翟勇聰，夏順利，王 雪，臧凱宏, 2，韓 濤, 2*

附子-干姜對(duì)慢性潰瘍性結(jié)腸炎小鼠腸黏膜微循環(huán)障礙的改善作用

翟勇聰1，夏順利1，王 雪1，臧凱宏1, 2，韓 濤1, 2*

1. 甘肅中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，甘肅 蘭州 730000 2. 甘肅省中藥藥理與毒理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅 蘭州 730000

研究附子-干姜對(duì)慢性潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）小鼠腸黏膜微循環(huán)障礙的改善作用。建立慢性UC小鼠模型，給予附子-干姜水煎液進(jìn)行干預(yù)，記錄各組小鼠體質(zhì)量、大便性狀及便血情況，進(jìn)行疾病活動(dòng)指數(shù)（disease activity index，DAI）評(píng)分；采用激光多普勒血流儀檢測(cè)各組小鼠腸黏膜血流灌注量、血細(xì)胞移動(dòng)速度和移動(dòng)血細(xì)胞濃度；采用ELISA法檢測(cè)各組小鼠血清中血小板活化因子（platelet activating factor，PAF）和組織因子（tissue factor，TF）水平；采用蘇木素-伊紅（HE）染色法觀察各組小鼠結(jié)腸組織病理改變情況；采用免疫組化法檢測(cè)各組小鼠腸黏膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞CD31表達(dá)并計(jì)算微血管密度（microvessel density，MVD）。與對(duì)照組比較，模型組小鼠DAI評(píng)分顯著增加（＜0.01），腸黏膜血流灌注量、血細(xì)胞移動(dòng)速度顯著下降（＜0.01），腸黏膜移動(dòng)血細(xì)胞濃度顯著升高（＜0.01），血清PAF、TF水平顯著升高（＜0.01），結(jié)腸組織CD31表達(dá)減少，腸黏膜微血管密度顯著減少（＜0.01）；與模型組比較，附子-干姜高劑量（6.06 g/kg）組小鼠DAI評(píng)分明顯降低（＜0.01），腸黏膜血流灌注量、血細(xì)胞移動(dòng)速度顯著升高（＜0.01），腸黏膜移動(dòng)血細(xì)胞濃度顯著降低（＜0.01），機(jī)體凝血因子PAF、TF水平顯著降低（＜0.01），腸黏膜MVD顯著增加（＜0.01）。附子-干姜可通過改善腸黏膜微循環(huán)障礙從而治療慢性UC。

附子-干姜；慢性潰瘍性結(jié)腸炎；腸黏膜；微循環(huán)；微血管密度

中醫(yī)認(rèn)為慢性UC屬“泄瀉”“久痢”“休息痢”“腸癖”等范疇，病位多以大腸為主，涉及脾、胃、肝、腎等臟腑，病理因素常伴有陽虛、血虛、氣滯、血瘀等證。慢性UC病機(jī)多以脾腎陽虛為主，久病不愈、陽氣已虛致使氣血不足、血瘀腸絡(luò)，治療多加用炮姜、熟附子溫補(bǔ)脾腎、溫通經(jīng)脈[5-8]。因此，中醫(yī)認(rèn)為慢性UC與血瘀之間存在密切關(guān)系[9]。

附子為毛茛科植物烏頭Debx.的子根的加工品，具有回陽救逆、補(bǔ)火助陽、溫陽通脈的功效，其性剛烈迅捷、走而不守，能通上達(dá)下、行表徹里、通行十二經(jīng)脈，破癥堅(jiān)、積聚、血瘕等[10-13]。附子無姜不熱，常與干姜配伍使用[14]。二者配伍在臨床上?？芍委熉阅c炎、克隆恩病、慢性胃炎等慢性疾病。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)[15]，制附子與干姜配伍對(duì)腎上腺素所致小鼠耳廓微循環(huán)障礙具有良好的改善作用。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，附子與干姜配伍具有改善微循環(huán)、增加血流速度、提高血流量的作用[16-17]。本研究采用葡聚糖硫酸鈉（dextran sulfate sodium salt，DSS）制備慢性UC模型，觀察附子-干姜對(duì)慢性UC小鼠血清血小板活化因子（platelet activating factor，PAF）、組織因子（tissue factor，TF）的水平以及腸黏膜微血管密度（microvessel density，MVD）、腸黏膜血流灌注量、血細(xì)胞移動(dòng)速度、移動(dòng)血細(xì)胞濃度的影響，為附子-干姜防治慢性UC腸黏膜微循環(huán)障礙提供依據(jù)。

