劉 懿，陳偉芝，邵亞望

(1.西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗科，陜西 西安710061；2.西安交通大學(xué)附屬紅會醫(yī)院檢驗科，陜西 西安 710054；3.陜西省咸陽市第一人民醫(yī)院兒科，陜西 咸陽 712000)

川崎病(Kawasaki disease,KD)是一種與冠狀動脈血管炎相關(guān)的兒童炎癥性疾病，是發(fā)達國家兒童獲得性心臟病的最常見病因。目前KD的病因尚不清楚[1]。研究表明KD可能并發(fā)動脈瘤、冠狀動脈血栓形成以及心肌梗死等[2]，早期診斷和治療可以改善預(yù)后。網(wǎng)膜素1(Omentin-1)是一種脂源性細胞因子，可能參與炎癥反應(yīng)、冠狀動脈粥樣硬化、血管損傷等疾病的病理過程[3]。脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2，Lp-PLA2)作為一種血管炎性標志物,與動脈粥樣硬化性心血管疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[4]。本研究通過分析KD患兒血清Omentin-1和Lp-PLA2水平的變化,旨在探討Omentin-1和Lp-PLA2與KD患兒冠狀動脈損傷的相關(guān)性,為KD臨床診治提供理論依據(jù)。報告如下。

1 資 料 與 方 法

1.1一般資料 選擇2012年1月—2020年1月西安交通大學(xué)附屬第一醫(yī)院收治的KD患兒93例，依據(jù)超聲心動圖結(jié)果分為冠狀動脈正常(normal coronary artery,NCA)組54例和冠狀動脈病變(coronary artery disease,CAD)組39例。KD診斷標準符合美國心臟病協(xié)會2004年提出的川崎病診斷標準[5]。冠狀動脈擴張診斷標準參照2012年川崎病并發(fā)冠狀動脈病變的臨床處理建議[6]。CAD組年齡<3歲患兒,冠狀動脈內(nèi)徑≥2.5 mm;年齡3～9歲患兒,冠狀動脈內(nèi)徑≥3.0 mm;年齡>9歲患兒,冠狀動脈內(nèi)徑≥3.5 mm。NCA組年齡<3歲患兒,冠狀動脈內(nèi)徑<2.5 mm；年齡3～9歲患兒,冠狀動脈內(nèi)徑<3.0 mm；年齡>9歲患兒,冠狀動脈內(nèi)徑<3.5 mm。CAD組包括冠狀動脈小瘤患者(冠狀動脈內(nèi)徑≤4 mm)30例,冠狀動脈中瘤患者(冠狀動脈內(nèi)徑>4～8 mm)5例和巨大冠狀動脈瘤患者(冠狀動脈內(nèi)徑>8 mm)4例。排除標準：傳染性單核細胞增多癥、膿毒血癥、猩紅熱、Steven-Johnson綜合征、伴有典型的心血管并發(fā)癥者。另選取同期體檢30名健康者作為對照組。3組性別、年齡、體重指數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

本研究經(jīng)西安交通大學(xué)附屬第一醫(yī)院、西安交通大學(xué)附屬紅會醫(yī)院及咸陽市第一人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準通過,所有研究對象監(jiān)護人知情同意并簽署知情同意書。

表1 3組一般資料比較 Table 1 Comparison of general data among three groups

1.2儀器與試劑 Omentin-1試劑盒購自美國 GBD公司。Lp-PLA2試劑盒購于天津康爾克生物科技有限公司。酶標儀購自荷蘭雷勃公司。采用 GE ViVid E9 Dimension型彩色多普勒超聲儀進行超聲檢查,M5S探頭(頻率2.0～4.5 MHz),12S探頭(頻率4.5～12.0 MHz),4V探頭(頻率2.5～3.6 MHz)。

1.3方法

1.3.1Omentin-1和Lp-PLA2水平檢測 所有受試者抽取空腹靜脈血5 mL,以3 000 r/min離心10 min,分離血清,于-20 ℃保存?zhèn)溆?，采用酶?lián)免疫吸附法檢測Omentin-1和Lp-PLA2水平。

