萬輝 樂玉霞

抗雙鏈DNA 抗體主要發(fā)生于系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者中［1］,這也是目前臨床上公認(rèn)的紅斑狼瘡高度特異性抗體,在臨床上被列為系統(tǒng)性紅斑狼瘡的一個(gè)重要診斷標(biāo)準(zhǔn),目前市場上已經(jīng)有諸多產(chǎn)品能夠?qū)ο到y(tǒng)性紅斑狼瘡的抗雙鏈DNA 抗體進(jìn)行測定［2］,常見的包含綠蠅短膜蟲間接免疫熒光法、歐蒙酶免疫斑點(diǎn)法以及膠體金快速斑點(diǎn)法。但在進(jìn)行檢測時(shí),不同的檢測方式應(yīng)用于患者檢測中產(chǎn)生的診斷結(jié)果也有所不同,并且臨床應(yīng)用也各有利弊,而醫(yī)務(wù)人員在對患者進(jìn)行檢查時(shí),認(rèn)為需要根據(jù)患者的病情狀況作出相應(yīng)的調(diào)整,這樣才能有助于提高患者的診斷準(zhǔn)確度［3］。本文中將2018 年1 月～2020 年3 月本院數(shù)據(jù)庫內(nèi)資料登記有效的120 例系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者作為研究對象,將綠蠅短膜蟲間接免疫熒光法、歐蒙酶免疫斑點(diǎn)法以及膠體金快速斑點(diǎn)法三種方式,分別應(yīng)用于抗雙鏈DNA 抗體的診斷中,分析對于系統(tǒng)性紅斑狼瘡的診斷準(zhǔn)確度,探討其臨床應(yīng)用價(jià)值,現(xiàn)將診斷結(jié)果與方法總結(jié)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2018 年1 月～2020 年3 月本院數(shù)據(jù)庫內(nèi)資料登記有效的120 例系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者作為研究對象,根據(jù)病情不同分為疾病活動(dòng)組及疾病穩(wěn)定組,每組60 例；同時(shí)選取本院中數(shù)據(jù)登記有效的60 例健康體檢者作為對照組。紅斑狼瘡患者男女比例為72∶48；年齡21～46 歲,平均年齡(31.5±4.8)歲。對照組男女比例為36∶24；年齡20～45 歲,平均年齡(32.1±5.6)歲。

1.2 方法 三組分別采用綠蠅短膜蟲間接免疫熒光法、歐蒙酶免疫斑點(diǎn)法以及膠體金快速斑點(diǎn)法對抗雙鏈DNA 抗體進(jìn)行檢測。

1.2.1 綠蠅短膜蟲間接免疫熒光法 在獲得血清標(biāo)本后,按照1∶10 進(jìn)行稀釋,試劑均選擇同一批次,在進(jìn)行檢查時(shí),如果發(fā)現(xiàn)抗雙鏈DNA 抗體呈現(xiàn)陽性,則繼續(xù)進(jìn)行血清倍比稀釋,測定最終稀釋度,醫(yī)務(wù)人員在對其進(jìn)行處理時(shí),嚴(yán)格按照各項(xiàng)說明書操作。在檢查結(jié)果中發(fā)現(xiàn)動(dòng)基體顯示均勻熒光或者邊緣有明顯增強(qiáng)熒光則將結(jié)果記錄為陽性,而細(xì)胞核或者鞭毛機(jī)體出現(xiàn)熒光則記錄為陰性。

1.2.2 歐蒙酶免疫斑點(diǎn)法 在進(jìn)行記錄時(shí)獲得血清標(biāo)本,并且按照1∶100 進(jìn)行稀釋,按照要求進(jìn)行操作。首先對試劑進(jìn)行30 min 震蕩,隨后浸泡15 min 再加以稀釋,酶結(jié)合物進(jìn)行30 min 震蕩,清洗15 min 后,浸泡在加底物溶液中溫育,搖床震蕩10 min,對最終的顯色結(jié)果進(jìn)行判定,各項(xiàng)操作由同組醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行,并且按照說明書開展實(shí)驗(yàn)。

