（福建農(nóng)林大學(xué)國家甘蔗工程技術(shù)研究中心，福州 350002）

0 引言

在植物細(xì)胞中，大氣中的CO2通過光合作用轉(zhuǎn)化為植物可利用的糖源。糖不僅是植物中許多生物活動的能量來源，也是重要的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子。在植物中，糖是由葉片等營養(yǎng)器官通過胞間連絲或質(zhì)外體途徑轉(zhuǎn)運(yùn)至異養(yǎng)細(xì)胞或組織中（如種子）[1]。研究發(fā)現(xiàn)，有3 個(gè)基因家族編碼的蛋白在糖的細(xì)胞間運(yùn)輸中起著關(guān)鍵作用：單糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（Mono saccharide transporters，MSTs)，蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)體/蔗糖載體（Sucrose transporters/Sucrose carriers，SUT）[2-5]和雙向糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（Sugars will eventually be exported transporters，SWEET）[6-8]。糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的前兩個(gè)基因家族，MSTs 和SUT 在過去幾十年已經(jīng)得到了廣泛的研究[4，9-10]。而SWEET基因家族最近才被鑒定認(rèn)為是糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，通過對SWEET基因家族特征研究發(fā)現(xiàn)，它包含MtN3/saliva結(jié)構(gòu)域和7 個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域，參與了胞間和胞內(nèi)己糖和蔗糖的運(yùn)輸[7]。在植物體的生長發(fā)育、糖分代謝、植物與動物互作[11]等生物學(xué)過程中發(fā)揮重要作用。植物不能通過順濃度梯度直接吸收糖分，必須借助轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白來完成糖分的轉(zhuǎn)運(yùn)及生物代謝。研究表明SWEET 糖分轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白可以雙向轉(zhuǎn)運(yùn)糖類，促進(jìn)糖類順濃度梯度擴(kuò)散以及調(diào)控植物體內(nèi)糖類化合物的運(yùn)輸?shù)萚12-14]，因此研究SWEET基因?qū)μ穷惢衔锏霓D(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控與表達(dá)機(jī)理對提高甘蔗蔗桿糖含量等具有重要的理論意義[15]。

SWEET 蛋白廣泛存在于多種植物中，不僅在擬南芥、木薯、桉樹等雙子葉植物種存在，也在水稻、小麥、高粱等單子葉植物中存在[16]。研究證實(shí)了SWEET基因參與多種植物的生理生化過程和抗逆反應(yīng)[17]。如在水稻中Xa13/Os8N3/OsSWEET11小花和雄蕊中的表達(dá)量遠(yuǎn)高于其他組織，表明Xa13/Os8N3/OsSWEET11三個(gè)基因在水稻受精結(jié)實(shí)過程中發(fā)揮重要作用[18]；水稻OsSWEET4 和玉米的直系同源基因ZmSWEET4C都能夠編碼己糖轉(zhuǎn)運(yùn)體，這兩個(gè)基因的突變體導(dǎo)致種子不能正常灌漿，說明谷類籽粒胚乳基本傳遞層（BETL）缺乏己糖轉(zhuǎn)運(yùn)，不能維持淀粉貯藏胚乳的發(fā)育[19]。在擬南芥中，AtSWEET11 和AtSWEET12 定位于韌皮部薄壁細(xì)胞的質(zhì)膜上，SWEET11/12雙突變體植株葉片蔗糖輸出能力顯著降低[8，19]。SWEET基因還參與植物的非生物脅迫過程，水稻黃單胞菌（Xanthomonas oryzaepv.oryzaeXoo）可以通過攻擊OsSWEET11/Os8N3/Xa13和OsSWEET14/Xa25基因，以獲取營養(yǎng)支持自身生長，從而導(dǎo)致水稻白葉枯病[20]；ShSWEET1和ShSWEET2基因在甘蔗抗寒脅迫中發(fā)揮重要作用[21]。因此，現(xiàn)代研究認(rèn)為SWEET基因家族蛋白參與植物的不同的生物學(xué)和生理過程中，包括韌皮部負(fù)荷、葉片衰老、果糖保存、花粉營養(yǎng)、花蜜分泌和種子填充、病原菌敏感性等。