1 材料

1.1 動(dòng)物

SPF級(jí)雄性C57BL/6小鼠60只，6～8周齡，體質(zhì)量20～22 g，購自甘肅中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證號(hào)SCXK（甘）2015-0002，飼養(yǎng)于甘肅中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心SPF級(jí)動(dòng)物房，溫度18～22 ℃，相對(duì)濕度50%～60%。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)經(jīng)甘肅中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（批準(zhǔn)號(hào)2019-195）。

1.2 藥材

制附子購自河北安草堂藥業(yè)有限公司，干姜購自河北百合藥業(yè)有限公司，經(jīng)甘肅中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥鑒定教研室李成義教授分別鑒定為毛茛科植物烏頭Debx.的子根的加工品、姜科植物姜Rosc.的干燥根莖。

1.3 藥品與試劑

固本益腸片（0.32 g/片，批號(hào)20191203）購自沈陽綠洲制藥有限公司；DSS（批號(hào)D7002900）購自上海翊圣生物有限公司；小鼠PAF ELISA試劑盒（批號(hào)20200909A）、小鼠TF ELISA試劑盒（批號(hào)20200909A）購自上海酶聯(lián)生物有限公司；CD31抗體（批號(hào)25u3337）購自美國(guó)Affnity公司；4%多聚甲醛通用組織固定液（批號(hào)XS190204）購自北京白鯊易科技有限公司；人尿糞隱血測(cè)定試劑盒（批號(hào)H-F01）購自南京建成生物工程研究所。

1.4 儀器

臺(tái)式電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏設(shè)備公司）；包埋機(jī)（浙江省金華市科迪儀器）；切片機(jī)、DM2500顯微鏡（德國(guó)Leica公司）；SHA-C水浴鍋（江蘇榮華公司）；iMark酶標(biāo)分析儀（美國(guó)Bio Rad公司）；MoorVMS-LDF激光多普勒血流儀（英國(guó)Moor Instruments公司）；Biofuge Stratos高速冷凍離心機(jī)（美國(guó)科峻儀器公司）。

2 方法

2.1 附子-干姜提取液的制備

根據(jù)課題組前期研究[15]，附子-干姜比例為1∶1，稱取附子、干姜各100 g，附子加10倍量水浸泡1 h，先煎1 h，再與干姜合煎30 min，濾過；連續(xù)煎煮3次，合并3次濾液，于水浴鍋上濃縮至200 mL，質(zhì)量濃度為1 g/mL（以生藥量計(jì)），于?20 ℃保存。

2.2 分組、造模與給藥

小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、固本益腸（1.16 g/kg）組及附子-干姜高、中、低劑量（6.06、3.03、1.51 g/kg）組，每組10只。對(duì)照組小鼠給予飲用水，其余各組連續(xù)給予2% DSS水溶液5 d，自第6天開始自由飲用水5 d，此為1個(gè)循環(huán)，如此反復(fù)進(jìn)行3個(gè)循環(huán)，共30 d，建立小鼠慢性UC模型[18]。附子-干姜提取液以蒸餾水稀釋至質(zhì)量濃度為0.30、0.15、0.08 g/mL的溶液，分別用作附子-干姜高、中、低劑量組；固本益腸片溶于無菌蒸餾水配制成質(zhì)量濃度為0.06 g/mL的溶液。第31天各給藥組ig相應(yīng)藥物（20 mL/kg），對(duì)照組與模型組ig等體積生理鹽水，1次/d，連續(xù)10 d。每天觀察各組小鼠精神狀態(tài)、飲食、飲水情況，記錄小鼠體質(zhì)量、大便性狀及便血情況，進(jìn)行疾病活動(dòng)指數(shù)（disease activity index，DAI）評(píng)分。體質(zhì)量下降率評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：0分為體質(zhì)量不變；1分為下降1%～5%；2分為下降6%～10%；3分為下降11%～15%。大便性狀評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：0分為正常；2分為大便松散；4分為稀便。便血評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：0分為正常；2分為潛血陽性；4分為肉眼血便。

隨著我國(guó)社會(huì)經(jīng)濟(jì)的快速增長(zhǎng)，公路建設(shè)項(xiàng)目不斷增加,公路工程施工具有周期長(zhǎng)、施工環(huán)境復(fù)雜以及影響因素多等特點(diǎn)，如果操作不當(dāng)或管理不到位，會(huì)引發(fā)各種安全事故，造人員傷亡和財(cái)產(chǎn)損失。因此，公路工程施工安全管理是公路工程項(xiàng)目的重要管理內(nèi)容，直接關(guān)系國(guó)家和人們的根本利益。由此可見，對(duì)公路工程施工安全管理中存在的問題進(jìn)行探究有重要的意義。