1.3.2心臟彩色超聲檢查[7]所有受試者常規(guī)行超聲心動圖檢查?；純禾幱谒呋虬察o狀態(tài),取左側(cè)臥位,常規(guī)在劍突下、心尖、胸骨旁、胸骨上窩探查心臟各標準切面。于胸骨旁大動脈短軸切面略向下傾斜探頭,使之清晰顯示左側(cè)冠狀動脈主干及其分支近端,測量舒張期左側(cè)冠狀動脈主干(left main coronary artery,LMCA) 內(nèi)徑、左前降支(left anterior descending coronary artery,LADC) 內(nèi)徑及右側(cè)冠狀動脈近段(proximal right coronary artery,PRCA)內(nèi)徑。發(fā)現(xiàn)冠狀動脈瘤者測量瘤體內(nèi)徑和長度(至少測量3次,取平均值),并注意瘤內(nèi)有無血栓形成。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 21.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)。計量資料比較采用獨立樣本的t檢驗、單因素方差分析和SNK-q檢驗；計數(shù)資料比較采用χ2檢驗；相關(guān)性分析采用Pearson法；建立受試者工作特征曲線(ROC曲線)評價Omentin-1和Lp-PLA2對診斷KD和KD冠狀動脈損傷的預(yù)測價值。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.13組血清Omentin-1和Lp-PLA2水平比較 NCA組和CAD組Omentin-1水平低于對照組，Lp-PLA2水平高于對照組，CAD組Omentin-1水平低于NCA組，Lp-PLA2水平高于NCA組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 3組血清Omentin-1和Lp-PLA2水平比較Table 2 Comparison of serum levels of omentin-1 and Lp-PLA2 among three groups

2.23組冠狀動脈內(nèi)徑比較 CAD組LMCA內(nèi)徑、LADC內(nèi)徑和PRCA內(nèi)徑明顯高于NCA組和對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；NCA組和對照組LMCA內(nèi)徑、LADC內(nèi)徑和PRCA內(nèi)徑差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表3,圖1，2。不同年齡段CAD組LMCA內(nèi)徑、LADC內(nèi)徑和PRCA內(nèi)徑明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表3 3組冠狀動脈內(nèi)徑比較Table 3 Comparison of internal diameter of coronary artery among three groups

2.3相關(guān)性分析 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，CAD組中Omentin-1與LMCA內(nèi)徑、LADC內(nèi)徑和PRCA內(nèi)徑呈負相關(guān)(r=-0.623,-0.627,-0.650,P均<0.01)。Lp-PLA2與LMCA內(nèi)徑、LADC內(nèi)徑和PRCA內(nèi)徑呈正相關(guān)(r=0.629,0.587,0.615,P均<0.01)。

2.4ROC曲線分析 以NCA組和CAD組為因變量分析顯示，血清Omentin-1和Lp-PLA2診斷KD的AUC分別為[0.770(95%CI：0.635～0.905,P<0.001)，0.805(95%CI：0.685～0.926,P<0.001)]，敏感度和特異度分別為69.0%和93.7%，82.8%和81.2%(圖3)。以CAD組為因變量分析顯示,血清Omentin-1和Lp-PLA2診斷KD冠狀動脈損傷的AUC分別為[0.748(95%CI：0.612～0.883,P<0.001)，0.756(95%CI：0.619～0.893，P<0.001)]，敏感度和特異度分別為58.6%和93.9%、69.0%和88.6%(圖4)。說明血清Omentin-1和Lp-PLA2水平對KD及KD冠狀動脈損傷的診斷有臨床意義。

表4 不同年齡段CAD組與對照組冠狀動脈內(nèi)徑比較Table 4 Comparison of internal diameter of coronary artery between CAD group and control group at different ages