甘蔗（Saccharumspp.hybrids）是我國最主要的糖料作物，廣泛分布于我國廣西、廣東、云南等南方熱帶地區(qū)。目前，我國食糖總產(chǎn)僅次于巴西和印度，其中蔗糖是我國食糖主要來源，占食糖總量的92%以上[22]。此外，甘蔗還是重要的工業(yè)作物，可用于生產(chǎn)乙醇等生物能源[23]。由于SWEET基因負(fù)責(zé)糖類物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)，可以將甘蔗葉片中經(jīng)過光合作用轉(zhuǎn)化的蔗糖轉(zhuǎn)移到韌皮部薄壁細(xì)胞進(jìn)行裝載，最終轉(zhuǎn)入莖稈中的薄壁細(xì)胞進(jìn)行存儲積累。此外，SWEET基因可能還參與甘蔗的器官生長發(fā)育以及響應(yīng)病原細(xì)菌的互作過程[15]。因此研究甘蔗SWEET基因?qū)τ诹私馓橇衔镔|(zhì)在甘蔗中的轉(zhuǎn)運(yùn)作用和糖分積累有著重要的理論價(jià)值。本研究中，我們通過前期轉(zhuǎn)錄組測序發(fā)現(xiàn)一個(gè)甘蔗的SWEET基因，通過同源序列比對將其命名為ShSWEET2a。進(jìn)一步對該基因進(jìn)行了生物信息學(xué)分析、組織表達(dá)和不同逆境脅迫下的表達(dá)模式研究，旨在為深入研究該基因在甘蔗生長發(fā)育中的作用，為甘蔗品種改良、抗逆育種等領(lǐng)域奠定理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 植物材料

本研究所用甘蔗品種‘新臺糖22號’由國家甘蔗工程技術(shù)研究中心提供。挑選健壯的蔗莖單芽，用含有1.0 g/L 多菌靈的熱水（52 ℃）浸泡2 h，置于光照培養(yǎng)箱（寧波江南儀器廠）催芽，培養(yǎng)條件為：溫度30 ℃、光照16 h、相對濕度65%。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 植物樣品處理

不同部位組織取樣：選生理成熟期‘新臺糖22 號’品種植株6 株，取蔗莖表皮、蔗莖莖髓、蔗芽，最高可見肥厚帶葉（+1）葉片和地下部分蔗根供組織特異性分析。

非生物脅迫和外源物質(zhì)處理：（1）將兩個(gè)長勢相近的蔗苗移至清水中培養(yǎng)，待有新根長出來（5～7 d），用Hongland 營養(yǎng)液培養(yǎng)2 周。（2）選取長勢一致的植株幼苗分為3 組，第一組置于25%PEG6000 的Hongland 營養(yǎng)液中培養(yǎng)，并于0、3、6、12 h 取樣；第二組置于250 mmol/L NaCl的Hongland 營養(yǎng)液中培養(yǎng)，在0、6、12、24 h取樣；第三組用0.1 mmol/L ABA 對葉面進(jìn)行噴施處理，于0、6、12、24 h 取樣；第四組用0.1 mmol/L SA（含0.01%吐溫-20，v/v）對葉面進(jìn)行噴施處理，于0、6、12、24 h 取樣。每個(gè)處理每個(gè)時(shí)間點(diǎn)選取植株葉片、根部和假莖。以上樣品均設(shè)置3個(gè)生物學(xué)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)取5株混合。樣品用液氮速凍后，存于-80 ℃冰箱備用。

1.2.2 RNA提取

Trizol（Invitrogen,CA,USA）法提取上述實(shí)驗(yàn)材料中的各處理甘蔗總RNA，1%瓊脂糖凝膠檢測已獲得的RNA 質(zhì)量與濃度，若合格，放入-80 ℃冰箱保存。