DAI＝(體質(zhì)量下降率評(píng)分＋大便性狀評(píng)分＋便血評(píng)分)/3

2.3 附子-干姜對(duì)慢性UC小鼠腸黏膜血流灌注量、血細(xì)胞移動(dòng)速度和移動(dòng)血細(xì)胞濃度的影響

小鼠末次給藥后禁食不禁水1 h，ip 4%水合氯醛麻醉，將小鼠仰臥固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)，在腹正中線作2～3 cm切口，暴露結(jié)腸，選擇距肛門2～4 cm處為下端觀察區(qū)，4～6 cm處為上端觀察區(qū)，排除劇烈振動(dòng)、心跳和呼吸對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響。在暴露腸斷面覆以紗布，用溫鹽水濕潤(rùn)，然后將光纖探頭輕輕放在觀察區(qū)結(jié)腸表面，穩(wěn)定5 min后進(jìn)行觀測(cè)。取10 s的平均值，在檢測(cè)開始15 s時(shí)記錄血流灌注量、血細(xì)胞移動(dòng)速度和移動(dòng)血細(xì)胞濃度。將觀察區(qū)上下端所測(cè)得的值取平均值作為整個(gè)結(jié)腸的血流灌注量、血細(xì)胞移動(dòng)速度和移動(dòng)血細(xì)胞濃度值。

2.4 附子-干姜對(duì)慢性UC小鼠血清中PAF和TF水平的影響

小鼠末次給藥后禁食不禁水1 h，眼眶取血，3000 r/min離心10 min，收集血清，按照試劑盒說明書檢測(cè)小鼠血清中PAF和TF水平。

2.5 附子-干姜對(duì)慢性UC小鼠結(jié)腸組織病理變化的影響

小鼠末次給藥后禁食不禁水1 h，脫頸椎處死，取結(jié)腸組織，清洗后于4%多聚甲醛中固定48 h，脫水、常規(guī)石蠟包埋、切片，附于高黏附載玻片上，于37 ℃過夜，蘇木素-伊紅（HE）染色，于顯微鏡下觀察結(jié)腸組織損傷變化。

2.6 附子-干姜對(duì)慢性UC小鼠腸黏膜MVD的影響

取各組小鼠結(jié)腸組織，清洗后于4%多聚甲醛中固定，脫水、常規(guī)石蠟包埋、切片。石蠟切片脫蠟后，加入3% H2O2阻斷內(nèi)源性氧化酶并用枸櫞酸抗原修復(fù)15 min，5% BSA封閉30 min，滴加一抗（1∶100），37 ℃復(fù)蘇35 min，PBS洗滌5 min，滴加生物素化的二抗，37 ℃孵育30 min，PBS洗滌5 min；滴加辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉卵白素工作液，37 ℃孵育30 min；DAB顯色、蘇木素復(fù)染、梯度乙醇脫水、二甲苯透明、封片后，于顯微鏡下觀察并拍照。CD31陽性表達(dá)呈棕褐色或棕黃色顆粒。在100×視野下觀察組織切片，選擇3個(gè)腸黏膜絨毛上微血管較多處，即熱點(diǎn)區(qū)；再于200×視野下計(jì)數(shù)熱點(diǎn)區(qū)微血管數(shù)目，求3個(gè)視野的平均值，作為腸黏膜絨毛組織的MVD[19]。

2.7 統(tǒng)計(jì)處理

3 結(jié)果

3.1 附子-干姜對(duì)慢性UC小鼠DAI評(píng)分的影響

如表1所示，與對(duì)照組比較，模型組小鼠DAI評(píng)分顯著增加（＜0.01）；與模型組比較，各給藥組DAI評(píng)分顯著降低（＜0.01）。

3.2 附子-干姜對(duì)慢性UC小鼠結(jié)腸組織病理變化的影響

如圖1所示，與對(duì)照組比較，模型組小鼠結(jié)腸黏膜炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯，腺體排列損傷嚴(yán)重，層次不清，腸上皮細(xì)胞再生嚴(yán)重、淋巴組織異常增生。各給藥組小鼠結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)趨于完整，杯狀細(xì)胞明顯增多，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯減少，腺體結(jié)構(gòu)趨于完整，增生組織明顯較少。