圖1 KD患兒左側(cè)冠狀動脈擴張

圖2 KD患兒左側(cè)、右側(cè)冠狀動脈巨大瘤樣擴張

圖3 血清Omentin-1和Lp-PLA2診斷KD的ROC曲線

圖4 血清Omentin-1和Lp-PLA2診斷冠狀動脈損傷的ROC曲線

3 討 論

研究顯示,KD的發(fā)生發(fā)展與機體的脂質(zhì)代謝紊亂有關(guān)。脂肪組織可分泌多種具有生物活性的多種炎性細胞因子,促進KD患兒血管的炎癥反應(yīng)過程[8]。Omentin是新近發(fā)現(xiàn)的一種脂肪因子,由313個氨基酸組成,相對分子質(zhì)量為34 000,具有較強的親水性，表達于人體內(nèi)臟的脂肪組織、內(nèi)皮細胞、血管平滑肌細胞及血管內(nèi)皮細胞中,其中脂肪組織及血清中含量較高。Omentin有2種亞型,包括Omentin-1和Omentin-2,血清中主要為Omentin-1。既往研究顯示，Omentin-1水平降低與心血管疾病、肥胖、糖尿病及腫瘤等疾病的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)[9]。接受阿托伐他汀治療的急性冠狀動脈綜合征患者的炎癥反應(yīng)明顯減輕,血清Omentin-1表達顯著增加[10]。研究發(fā)現(xiàn)，Omentin-1可能通過磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B通路調(diào)控泡沫巨噬細胞炎癥因子的釋放與凋亡[9]。Omentin-1水平降低能促進腫瘤壞死因子α等炎性因子的大量釋放，進而誘導(dǎo)血管炎癥反應(yīng)的發(fā)生[11]。Omentin-1在KD中的作用已被證實,KD患兒血清Omentin-1水平明顯降低,表明Omentin-1與KD的發(fā)生有關(guān),提示KD患兒可能存在嚴重的脂質(zhì)代謝紊亂及炎癥反應(yīng)。急性期KD患兒血清Omentin-1水平明顯低于亞急性期患兒,冠狀動脈損傷患兒血清Omentin-1水平明顯低于無冠狀動脈損傷患兒[11]。本研究結(jié)果與上述觀點相符。KD患兒早期可能合并冠狀動脈損傷或者冠狀動脈瘤[12]。本研究結(jié)果顯示，NCA組和CAD組Omentin-1水平低于對照組，CAD組Omentin-1水平低于NCA組。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清Omentin-1水平與LMCA內(nèi)徑、LADC內(nèi)徑和PRCA內(nèi)徑呈負相關(guān),推測該因子與KD的病情進展密切相關(guān),且其水平越低,患兒發(fā)生冠狀動脈損傷的風險越高。

Lp-PLA2是新近發(fā)現(xiàn)的動脈粥樣硬化相關(guān)血管內(nèi)皮損傷因子,人體血液循環(huán)中的Lp-PLA2能夠特異性水解內(nèi)膜下低密度脂蛋白中的氧化磷脂,生成促炎物質(zhì)氧化型游離脂肪酸和溶血卵磷脂[13],進而促進炎性反應(yīng)的發(fā)生和細胞毒素的釋放,Lp-PLA2與血管炎性反應(yīng)的發(fā)生有明顯相關(guān)性。研究表明,Lp-PLA2是心血管特異性的炎性標志物,可作為心血管事件的獨立預(yù)測因子[14]。目前Lp-PLA2已被應(yīng)用于心血管疾病的診斷和治療。周嬿等[15]的研究發(fā)現(xiàn),老年急性冠狀動脈綜合征患者血清Lp-PLA2水平顯著高于老年穩(wěn)定型心絞痛患者,并且高危組患者的Lp-PLA2水平顯著高于中危組和低危組。胥玲等[16]對KD患兒的研究顯示，急性期血清Lp-PLA2水平明顯升高,而恢復(fù)期明顯降低。Lp-PLA2對KD急性期的診斷具有較高的敏感度、特異度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值。另外,KD患者血清Lp-PLA2水平明顯增高。冠狀動脈損傷KD患兒血液Lp-PLA2水平明顯高于無損傷者[4]。表明Lp-PLA2可能誘導(dǎo)KD的發(fā)生,并可能導(dǎo)致冠狀動脈損傷。本研究結(jié)果顯示,NCA組和CAD組Lp-PLA2水平高于對照組，CAD組Lp-PLA2水平高于NCA組。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，Lp-PLA2水平與LMCA內(nèi)徑、LADC內(nèi)徑和PRCA內(nèi)徑呈正相關(guān)。提示，Lp-PLA2可能參與KD的病理過程,其水平的增高可能反映了KD病情的嚴重程度。

通過ROC分析的結(jié)果顯示,Omentin-1和Lp-PLA2對KD及KD冠狀動脈損傷的診斷有較好的臨床意義,并且具有較高的敏感度和特異度。

綜上所述,血清Omentin-1和Lp-PLA2與KD的發(fā)生和發(fā)展有關(guān),并可能參與KD患兒冠狀動脈損傷的病理過程。血清Omentin-1水平越低、Lp-PLA2水平越高,患兒并發(fā)冠狀動脈病變的風險越高。因此血清Omentin-1和Lp-PLA2可作為診斷KD及其并發(fā)冠狀動脈病變的可靠指標。