1.2.3 膠體金快速斑點(diǎn)法 首先采用測定板加2 滴稀釋液,等待其干后再加100 μl 血清,等待其滲濾后將濾液去除,隨后加金標(biāo)液等待滲干隨后加洗液,可由醫(yī)務(wù)人員對最終的結(jié)果進(jìn)行肉眼判斷。

1.3 觀察指標(biāo) 對比三種檢測方式對各組抗雙鏈DNA 抗體的診斷陽性率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

綠蠅短膜蟲間接免疫熒光法對疾病活動(dòng)組患者抗雙鏈DNA 抗體的檢測陽性率為95.00%(57/60),對疾病穩(wěn)定組患者的檢測陽性率為71.67%(43/60),對對照組的檢測陽性率為5.00%(3/60)；歐蒙酶免疫斑點(diǎn)法對疾病活動(dòng)組患者抗雙鏈DNA 抗體的檢測陽性率為76.67%(46/60),對疾病穩(wěn)定組患者的檢測陽性率為61.67%(37/60),對對照組的檢測陽性率為10.00%(6/60)；膠體金快速斑點(diǎn)法對疾病活動(dòng)組患者抗雙鏈DNA 抗體的檢測陽性率為80.00%(48/60),對疾病穩(wěn)定組患者的檢測陽性率為65.00%(39/60),對對照組的檢測陽性率為8.33%(5/60)。三種檢測方法對疾病活動(dòng)組患者抗雙鏈DNA 抗體的檢測陽性率高于疾病穩(wěn)定組、對照組,疾病穩(wěn)定組高于對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；綠蠅短膜蟲間接免疫熒光法對系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者抗雙鏈DNA 抗體的檢測陽性率為83.33%(100/120),均高于歐蒙酶免疫斑點(diǎn)法的69.17%(83/120)、膠體金快速斑點(diǎn)法的72.50%(87/120),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1,表2,表3。

表1 綠蠅短膜蟲間接免疫熒光法對三組抗雙鏈DNA 抗體的檢測陽性率［n(%)］

表2 歐蒙酶免疫斑點(diǎn)法對三組抗雙鏈DNA 抗體的檢測陽性率［n(%)］

表3 膠體金快速斑點(diǎn)法對三組抗雙鏈DNA 抗體的檢測陽性率［n(%)］

3 討論

系統(tǒng)性紅斑狼瘡在目前臨床上較為常見,這種病癥在進(jìn)行檢查時(shí)［4］,主要通過對抗雙鏈DNA 抗體進(jìn)行檢查,能夠有效提高患者的診斷準(zhǔn)確率。系統(tǒng)性紅斑狼瘡目前在臨床上是一種十分常見的免疫性疾病,這種病癥會(huì)對患者的機(jī)體功能造成極大的損傷,所以醫(yī)務(wù)人員在開展治療前,需要做好患者的病情分析和診斷,了解患者的個(gè)體狀況并且對患者進(jìn)行有效的管理［5,6］,這樣才能使患者的治療總有效率得到提升。本次研究中將綠蠅短膜蟲間接免疫熒光法、膠體金快速斑點(diǎn)法以及歐蒙酶免疫斑點(diǎn)法應(yīng)用于患者的病情診斷中,可以看出綠蠅短膜蟲間接免疫熒光法的檢測陽性率相較于其他兩種檢測方法來說明顯更高,并且能夠幫助醫(yī)務(wù)人員了解患者的病情,并且這種檢測方案還能夠在一定程度上避免出現(xiàn)誤診或者漏診的情況。

