亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        漢坦病毒核酸和IgM抗體檢測(cè)方法在腎綜合征出血熱早期實(shí)驗(yàn)室診斷中的運(yùn)用

        2021-04-06 09:10:56鄧志士劉佩佩雷錦輝劉師文龔甜熊英
        關(guān)鍵詞:膠體金核酸陽性率

        鄧志士,劉佩佩,雷錦輝,劉師文,龔甜,熊英

        (1.江西省高安市人民醫(yī)院,江西 高安 330800;2.江西省疾病預(yù)防控制中心,江西 南昌 330029)

        腎綜合征出血熱(HFRS)是由漢坦病毒引起的一種在東亞特別是中國流行的鼠傳疾病[1],全球病死率為1%~5%[2]。其發(fā)病機(jī)制可能是一個(gè)復(fù)雜的多因素過程,包括免疫反應(yīng)、血小板功能障礙和內(nèi)皮細(xì)胞屏障功能失調(diào)[3]。發(fā)病早期采用有效的實(shí)驗(yàn)室診斷方法提高診斷率對(duì)提高HFRS患者治愈率,降低病死率,減輕疾病負(fù)擔(dān)非常重要[4]。

        HFRS早期實(shí)驗(yàn)室診斷傳統(tǒng)方法為血清特異性IgM抗體檢測(cè)[5],主要方法包括是酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)和膠體金法。然而IgM抗體檢測(cè)在早期臨床標(biāo)本應(yīng)用中顯示出較高的假陰性率,易漏診[6-7]。用隨著病毒核酸檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)步,不同類型的實(shí)時(shí)熒光PCR法在漢坦病毒檢測(cè)方面應(yīng)用也有報(bào)道[8-10],但是目前尚未見關(guān)于核酸檢測(cè)和IgM抗體檢測(cè)在HFRS早期病例診斷中的價(jià)值比較研究。

        本研究對(duì)93例HFRS疑似病例急性期血清標(biāo)本進(jìn)行回顧性檢測(cè)分析,采用實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法檢測(cè)漢坦病毒核酸,采用ELISA和膠體法檢測(cè)漢坦病毒IgM抗體,比較核酸檢測(cè)和血清學(xué)IgM檢測(cè)在HFRS早期病例診斷中的價(jià)值,為HFRS早期診斷提供更多依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 樣本來源 收集高安市人民醫(yī)院2020年5月至2021年5月HFRS疑似病例急性期血清標(biāo)本(發(fā)病至采樣≤7 d)93例,凍存于-70℃以下冰箱。疑似病例符合流行性出血熱診斷標(biāo)準(zhǔn)定義(WS278-2008)。

        1.2 試劑和儀器 漢坦病毒IgM抗體檢測(cè)試劑盒(北京萬泰)、核酸提取試劑(Qiagen)、核酸擴(kuò)增試劑(Thermo fisher Scientific)、核酸提取儀(Qiagen,96)、熒光定量PCR儀(ABI,7500型)、酶標(biāo)儀(安圖斯,anthous 2010)。

        1.3 核酸檢測(cè) 采用核酸提取儀提取血清樣本核酸,采用雙重實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)漢坦病毒核酸,具體參照文獻(xiàn)[11],該法最低檢出限為10 copies/μl。

        1.4 IgM抗體檢測(cè) 漢坦病毒IgM抗體檢測(cè)分別采用ELISA法和膠體金法,具體按照操作說明進(jìn)行。

        1.5 統(tǒng)計(jì)分析 采用WPS表格記錄數(shù)據(jù),采用SPSS 22.0軟件按配對(duì)設(shè)計(jì)的卡方檢驗(yàn)分析(Mc-Nemanr檢驗(yàn))進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,并用Kappa系數(shù)分析檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性。

        2 結(jié)果

        2.1 病例信息 高安市人民醫(yī)院是江西省HFRS監(jiān)測(cè)定點(diǎn)醫(yī)院。樣本和數(shù)據(jù)收集于高安市人民醫(yī)院傳染科病房,時(shí)間為2020年5月至2021年5月。按照《流行性出血熱診斷標(biāo)準(zhǔn)》,共收集到93例疑似HFRS病例,男性51例,女性42例,年齡6~89歲(平均46.95歲),發(fā)病到血清采集時(shí)間為0~7 d,中位數(shù)4 d。

