng)擴(kuò)增等過程后收集CIK細(xì)胞，生理鹽水洗滌3次，加入5%人血白蛋白與1×106U·L-1的白介素-2，使用生理鹽水配成100 mL，經(jīng)無菌檢測后靜脈回輸。CIK細(xì)胞免疫：患者在每次TP方案化療周期結(jié)束后的第24小時輸注CIK細(xì)胞，每日1次，每次回輸細(xì)胞數(shù)為4×109～5×109，輸注時間2 h，然后第2個化療周期結(jié)束，經(jīng)過1周后，血常規(guī)恢復(fù)正常，使用血細(xì)胞單采儀收集外周血單個核細(xì)胞，進(jìn)行體外培養(yǎng)擴(kuò)增，1周后回輸給患者，連續(xù)5 d。此為CIK細(xì)胞免疫治療的1個周期。CIK細(xì)胞回輸前30 min服用非甾體類藥物，肌內(nèi)注射25 mg鹽酸異丙嗪(上海禾豐制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H31021490)，預(yù)防變態(tài)反應(yīng)，輸注過程中需由醫(yī)護(hù)人員監(jiān)護(hù)，如有不適，對癥處理，出現(xiàn)嚴(yán)重副反應(yīng)終止治療。1個療程：1個化療周期聯(lián)合1個周期的過繼細(xì)胞免疫。治療2個療程。

1.4 觀察指標(biāo)

1.4.1疾病控制率 完全緩解：目標(biāo)病灶消失，無新病灶出現(xiàn)，維持4周及以上。部分緩解：目標(biāo)病灶最長徑之和減少≥30%，維持4周及以上。穩(wěn)定：目標(biāo)病灶最長徑之和減少<30%(或增大<20%)。進(jìn)展：目標(biāo)病灶最大徑之和增大≥20%(或出現(xiàn)新病灶)。完全緩解、部分緩解、穩(wěn)定例數(shù)之和占總例數(shù)的百分比為疾病控制率。

1.4.2細(xì)胞免疫 采集患者外周靜脈血，使用流式細(xì)胞儀檢測T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD8+、CD4+/CD8+水平。

1.4.3腫瘤標(biāo)志物 采集空腹外周血5 mL，離心(3 000 r·min-1，10 min)，取上清液，放射免疫法檢測血清細(xì)胞角蛋白19片段抗原21-1(cytokeratin 19 fragment antigen21-1，CYFRA21-1)，電化學(xué)發(fā)光法檢測血清糖鏈抗原125(carbohydrate antigen 125，CA125)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen ，CEA)。

1.4.4毒副反應(yīng) 如白細(xì)胞下降、寒戰(zhàn)、發(fā)熱發(fā)生率。

2 結(jié)果

2.1 疾病控制率研究組疾病控制率高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組疾病控制率比較[n(%)]

2.2 細(xì)胞免疫治療前，兩組CD3+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療2個療程后，研究組CD3+、CD8+、CD4+/CD8+水平優(yōu)于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組治療前后CD3+、CD8+水平比較

2.3 腫瘤標(biāo)志物治療前，兩組血清CYFRA21-1、CA125、CEA水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療2個療程后，研究組血清CYFRA21-1、CA125、CEA水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 治療前后兩組血清CYFRA21-1、CA125、CEA水平比較

3 討論

NSCLC患者免疫功能受到抑制，TP方案是治療NSCLC的常用化療方案，有一定效果，但化療后會加重免疫抑制，患者外周血淋巴細(xì)胞、白細(xì)胞明顯減少，流式細(xì)胞儀檢查能發(fā)現(xiàn)T細(xì)胞亞群明顯降低，損害機(jī)體特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)[2]。CIK細(xì)胞免疫是將患者外周血或骨髓的單個核細(xì)胞利用多種細(xì)胞因子(干擾素-γ、白介素-2等)誘導(dǎo)擴(kuò)增的異質(zhì)細(xì)胞(于體外進(jìn)行)，具有T淋巴細(xì)胞的強(qiáng)大抗瘤活性，體內(nèi)回輸CIK細(xì)胞，在不損傷自身免疫功能前提下，可直接殺傷腫瘤細(xì)胞，還能夠調(diào)節(jié)并增強(qiáng)患者免疫功能，恢復(fù)細(xì)胞正常生長調(diào)節(jié)，可望清除殘留腫瘤細(xì)胞，改善預(yù)后[3-5]。本研究結(jié)果顯示，研究組疾病控制率高于對照組，提示，兩者作用于NSCLC患者能提高治療效果，且兩組白細(xì)胞下降發(fā)生率，寒戰(zhàn)、發(fā)熱發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，表明加用CIK細(xì)胞免疫治療未明顯增加毒副反應(yīng)，兩組出現(xiàn)的白細(xì)胞減少與化療藥物骨髓抑制有關(guān)，CIK細(xì)胞回輸可發(fā)生寒戰(zhàn)、發(fā)熱，但體溫未超過38 ℃，對癥處理后癥狀消失。

CD8+又稱T抑制細(xì)胞，通過抑制B淋巴細(xì)胞等阻礙抗體形成及細(xì)胞免疫應(yīng)答，起到負(fù)向調(diào)節(jié)作用，CD8+越多，代表腫瘤細(xì)胞不斷增殖；CD3+屬于成熟淋巴細(xì)胞，免疫過程中活性最高；CD4+可協(xié)助其他細(xì)胞調(diào)節(jié)免疫，其水平越高表示機(jī)體免疫功能越強(qiáng)。本研究結(jié)果顯示，治療2個療程后，研究組CD3+、CD8+、CD4+/CD8+水平優(yōu)于對照組，提示CIK細(xì)胞免疫聯(lián)合TP方案化療可改善NSCLC患者免疫功能。

CA125在肺癌患者中升高明顯，其水平升高提示患者預(yù)后不良，有復(fù)發(fā)或死亡風(fēng)險；CYFRA21-1由上皮腫瘤細(xì)胞釋放，肺癌患者中CYFRA21-1水平高于正常人，可預(yù)測治療效果；CEA在多種惡性腫瘤中有升高，是評價肺癌病變程度的常用指標(biāo)，尤其在升高2倍時對肺癌診斷意義重大[6-8]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，治療2個療程后，研究組血清CYFRA21-1、CA125、CEA水平低于對照組，提示CIK細(xì)胞免疫聯(lián)合TP方案化療還可明顯降低NSCLC患者血清腫瘤標(biāo)志物水平，提高預(yù)后。

綜上，CIK細(xì)胞免疫聯(lián)合TP方案治療NSCLC患者，不僅能提高疾病控制率，還可改善患者免疫功能，降低腫瘤標(biāo)志物水平，具有一定的安全性。