3.3 附子-干姜對(duì)慢性UC小鼠腸黏膜血流灌注量、血細(xì)胞移動(dòng)速度和移動(dòng)血細(xì)胞濃度的影響

如表2所示，與對(duì)照組比較，模型組小鼠腸黏膜血流灌注量、血細(xì)胞移動(dòng)速度顯著下降（＜0.01），移動(dòng)血細(xì)胞濃度顯著升高（＜0.01）。與模型組比較，固本益腸組、附子-干姜高劑量組小鼠腸黏膜血流灌注量、血細(xì)胞移動(dòng)速度顯著升高（＜0.01）、移動(dòng)血細(xì)胞濃度顯著下降（＜0.01）；附子-干姜中劑量組小鼠腸黏膜血流灌注量、移動(dòng)血細(xì)胞速度顯著升高（＜0.05）。

表1 附子-干姜對(duì)慢性UC小鼠DAI評(píng)分的影響()

與對(duì)照組比較：##＜0.01；與模型組比較：*＜0.05**＜0.01，下表同

##<0.01control group;*<0.05**<0.01model group, same as below tables

圖1 附子-干姜對(duì)慢性UC小鼠結(jié)腸組織病理變化的影響(HE, ×100)

3.4 附子-干姜對(duì)慢性UC小鼠血清中PAF和TF水平的影響

如表3所示，與對(duì)照組比較，模型組小鼠血清中PAF和TF水平顯著升高（＜0.01）；與模型組比較，各給藥組小鼠血清中PAF和TF水平均顯著降低（＜0.05、0.01）。

3.5 附子-干姜對(duì)慢性UC小鼠腸黏膜MVD的影響

如圖2所示，CD31陽性表達(dá)均定位于血管內(nèi)皮細(xì)胞胞質(zhì)，呈棕褐色顆?；蜃攸S色。對(duì)照組小鼠腸黏膜結(jié)構(gòu)清晰，CD31表達(dá)陽性的棕褐色顆粒分布于腸絨毛的中軸，數(shù)量較多；模型組小鼠腸黏膜結(jié)構(gòu)及腸絨毛可見邊緣缺損，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯，CD31表達(dá)陽性的棕褐色顆粒在腸絨毛的中軸分布不均，顆粒較少；各給藥組小鼠腸黏膜可見較多的棕褐色顆粒。

如表4所示，與對(duì)照組比較，模型組小鼠腸黏膜MVD顯著降低（＜0.01）；與模型組比較，固本益腸組及附子-干姜高、中劑量組小鼠腸黏膜MVD顯著升高（＜0.05、0.01）。

表2 附子-干姜對(duì)慢性UC小鼠腸黏膜血流灌注量、血細(xì)胞移動(dòng)速度和移動(dòng)血細(xì)胞濃度的影響()

表3 附子-干姜對(duì)慢性UC小鼠血清中PAF和TF水平的影響()

圖2 附子-干姜對(duì)慢性UC小鼠腸黏膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞CD31表達(dá)的影響(×400)

表4 附子-干姜對(duì)慢性UC小鼠MVD的影響()

4 討論

UC是消化系統(tǒng)中最常見的一種慢性疾病，常自結(jié)腸近端發(fā)展至全結(jié)腸導(dǎo)致黏膜損傷[20]。慢性UC患者5年內(nèi)結(jié)腸切除的風(fēng)險(xiǎn)為10%～35%，我國(guó)UC的患病率為0.011 6%[21-22]。目前臨床上主要以5-氨基水楊酸藥物、類固醇類、免疫抑制劑、生物制劑等基本藥物聯(lián)合肝素維持治療慢性UC，但因聯(lián)合用藥復(fù)雜，治療效果不佳，UC復(fù)發(fā)率極高、不良反應(yīng)較多。因此，尋找更為有效的治療UC藥物尤為重要。中醫(yī)藥通過辨證治療慢性UC，具有不良反應(yīng)小的優(yōu)點(diǎn)[23]。近年來有應(yīng)用中藥復(fù)方、中藥單味藥聯(lián)合西藥或者僅通過針刺改善微循環(huán)而治療UC的相關(guān)報(bào)道[24-26]，但因其復(fù)方藥味復(fù)雜，改善微循環(huán)機(jī)制不明確或者針刺治療方式單一，近期癥狀緩解效果良好，但遠(yuǎn)期療效不佳。附子-干姜來源于《三因極一病證方論》中的附子理中湯，具有溫中散寒、補(bǔ)氣健脾的功效，主治久病不愈、寒凝不化、腸鳴即瀉等癥，方中發(fā)揮主要作用的附子-干姜具有抗?jié)儭⒖寡?、改善微循環(huán)等作用。