抗雙鏈DNA 抗體是目前臨床上對系統(tǒng)性紅斑狼瘡進(jìn)行診斷的一項(xiàng)具有較高價(jià)值的客觀指標(biāo)［7］,但缺乏相應(yīng)的診斷金標(biāo)準(zhǔn)［8］。雖然目前臨床研究人員認(rèn)為綠蠅短膜蟲間接免疫熒光法檢測方式的診斷準(zhǔn)確度最為良好,但這種檢測也僅僅局限于方法上的差異。綠蠅短膜蟲間接免疫熒光法在對抗雙鏈DNA 進(jìn)行檢查時(shí),由于目前短膜蟲在臨床上被認(rèn)為是一種雪柱邊毛蟲,其雙鏈DNA 含量極為純凈,并且不含有單鏈DNA,抗原性較為特殊［9］。膠體金快速斑點(diǎn)法在進(jìn)行檢測時(shí)診斷準(zhǔn)確率相較于綠蠅短膜蟲間接免疫熒光法診斷來說略低,究其原因可能是由于雙鏈DNA 抗原在純度包被等生化處理過程中,很容易導(dǎo)致DNA 內(nèi)部位點(diǎn)出現(xiàn)人為暴露,進(jìn)而影響抗單鏈DNA 抗體存在而引發(fā)非陽性反應(yīng),這種現(xiàn)象可能會(huì)導(dǎo)致患者的診斷準(zhǔn)確率受到影響［10］。

抗雙鏈DNA 抗體檢查不僅能夠幫助醫(yī)務(wù)人員對系統(tǒng)性紅斑狼瘡進(jìn)行診斷,還能夠有效對紅斑狼瘡的活動(dòng)性和治療狀況進(jìn)行評估,通過這種方式能夠幫助醫(yī)務(wù)人員確定患者的病情狀況,了解患者的紅斑狼瘡發(fā)展,對于患者后續(xù)治療工作的開展來說有積極意義。值得注意的是,在應(yīng)用不同的診斷方式對患者進(jìn)行診斷時(shí),不同的診斷方式在應(yīng)用過程中產(chǎn)生的差異較為明顯,相關(guān)醫(yī)務(wù)人員需要了解患者的病理學(xué)特征并做出進(jìn)一步的改進(jìn),這樣才有助于提高患者的診斷效果。

在對系統(tǒng)性紅斑狼瘡進(jìn)行治療時(shí),激素是其中的常用藥物,而長期應(yīng)用大劑量的糖皮質(zhì)激素,可能會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)較多的不良反應(yīng),老年患者常見骨質(zhì)疏松以及脊柱壓縮性骨折,腎上腺素萎縮或電解質(zhì)紊亂等病癥在臨床上也較為常見,所以在用藥過程中需要注意觀察患者是否存在消化道癥狀,同時(shí)需要密切觀察患者的睡眠以及情緒變化,注意監(jiān)測患者血糖、血壓和肝功能變化,如果發(fā)現(xiàn)異常,應(yīng)當(dāng)及時(shí)告知醫(yī)師,幫助患者進(jìn)行處理。系統(tǒng)性紅斑狼瘡在治療過程中,患者需要時(shí)常應(yīng)用免疫抑制藥物,患者在用藥過程中會(huì)出現(xiàn)心臟以及視網(wǎng)膜損傷,所以患者在接受免疫抑制藥物治療時(shí),需要對患者的視力和心率變化進(jìn)行監(jiān)測,建議至少每半年對眼底進(jìn)行一次探查,同時(shí)做一次心電圖檢測,以保證患者視網(wǎng)膜以及心肌功能發(fā)生損傷時(shí)能夠及時(shí)對其進(jìn)行治療。

綜上所述,三種診斷方式對于抗雙鏈DNA 抗體均具有較高的診斷陽性率,并且在對患者的各個(gè)時(shí)期進(jìn)行診斷時(shí),產(chǎn)生的診斷效果較為良好,而三種診斷方式應(yīng)用于患者的診斷中,可以選擇聯(lián)合診斷,這樣有助于避免誤診或者漏診。