1.2.3 目標(biāo)基因片段克隆

參照PrimeScript?RT reagent Kit with gDNA Eraser（Perfect Real Time）反轉(zhuǎn)錄試劑盒（TaKaRa，大連）操作步驟，以甘蔗葉片總RNA 為模板，合成cDNA，用于克隆。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室測序的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫得到甘蔗ShSWEET的unigene 序列，利用Primer5.0 軟件進(jìn)行基因特異性克隆引物的設(shè)計(jì)（表1），PCR 反應(yīng)程序?yàn)椋?4 ℃，3 min；94 ℃，30 s，50 ℃（根據(jù)上下游引物計(jì)算），30 s，72 ℃，2 min，35 個(gè)循環(huán)數(shù)；72 ℃，10 min；4 ℃，∞。將擴(kuò)增產(chǎn)物利用瓊脂糖膠回收試劑盒（北京天根生物科技有限公司）進(jìn)行回收純化，然后連接至pMD19-T（TaKaRa，大連）載體，再轉(zhuǎn)化到大腸桿菌感受態(tài)DH5α（TaKaRa，大連）中，涂至含有氨芐抗性的LB固體營養(yǎng)培養(yǎng)基上，挑取單菌落菌液PCR檢測，將獲得陽性克隆子的菌液送往福州博尚測序公司測序。

表1 本研究所用引物Table 1 Sequence of primers used in this study

1.2.4 目標(biāo)基因的表達(dá)分析

根據(jù)所克隆的基因序列設(shè)計(jì)特異性定量PCR 引物，以磷酸甘油醛脫氫酶（GAPDH）為內(nèi)參基因。使用在線網(wǎng)址（http://www.primer3plus.com/cgi-bin/dev/primer3plus.cgi）進(jìn)行定量引物設(shè)計(jì)，詳細(xì)引物序列見表1。以GAPDH基因作為內(nèi)參，以1.2.1 中得到的RNA 為模板進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，以逆轉(zhuǎn)錄后的cDNA 為模板進(jìn)行qRTPCR 分析。PCR反應(yīng)體系為20μL，包括HieffTMqPCR SYBR Green Master Mix 10μL（Yeasen，上海）、上下游引物（10 μmol/L）各0.4 μL、cDNA 模板1 μL、其余用DEPC-H2O 補(bǔ)足。PCR 擴(kuò)增反應(yīng)程序?yàn)椋?5 ℃，5 min；95 ℃10 s；60 ℃，30 s，進(jìn)行40 個(gè)循環(huán)后增加溶解曲線環(huán)節(jié)。每次反應(yīng)做3 次生物重復(fù)，3 次技術(shù)重復(fù)，并采用2－△△Ct法計(jì)算基因相對表達(dá)量，同時(shí)計(jì)算其標(biāo)準(zhǔn)差。

1.2.5 目標(biāo)基因生物信息學(xué)分析

通過在線網(wǎng)站https://web.expasy.org/protparam 進(jìn)行氨基酸序列分析；利用NCBI 的Blast 數(shù)據(jù)庫尋找相似氨基酸序列；利用MEGA6.0 軟件中的鄰近法（Neighbor-Joining）（1000bootstrap）構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹及應(yīng)用DNAMAN8.0 軟件分析蛋白相似性。分別利用在線網(wǎng)站TMHMM Server v 2.0（http://www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM-2.0）、https://npsa-prabi.ibcp.fr/cgi-bin/npsa_automat.pl?page=npsa_gor4.html預(yù)測目的蛋白的跨膜結(jié)構(gòu)域以及二級結(jié)構(gòu)。

2 結(jié)果與分析

2.1 甘蔗ShSWEET2a的基因克隆與基本性質(zhì)分析

經(jīng)過克隆測序最終我們得到包含一個(gè)840 bp 的開放讀碼框，編碼279 個(gè)氨基酸（圖1）的ShSWEET2a基因序列。ShSWEET2a基因編碼的氨基酸序列含有2 個(gè)MtN3_slv 保守結(jié)構(gòu)域，等電點(diǎn)和分子量分別為8.83和31 031.16 Da，不穩(wěn)定指數(shù)（Instability Index）為34.71，脂溶指數(shù)（Aliphatic index）為125.05，親水性（GRAVY）為1.031，具有7 個(gè)跨膜區(qū)。帶負(fù)電荷殘基（Asp+Glu）的總數(shù)為11，帶正電殘基（Arg+Lys）總數(shù)為16，由于基因的不穩(wěn)定系數(shù)小于40，所以ShSWEET2a基因編碼的蛋白質(zhì)相對穩(wěn)定。

