邵鑫斌，張立寧，馬建忠，單樂(lè)州

(浙江省海洋水產(chǎn)養(yǎng)殖研究所 浙江省近岸水域生物資源開(kāi)發(fā)與保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

溫州市海洋生物遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江 溫州 325005)

綠鰭?cǎi)R面鲀(Thamnaconusseptentrionalis)隸屬鲀形目、馬面鲀屬，俗稱剝皮魚(yú)、馬面魚(yú)等，廣泛分布于我國(guó)東、黃海及朝鮮、日本沿岸[1]，也見(jiàn)于非洲東、南岸[2]。綠鰭?cǎi)R面鲀綜合利用的程度很高，除鮮食外，還制成罐頭、冷凍魚(yú)片、魚(yú)糜食品，經(jīng)深加工制成美味烤魚(yú)片暢銷國(guó)內(nèi)外，加工的魚(yú)片是出口的水產(chǎn)品之一。綠鰭?cǎi)R面鲀是優(yōu)良的養(yǎng)殖魚(yú)類品種。近年來(lái)，綠鰭?cǎi)R面鲀胚胎發(fā)育、仔稚魚(yú)的發(fā)育與生長(zhǎng)、苗種系統(tǒng)繁育、工廠化養(yǎng)殖及形態(tài)特征與染色體核型分析都有研究報(bào)道[3-7]，其中王波[4]和關(guān)鍵等[8]分別詳細(xì)描述了在18.7～19.2 ℃和21 ℃時(shí)該魚(yú)胚胎發(fā)育過(guò)程，但沒(méi)有研究溫度對(duì)綠鰭?cǎi)R面鲀胚胎發(fā)育和孵化率的具體影響。本研究系統(tǒng)性探討溫度對(duì)該魚(yú)胚胎發(fā)育和孵化率的影響，以促進(jìn)綠鰭?cǎi)R面鲀苗種繁育技術(shù)的發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 受精卵來(lái)源

2019年2月下旬開(kāi)始，在本所下屬洞頭基地室內(nèi)水泥池中強(qiáng)化培育的綠鰭?cǎi)R面鲀開(kāi)始自然產(chǎn)卵，收集分離出受精卵用于苗種生產(chǎn)，從中取少量受精卵用于本次研究。產(chǎn)卵時(shí)鹽度為22‰，水溫20 ℃。

1.2 受精卵孵化方法

采用6個(gè)恒溫水浴鍋，溫度分別設(shè)定為17、20、23、26和29 ℃，每個(gè)恒溫水浴鍋內(nèi)放置6個(gè)裝有1 000 ml沙濾海水的燒杯，將同樣數(shù)量的受精卵直接放入各燒杯，使其分散沉底，各燒杯用玻璃管微充氣，孵化過(guò)程中不換水。

1.3 孵化率記錄方法

各燒杯放入100顆受精卵，持續(xù)觀察孵化情況。各溫度組中，當(dāng)有半數(shù)以上的燒杯同時(shí)有魚(yú)苗在孵化，記為該溫度組的孵化時(shí)間。待孵化結(jié)束后，取出燒杯記錄魚(yú)苗數(shù)量。孵化期間不進(jìn)行其他操作。

1.4 胚胎發(fā)育觀察方法

各燒杯中放入200顆受精卵，前期每隔4～6 h、后期每隔12 h從燒杯中各取5顆受精卵用解剖鏡觀察發(fā)育情況，估算發(fā)育時(shí)間并記錄存活率，胚胎發(fā)育階段劃分參照關(guān)鍵等[8]的研究。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析和多重比較(LSD)，實(shí)際水溫、胚胎各期存活率和孵化率采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差形式表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 溫度對(duì)孵化率和胚胎發(fā)育各階段存活率的影響

29 ℃時(shí)，受精卵發(fā)育到神經(jīng)胚期后全部死亡，該組孵化率為0；其余各組孵化率隨溫度升高而升高，26 ℃組孵化率最高，為(47.33±12.19)%；除29 ℃組外，各組間沒(méi)有顯著差異(表1)，但20 ℃組各平行間差異最小，表示該溫度孵化最穩(wěn)定；胚胎發(fā)育到神經(jīng)胚期時(shí)，23 ℃組胚胎存活率最高，各組間沒(méi)有顯著差異；在之后發(fā)育到出膜前，僅29 ℃組因發(fā)育中止而與其余組差異顯著，而此階段存活率最高的是26 ℃組。表明溫度主要影響神經(jīng)胚期以后的胚胎發(fā)育。

表1 不同水溫下綠鰭?cǎi)R面鲀胚胎發(fā)育各階段的存活率和孵化率

2.2 溫度對(duì)胚胎發(fā)育和孵化時(shí)間的影響

本次研究中，開(kāi)始實(shí)驗(yàn)時(shí)的受精卵都處于囊胚期，距產(chǎn)卵高峰期約為6 h，其后，各階段胚胎發(fā)育速度隨溫度升高而明顯加快，孵化歷時(shí)明顯縮短(表2)；積溫的總體趨勢(shì)也在下降，但在20～23 ℃時(shí)保持相對(duì)穩(wěn)定。

表2 不同水溫下綠鰭?cǎi)R面鲀胚胎發(fā)育各階段歷時(shí)、孵化歷時(shí)和積溫

3 討論

溫度對(duì)綠鰭?cǎi)R面鲀胚胎發(fā)育和孵化率都有一定的影響。各階段胚胎發(fā)育速度隨溫度升高而明顯加快，當(dāng)溫度達(dá)到29 ℃時(shí)，胚胎發(fā)育到神經(jīng)胚期后停止，表明神經(jīng)胚期后的胚胎發(fā)育對(duì)溫度更敏感。在17～26 ℃的水溫區(qū)間內(nèi)，綠鰭?cǎi)R面鲀都能孵化，假如以孵化率50%以上為判斷胚胎發(fā)育適溫區(qū)的標(biāo)準(zhǔn)[9]，26 ℃時(shí)綠鰭?cǎi)R面鲀孵化率最接近50%，應(yīng)為其最適孵化溫度。但是，在本次研究中20 ℃組各平行間差異最小，孵化最穩(wěn)定，同時(shí)各組孵化率也沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異，而且自然情況下綠鰭?cǎi)R面鲀?cè)诖耗┫某醍a(chǎn)卵，水溫15～21 ℃。再者，從孵化歷時(shí)與積溫看，20 ℃組與23 ℃組相差不大，因此，20～23 ℃為綠鰭?cǎi)R面鲀胚胎發(fā)育適溫區(qū)，略高于王波等[4]認(rèn)為綠鰭?cǎi)R面鲀的最適孵化溫度17～21 ℃。趙傳絪等[10]研究水溫17 ℃時(shí)，歷時(shí)77～98 h孵化，關(guān)鍵等[8]的研究在(21.0±0.5)℃水溫中歷時(shí)50 h孵化，與本研究基本一致。