中醫(yī)認(rèn)為“瘀”是UC的主要病因病機(jī)，病理基礎(chǔ)以脾腎陽虛為本、以“瘀”為標(biāo)，表明UC病程較長(zhǎng)，纏綿難愈，久病必有瘀，血瘀的產(chǎn)生必然加重UC的病情和復(fù)雜性[27-28]。久瀉傷腎則腎陽不足，脾陽無以溫煦，氣血瘀滯，化腐成膿，故導(dǎo)致腹痛、黏液膿血便。因此，可以用附子-干姜補(bǔ)腎陽間接化瘀從而改善脾腎陽虛、瘀血阻滯，從本質(zhì)上治療慢性UC。本研究結(jié)果顯示，附子-干姜可改善慢性UC小鼠皮毛光澤度、飲食飲水量及弓背、膿血便等癥狀，提示附子-干姜在改善慢性UC的臨床癥狀中具有明顯的優(yōu)勢(shì)。

腸黏膜局部的血液循環(huán)是黏膜局部防衛(wèi)能力的重要組成部分。良好的血液循環(huán)，是提供豐富的營(yíng)養(yǎng)和祛除有害代謝物質(zhì)的重要保證，對(duì)黏膜的完整性起重要作用[29]。目前，腸黏膜微循環(huán)障礙是慢性UC臨床研究中的熱點(diǎn)。慢性UC疾病使機(jī)體凝血系統(tǒng)異常、炎癥活化、凝血功能障礙，腸黏膜微血栓形成，腸黏膜血流灌注量減少，加重腸黏膜組織缺血、壞死，形成潰瘍，出現(xiàn)便血癥狀[30-31]。腸道炎癥可引起機(jī)體的抗凝系統(tǒng)紊亂、血小板功能改變，導(dǎo)致腸黏膜及其他部位血栓的形成。慢性UC腸黏膜活檢病理組織學(xué)中常見大量黏膜毛細(xì)血管血栓形成[32]。血栓形成使腸黏膜通透性改變，腸黏膜供血減少，使腸腔內(nèi)的有害物質(zhì)進(jìn)入血循環(huán)，黏膜毛細(xì)血管破壞，進(jìn)而使腸黏膜受損，誘導(dǎo)黏膜發(fā)生異常炎癥反應(yīng)[33]。慢性UC炎癥狀態(tài)可通過局部釋放血小板活化物（如TF、PAF）并激活其他炎癥細(xì)胞，使血液呈血栓狀態(tài)，阻塞腸黏膜微循環(huán)，加重腸黏膜缺氧損傷，形成惡性循環(huán)，使慢性UC反復(fù)發(fā)作[34]?；瘜W(xué)趨化物PAF在局部微循環(huán)障礙病理過程中起重要作用[35]。PAF的主要作用是刺激血小板，促進(jìn)血小板聚集，引起中性粒細(xì)胞聚集，增加血管通透性，加劇炎癥發(fā)生[36]。TF在生理性止血和血栓形成中起著重要的作用。在某些誘因作用下凝血系統(tǒng)TF從內(nèi)皮細(xì)胞釋放，與凝血因子結(jié)合形成復(fù)合物后被活化，誘發(fā)機(jī)體血液呈高凝狀態(tài)[37]。TF在慢性UC結(jié)腸組織中呈高表達(dá)水平[38]。因此，PAF、TF可作為檢驗(yàn)炎癥狀態(tài)下機(jī)體是否有凝血狀態(tài)的指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，附子-干姜可顯著降低慢性UC小鼠血清中PAF和TF水平，減少慢性UC機(jī)體血栓的形成。機(jī)體微血栓形成會(huì)使腸黏膜組織微循環(huán)血流灌注量減少，血細(xì)胞移動(dòng)速度減慢直至停止，移動(dòng)血細(xì)胞濃度上升，因此血流灌注量、血細(xì)胞移動(dòng)速度、移動(dòng)血細(xì)胞濃度是了解組織微循環(huán)狀態(tài)的重要指標(biāo)[39]。移動(dòng)血細(xì)胞濃度與組織中細(xì)胞的數(shù)量有關(guān)，可反映血細(xì)胞的聚集程度。血細(xì)胞移動(dòng)速度是微循環(huán)的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)，可反映微循環(huán)血流灌注量的情況。血流灌注量與血流速度呈正比，血流灌注量的降低主要由血流速度變慢、移動(dòng)血細(xì)胞濃度增高造成[40]。激光多普勒血流儀是微循環(huán)血流測(cè)量中無創(chuàng)、敏感、重復(fù)性較好的檢測(cè)設(shè)備，可以實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)觀察血流的變化[41-43]。本研究結(jié)果顯示，附子-干姜能顯著改善慢性UC小鼠腸黏膜移動(dòng)血細(xì)胞濃度，加快血流速度，減少紅細(xì)胞聚集，提高腸黏膜微循環(huán)血流灌注量影響。腸黏膜微循環(huán)血流灌注量減少，就會(huì)使腸黏膜功能毛細(xì)血管破壞。CD31是一種血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子，可以準(zhǔn)確地標(biāo)記新生微血管的數(shù)目和密度[44]。本研究結(jié)果顯示，慢性UC狀態(tài)下腸黏膜MVD顯著降低，附子-干姜高劑量組小鼠腸黏膜MVD顯著增加，表明附子-干姜能夠保護(hù)腸黏膜功能毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞，增加腸黏膜功能毛細(xì)血管密度。