圖1 ShSWEET2a基因序列分析Fig.1 Sequence analysis of ShSWEET2a gene

2.2 ShSWEET2a蛋白編碼的氨基酸序列分析

利用NCBI 的BLAST 數(shù)據(jù)庫對序列進(jìn)行同源性分析，結(jié)果表明該蛋白與SWEET 蛋白家族的同源性最高。為了進(jìn)一步研究該基因與其他基因的同源關(guān)系，利用DNAMAN 做同源性矩陣分析（表2）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，其與來源于玉米（Zea mays）、粟（Setaria italica）、高粱（Sorghum bicolor）、稷（Panicum miliaceum）、黍（Panicum hallii）、水稻（Oryza sativa）、二型花（Dichanthelium oligosanthes）的SWEET 蛋白相似性較高，其中與Sb-SWEET2a蛋白序列相似性達(dá)到了0.967，具有最高的相似性；與PmSWEET2a蛋白相似性最低，僅0.692。

表2 不同植物的SWEET2a 氨基酸序列同源性比較Table 2 Comparison of SWEET2a amino acid sequences from different plants

利用NCBI的BLASTP數(shù)據(jù)庫進(jìn)行序列同源性查詢，得到同源性大于60%的氨基酸序列，并以此構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹，采用鄰近法（Neighbor-Joining）BOOTSTRAP 值為1 000，泊松模型，其余均為默認(rèn)設(shè)置（圖2）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：ShSWEeT2a 與SbSWEETt2a 和ZmSWEET2a 親緣關(guān)系最近。表明甘蔗中的ShSWEET2a 屬于SWEET 蛋白家族的Clade I分支[17]。

圖2 甘蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ShSWEET2a系統(tǒng)進(jìn)化樹分析Fig.2 Phylogenetic tree analysis of sugar transporter ShSWEET2a in sugarcane

2.3 氨基酸序列跨膜分析及二級結(jié)構(gòu)預(yù)測分析

利用TMHMM Server v 2.0（http://www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM-2.0/）對ShSWEET2a 進(jìn)行蛋白結(jié)構(gòu)預(yù)測（圖3），結(jié)果表明，ShSWEET2a 具有7 個(gè)保守的跨膜結(jié)構(gòu)域，分別位于15～37、58～80、85～107、116～138、148～170、177～199和219～241。

圖3 ShSWEET2a跨膜結(jié)構(gòu)域預(yù)測Fig.3 The ShSWEET2a transmembrane domain prediction

蛋白二級結(jié)構(gòu)預(yù)測結(jié)果表明在ShSWEET2a氨基酸序列中有α-螺旋占37.28%、延伸鏈占25.45%、無規(guī)則卷曲占37.28%，α-螺旋和無規(guī)則卷曲是其基因結(jié)構(gòu)中的主要組成結(jié)構(gòu)元件（圖4）。

圖4 ShSWEET2a二級結(jié)構(gòu)預(yù)測Fig.4 Secondary structure prediction of ShSWEET2a

2.4 ShSWEET2a基因的組織特異性表達(dá)

利用qRT-PCR 對ShSWEET2a基因在甘蔗‘新臺糖22 號’品種不同組織器官中的表達(dá)模式進(jìn)行分析，結(jié)果表明（圖5），該基因在根、莖、葉中均有表達(dá)，其中葉中的表達(dá)量最高，莖中表達(dá)量僅次于葉，根中表達(dá)量最低。推測該基因在莖、葉中特異性表達(dá)。

圖5 ShSWEET2a基因在根、莖、葉中的相對表達(dá)量Fig.5 Relative expression of ShSWEET2a gene in roots,stalks and leaves