        2.2 核酸檢測(cè)結(jié)果 實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法檢出漢坦病毒核酸陽性43例,陽性率46.24%,病毒型別均為漢灘型漢坦病毒。

        2.3 IgM抗體結(jié)果 93份血清標(biāo)本中ELISA法和膠體金法分別檢出檢出IgM陽性33例、32例,陽性率分別為:35.48%、34.41%,見表1。經(jīng)配對(duì)設(shè)計(jì)的卡方檢驗(yàn)分析,兩種血清學(xué)方法檢測(cè)結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=1>0.05),Kappa值為0.976。

        表1 兩種血清學(xué)方法檢測(cè)IgM抗體符合率對(duì)比表

        2.4 核酸檢測(cè)與抗體結(jié)果比較 核酸檢測(cè)與ELISA結(jié)果比較,見表2。ELISA法和核酸檢測(cè)法檢測(cè)結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P=0.002<0.05)。Kappa值為0.780。兩種方法符合率89.25%(83/93)。以實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法為標(biāo)準(zhǔn)[12],ELISA法靈敏度76.74%(33/43),特異度100%(50/50),陽性預(yù)測(cè)值100%(33/33),陰性預(yù)測(cè)值83.33%(50/60),準(zhǔn)確度89.25%(83/93)。

        表2 核酸檢測(cè)與ELIS法結(jié)果對(duì)比表

        核酸檢測(cè)與膠體金法結(jié)果比較,見表3。膠體金法與核酸檢測(cè)結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001<0.05),Kappa值為0.758。兩種方法符合率88.17%(82/93)。以實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法為標(biāo)準(zhǔn)[12],膠體金法靈敏度74.41%(32/43),特異度100%(50/50),陽性預(yù)測(cè)值100%(32/32),陰性預(yù)測(cè)值81.97%(50/61),準(zhǔn)確度88.17%(82/93)。

        表3 核酸檢測(cè)與膠體金法結(jié)果對(duì)比表

        2.5 血清抗體IgM和病毒核酸檢出情況與發(fā)病后血清采集時(shí)間關(guān)系 ELISA結(jié)合膠體金法共檢出IgM抗體陽性33份,血清抗體IgM和病毒核酸檢出情況與發(fā)病后采集時(shí)間關(guān)系,見圖1。10例IgM抗體陰性病毒核酸陽性標(biāo)本中6份發(fā)病至采樣時(shí)間≦3 d,平均3 d。

        圖1 血清IgM抗體和病毒核酸檢出情況與發(fā)病后血清采集時(shí)間比較圖

        3 討論

        HFRS的典型癥狀包括:發(fā)燒、頭痛、全身肌肉和腰痛等流感樣癥狀,以及厭食、惡心、嘔吐和腹瀉等胃腸道癥狀,最重要的是急性腎損傷。典型的HFRS分為五個(gè)階段:發(fā)熱、低血壓、少尿、多尿和恢復(fù)期[13]。典型癥狀臨床診斷難度不大,但是不典型HFRS病例非常多,尤其是兒童[14],對(duì)非典型癥狀和體征往往難以診斷,甚至誤診。據(jù)報(bào)道,HFRS可誤診為結(jié)石性膽囊炎、急性胰腺炎、膽管炎、闌尾炎、胃腸道出血[15]。因此,早期、快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)技術(shù),對(duì)準(zhǔn)確判斷HFRS,及時(shí)開展有效治療,對(duì)降低危重比率和改善預(yù)后具有非常重要的意義[11]。

        HFRS潛伏期4 d~45 d,多為7 d~14 d,多數(shù)患者在發(fā)病初期就可能產(chǎn)生特異IgM抗體,ELISA法檢測(cè)漢坦病毒特異性IgM曾被認(rèn)為是診斷急性漢坦病毒感染最有價(jià)值和最廣泛使用的方法。本研究結(jié)果顯示以熒光RT-PCR法為標(biāo)準(zhǔn),ELISA法和膠體金法特異度均為100%,準(zhǔn)確度分別為89.25%、88.17%。93份樣本中膠體金法與ELISA法結(jié)果僅1例出現(xiàn)不一致,陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而膠體金法相對(duì)ELISA法操作更簡(jiǎn)單,時(shí)間更短,不需要特殊儀器設(shè)備,據(jù)此推薦膠體金法檢測(cè)IgM抗體進(jìn)行漢坦病毒感染快速篩查。