綜上，本研究發(fā)現(xiàn)附子-干姜能夠降低機(jī)體凝血系統(tǒng)的紊亂，保護(hù)慢性UC腸黏膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞，增加腸黏膜毛細(xì)血管密度，增加腸黏膜血流灌注量，加快血細(xì)胞移動(dòng)速度，降低移動(dòng)血細(xì)胞濃度，促進(jìn)腸黏膜修復(fù)，改善腸黏膜微循環(huán)障礙。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Effect of-on intestinal mucosal microcirculation in mice with chronic ulcerative colitis

ZHAI Yong-cong1, XIA Shun-li1, WANG Xue1, ZANG Kai-hong1, 2, HAN Tao1, 2

1. School of Pharmacy, Gansu University of Chinese Medicine, Lanzhou 730000, China 2. Gansu Key Laboratory for TCM Pharmacology and Toxicology, Lanzhou 730000, China

To study the effect of Fuzi ()-Ganjiang () on intestinal mucosal microcirculation disorder in mice with chronic ulcerative colitis (UC).Mice model of chronic UC was established, and-decoction was given to intervene. Body weight, stool characteristics and blood in stool were recorded, disease activity index (DAI) score was performed. Laser Doppler Blood Flow Meter was used to detect intestinal mucosal blood perfusion, blood cell movement speed and mobile blood cell concentration. ELISA method was used to detect platelet activating factor (PAF) and tissue factor (TF) levels in serum. Pathological changes of colon tissue were observed by hematoxylin-eosin (HE) staining. Immunohistochemical method was used to detect the expression of CD31 in intestinal mucosal capillary endothelial cells of mice and the microvessel density (MVD) was calculated.Compared with control group, DAI score of mice in model group was significantly increased (< 0.01), intestinal mucosal blood perfusion and blood cell moving speed were significantly decreased (< 0.01), the concentration of moving blood cells in intestinal mucosa was significantly increased (< 0.01), PAF and TF levels in serum were significantly increased (< 0.01), CD31 expression in colon tissue was reduced, and intestinal mucosal microvessel density was significantly reduced (< 0.01). Compared with model group, DAI score of mice in high-dose (6.06 g/kg)-group was significantly reduced (< 0.01), intestinal mucosal blood perfusion and blood cell moving speed were significantly increased (< 0.01), concentration of moving blood cells in intestinal mucosa was significantly reduced (< 0.01), and coagulation factor PAF and TF levels in serum were significantly reduced (< 0.01), MVD of intestinal mucosa was significantly increased (< 0.01).-can treat chronic UC by improving intestinal mucosal microcirculation.

-; chronic ulcerative colitis; intestinal mucosa; microcirculation; microvessel density

R285.5

A

0253 - 2670(2021)07 - 1987 - 07

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.07.016

2020-11-24

國(guó)家自然科學(xué)基金地區(qū)基金資助項(xiàng)目（81860728）

翟勇聰（1994—），女，碩士研究生，從事中藥及復(fù)方應(yīng)用研究。Tel: 13466865255 E-mail: 735451739@qq.com

韓 濤（1966—），男，教授，碩士生導(dǎo)師，從事中藥及復(fù)方應(yīng)用研究。Tel: 13919446101 E-mail: zggsht@126.com

[責(zé)任編輯 李亞楠]