2.5 逆境脅迫下ShSWEET2a基因的表達(dá)

為進(jìn)一步了解ShSWEET2a基因在逆境脅迫下的表達(dá)情況，采用qRT-PCR技術(shù)，分析在PEG、NaCl、脫落酸（ABA）、水楊酸（SA）處理下，甘蔗幼苗中該基因的表達(dá)情況（圖6）。結(jié)果表明，該基因?qū)EG 脅迫敏感，基因表達(dá)量持續(xù)上升，在6h 時(shí)表達(dá)量最高，約為處理前的3 倍，隨后表達(dá)量下降，但仍高于處理前水平（圖6A）；在NaCl脅迫處理下，表達(dá)量先下降后上升，在24 h時(shí)達(dá)到最高，約為處理前的1.8 倍（圖6B）；在ABA脅迫處理下6 h后，該基因表達(dá)量急劇上升至處理前的4.4倍，達(dá)到最高值，隨后表達(dá)量下降（圖6C）；在SA脅迫處理下，該基因表達(dá)量呈現(xiàn)下調(diào)趨勢，脅迫處理6h后，表達(dá)量最低（圖6D）。

圖6 脅迫處理PEG（A）、NaCl（B）、ABA（C）、SA（D）甘蔗幼苗中ShSWEET2a基因的相對表達(dá)量Fig.6 Relative expression levels of ShSWEET2a in sugarcane seedlings under PEG(A),NaCl(B),ABA(C)and SA(D)stress

3 討論與結(jié)論

SWEET 糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在高等植物中廣泛存在，并且在水稻、玉米、擬南芥、木薯等植物中具有較為詳細(xì)的研究。甘蔗作為中國最重要的糖料作物，其SWEET基因的研究較少。本研究通過本實(shí)驗(yàn)室的轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果，對克隆出的SWEET基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析，該基因包含一個(gè)840 bp 的開放讀碼框，編碼279 個(gè)氨基酸。其編碼的蛋白含有SWEET蛋白的MtN3_slv 保守結(jié)構(gòu)域，蛋白預(yù)測結(jié)果表明其存在7 個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域，符合SWEET蛋白典型結(jié)構(gòu)特征。同源性矩陣分析得出，ShSWEET2a與SbSWEET2a、OsSweet2a、ZmSweet2a等具有較高相似性，其中與SbSWEET2a相似性最高。同時(shí)在進(jìn)化樹結(jié)果分析也顯示，我們克隆的這個(gè)基因編碼的蛋白也與高粱的SbSWEET2a聚集在一支，這些結(jié)果表明我們克隆的基因ShSWEET2a是現(xiàn)代栽培種甘蔗的雙向糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因。

許多研究表明，植物SWEET基因的表達(dá)具有組織特異性，并且與其所參與的植物生理代謝調(diào)控關(guān)系密切。如在擬南芥中，AtSWEET17在根中表達(dá)量最高，進(jìn)一步的研究證實(shí)該基因參與果糖的雙向運(yùn)輸從而維持根部胞質(zhì)果糖的穩(wěn)態(tài)；AtSWEET8和AtSWEET13則在花藥中特異性表達(dá)，參與花粉壁的外壁沉積和形成[24-25]；而AtSWEET15主要在擬南芥的衰老組織中表達(dá)與植物衰老有一定關(guān)系[26-27]。在最新的研究表明玉米籽粒灌漿期間ZmSWEET1b基因在葉片中高表達(dá)，是碳水化合物積累的正調(diào)節(jié)因子，ZmSWEET1b的突變會導(dǎo)致葉片碳饑餓、氣孔關(guān)閉等[28]。本研究表明ShSWEET2a在甘蔗葉和莖部的表達(dá)量顯著高于根部，意味著該基因可能參與經(jīng)過葉片光合作用轉(zhuǎn)化蔗糖的轉(zhuǎn)移，以及糖分在維管束中的運(yùn)輸存儲。而目前SWEET介導(dǎo)的糖轉(zhuǎn)運(yùn)過程在甘蔗中的具體作用機(jī)制尚不清楚，該基因編碼的蛋白如何起作用，這些科學(xué)問題需要進(jìn)一步的深入研究。