        由于個(gè)體差異或檢測(cè)方法的局限,常見抗體檢出率低[6],或患者首次IgM抗體陰性之后繼續(xù)采血檢測(cè)出現(xiàn)IgM陽性的報(bào)道[5,7]。馬有祥[16]研究報(bào)道IgM抗體檢測(cè)陽性率與病后血清采集時(shí)間有關(guān)系,在病人發(fā)病3 d以后IgM抗體檢測(cè)更具有實(shí)用價(jià)值。本研究中以實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法為標(biāo)準(zhǔn),ELISA法靈敏度76.74%,膠體金法靈敏度74.41%。實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法檢出陽性率高于ELISA法和膠體金法,該法靈敏、準(zhǔn)確、可對(duì)病毒分型,適用于HFRS早期病例實(shí)驗(yàn)室診斷。10份IgM抗體陰性病毒核酸陽性標(biāo)本中,6份(60%)樣本病后血清采集時(shí)間≦3 d,提示發(fā)病后血清采集時(shí)間小于等于3 d的樣本進(jìn)行IgM抗體檢測(cè)容易出現(xiàn)漏診。

        隨著病毒核酸檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)步,實(shí)時(shí)熒光RT-PCR技術(shù)因靈敏、特異、易于標(biāo)準(zhǔn)化的特點(diǎn)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于病毒分子診斷中。新冠疫情之后,基層核酸檢測(cè)能力大大提升,縣級(jí)以上的醫(yī)療結(jié)構(gòu)都已具備實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)能力。

        因此我們建議醫(yī)療機(jī)構(gòu)運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光RTPCR法對(duì)疑似HFRS早期病例,尤其是發(fā)病3 d內(nèi)的病人進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷,提高實(shí)驗(yàn)室診斷的陽性率,減少漏診,切實(shí)做到早診斷、早治療。

        猜你喜歡
        膠體金核酸陽性率
        測(cè)核酸
        中華詩詞(2022年9期)2022-07-29 08:33:50
        全員核酸
        中國慈善家(2022年3期)2022-06-14 22:21:55
        第一次做核酸檢測(cè)
        快樂語文(2021年34期)2022-01-18 06:04:14
        核酸檢測(cè)
        中國(俄文)(2020年8期)2020-11-23 03:37:13
        膠體金在鉤體病監(jiān)測(cè)中相關(guān)因素的研究
        不同類型標(biāo)本不同時(shí)間微生物檢驗(yàn)結(jié)果陽性率分析
        A族鏈球菌膠體金免疫層析試紙條的制備及應(yīng)用
        急性藥物性肝損傷患者肝病相關(guān)抗體陽性率調(diào)查及其臨床意義
        密切接觸者PPD強(qiáng)陽性率在學(xué)校結(jié)核病暴發(fā)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中的應(yīng)用價(jià)值
        肌電圖在肘管綜合征中的診斷陽性率與鑒別診斷
        日本老年人精品久久中文字幕| 亚洲午夜福利在线视频| 久久午夜无码鲁丝片直播午夜精品| 性做久久久久久久| 久久久噜噜噜噜久久熟女m| 日本在线视频www色| 中文字幕久无码免费久久| 亚洲日韩欧美一区二区三区| 69久久精品亚洲一区二区| 揄拍成人国产精品视频| 国产免费丝袜调教视频| 无码人妻精品一区二区三区下载 | 久草福利国产精品资源| 草草浮力影院| 九九视频免费| 亚洲处破女av一区二区| 中文字幕久久波多野结衣av不卡| 饥渴的熟妇张开腿呻吟视频| 久久精品国产亚洲5555| 久久国产精品免费一区二区三区 | 激情亚洲不卡一区二区| 一二区成人影院电影网| 中字幕久久久人妻熟女| 日韩最新av一区二区| 亚洲久悠悠色悠在线播放| 色老板精品视频在线观看| 全免费a级毛片免费看| 亚洲码专区亚洲码专区| 乱人伦中文视频在线| 日本夜爽爽一区二区三区| 亚洲国产日韩综一区二区在性色| av影院手机在线观看| 国内精品人妻无码久久久影院导航| 亚洲a级片在线观看| 男女啪啪动态视频在线观看| 一二区成人影院电影网| 91久久精品国产91久久| 女同视频网站一区二区| 成人无码一区二区三区| 天躁夜夜躁狼狠躁| 亚洲人成网站在线播放小说|