植物在逆境條件下，往往會通過提高體內(nèi)糖含量，來降低體內(nèi)滲透壓，以安全度過逆境，而SWEET蛋白作為重要的糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，在眾多植物中發(fā)現(xiàn)這類基因?qū)υS多非生物脅迫均有響應(yīng)[29]。在擬南芥中發(fā)現(xiàn)，在干旱環(huán)境下通過提高AtSWEET11、AtSWEET12和AtSWEET15的表達(dá)以提高蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)的效率，促進(jìn)碳水化合物向根部的運(yùn)輸，從而起到保護(hù)根系的目的[30]。本研究中我們發(fā)現(xiàn)，在PEG 脅迫下，ShSWEET2a基因同樣也出現(xiàn)了高表達(dá)，因此推測該基因參與了甘蔗抗旱的過程。類似的結(jié)果也在木薯的研究中發(fā)現(xiàn)，在干旱脅迫條件下大部分木薯MeSWEET基因的表達(dá)均發(fā)生了變化，其中表達(dá)量上調(diào)的基因中有近一半在進(jìn)化關(guān)系上較近[31]。在擬南芥中，AtSWEET15基因可以通過調(diào)節(jié)脫落酸途徑的信號通路從而提高植株對滲透脅迫的能力[24]。同樣我們的研究中發(fā)現(xiàn)，ABA 脅迫下，ShSWEET2a基因在24 h出現(xiàn)了明顯上調(diào)，這可能與其上游啟動子中相應(yīng)ABA的順式作用元件相關(guān)。因此，未來需要通過進(jìn)一步克隆上游啟動子序列來研究可能存在的順式作用元件，從而為研究該基因在甘蔗抗逆過程中的作用奠定基礎(chǔ)。而在SA脅迫下，我們發(fā)現(xiàn)ShSWEET2a基因的表達(dá)量呈現(xiàn)下調(diào)趨勢，由于SA 能夠?qū)Χ喾N植物病毒、真菌以及細(xì)菌病害產(chǎn)生抗性，同時(shí)SA 是植物產(chǎn)生HR和SAR必不可少的條件[32]。因此推測當(dāng)甘蔗受到病原侵染時(shí)，受侵細(xì)胞直接壞死，ShSWEET2a基因表達(dá)量降低，減少糖分轉(zhuǎn)運(yùn)量，以減少病原生存所需營養(yǎng)物質(zhì)。SWEET基因不僅參與著對非生物脅迫的響應(yīng)，還參與著生物脅迫的響應(yīng)，StSWEET11基因在晚疫病病菌的誘導(dǎo)下，出現(xiàn)高表達(dá)現(xiàn)象[33]。因此，我們推測ShSWEET2a基因可能在甘蔗發(fā)病過程中起著某種作用。

SWEET基因除了參與植物體的生長發(fā)育、糖分代謝、植物與微生物互作[11，15]等生物學(xué)過程以外，可能還具有其他功能。如小麥TaSWEET6在小孢子時(shí)期雄蕊中高表達(dá)，TaSWEET6基因參與了雄蕊發(fā)育的過程[17]。SWEET基因可能還具有調(diào)節(jié)動植物體內(nèi)營養(yǎng)元素的功能，如苜蓿MtN3/saliva/SWEET基因在硼/鈣離子平衡中可能發(fā)揮作用[34]；SWEET基因也可能影響植物產(chǎn)量，YANG 等[35]發(fā)現(xiàn)SWEET還與棉花產(chǎn)量性狀有關(guān)。因此，SWEET基因的作用還存在著極大的空間等著被挖掘，SWEET 蛋白具體的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，是否參與糖信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程及如何提高該蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)效率等問題仍有待我們?nèi)ド钊胙芯縖36]。本研究只是初步的對甘蔗ShSWEET2a基因進(jìn)行基因克隆與表達(dá)分析，為進(jìn)一步研究甘蔗SWEET基因提供理論依據(jù)。