譚仕廉 郭 樂 申元英 （大理大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)微生物學(xué)與免疫學(xué)教研室，大理671000）

黏膜屏障是由黏液層、上皮細(xì)胞層、參與構(gòu)筑屏障的蛋白以及免疫活性物質(zhì)等組成，是阻止外界抗原如微生物、過(guò)敏原和致癌物等入侵黏膜組織的第一道防線，在維持黏膜免疫穩(wěn)態(tài)方面具有重要作用。多種疾病都有黏膜屏障功能的破壞和黏膜炎癥的發(fā)生，黏膜上皮細(xì)胞黏附連接和緊密連接的結(jié)構(gòu)和通透性異常致使屏障功能受損，外界抗原通過(guò)受損的黏膜屏障進(jìn)入機(jī)體，激活大量促炎癥細(xì)胞，從而加重黏膜炎癥反應(yīng)。黏膜屏障功能受損導(dǎo)致黏膜炎癥，黏膜炎癥又進(jìn)一步損傷屏障功能，兩者互為因果，最終導(dǎo)致黏膜相關(guān)組織損傷性病變。

近年來(lái)研究表明，miRNAs 在黏膜屏障功能和黏膜炎癥反應(yīng)的調(diào)控中起重要作用。本文介紹了miRNAs 的生物功能，并探討miRNAs 在調(diào)節(jié)黏膜屏障功能中的作用，此外還總結(jié)了多種miRNAs 在黏膜炎癥中的表達(dá)變化及其在黏膜炎癥性疾病中的調(diào)控作用。

1 miRNAs的生物功能

miRNAs 是進(jìn)化上高度保守且廣泛存在于真核生物中的一類非編碼單鏈小RNA 分子，大小約為19~25 個(gè)核苷酸，與信使RNA（mRNA）結(jié)合抑制靶基因的表達(dá)或翻譯來(lái)發(fā)揮轉(zhuǎn)錄后調(diào)控作用。1993年，AMBROS 和RUVKUN 研究組在秀麗隱桿線蟲中發(fā)現(xiàn)了第一個(gè) miRNA：lin-4［1］，7 年后發(fā)現(xiàn)了第一個(gè)哺乳動(dòng)物 miRNA：let-7［2］，miRNAs 的發(fā)現(xiàn)徹底改變了分子生物學(xué)領(lǐng)域；隨后研究證明miRNAs 可以調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、分化、增殖以及死亡等關(guān)鍵過(guò)程［3］；篩選研究還顯示miRNAs 具有組織和細(xì)胞特異性功能［4］。有研究顯示，大約三分之二的人類基因是由轉(zhuǎn)錄后機(jī)制調(diào)控的，這一數(shù)據(jù)顯示了miRNAs 在維持機(jī)體正常功能和調(diào)控人類疾病發(fā)生發(fā)展中起到至關(guān)重要的作用［5］。

迄今為止大多數(shù)研究表明，miRNAs 在其靶mRNA 的3'UTR 處與特定序列結(jié)合，從而誘導(dǎo)翻譯抑制或 mRNA 的失活降解［6］。然而在 mRNA 其他區(qū)域，包括5'UTR 和編碼序列以及啟動(dòng)子區(qū)域，也發(fā)現(xiàn)了miRNAs 結(jié)合位點(diǎn)［7-8］。在一定條件下，miRNAs還可能激活翻譯或調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄［9-10］。miRNAs與其靶基因的相互作用是動(dòng)態(tài)的，并且依賴許多因素，如miRNAs 的亞細(xì)胞位置、miRNAs 與靶 mRNA 的豐度以及 miRNA-mRNA 相互作用的親和性［11］。miRNAs還可被分泌到細(xì)胞外液中，并通過(guò)小泡（如外泌體）或與蛋白質(zhì)結(jié)合運(yùn)輸?shù)桨屑?xì)胞，作為化學(xué)信使來(lái)介導(dǎo)細(xì)胞間的通訊［12］。

大部分miRNAs的形成是由DNA序列轉(zhuǎn)錄為初級(jí) miRNA（pri-miRNA），加工為前體 miRNA（premiRNA），最終形成成熟miRNAs。目前已鑒定出的人類成熟 miRNAs 序列超過(guò) 2 500 個(gè)［13］。miRNAs 本身的表達(dá)調(diào)控機(jī)制是復(fù)雜而嚴(yán)格的，其生物形成過(guò)程中的任何中斷或偏差都可能改變miRNAs 表達(dá)，并因此改變基因表達(dá)。最近一項(xiàng)研究顯示Drosha、Exportin-5 和 Dicer 在 miRNAs 生物形成中不可或缺［14］，另一項(xiàng)研究表明 Argonaute 蛋白在轉(zhuǎn)錄后提高成熟miRNAs 的表達(dá)，降低miRNAs 降解，增加了miRNAs 的半衰期［15］。此外，有研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)典轉(zhuǎn)錄因子也參與調(diào)控miRNAs，以組織或發(fā)育特異性的方式調(diào)控其表達(dá)［16］。由于miRNAs 在生理和病理過(guò)程如炎癥中的重要性，因此深入理解miRNAs 的表達(dá)調(diào)節(jié)是至關(guān)重要的。

2 miRNAs在調(diào)節(jié)黏膜屏障功能中的作用

黏膜表面通常與不計(jì)其數(shù)的外來(lái)物質(zhì)相接觸，包括食物、共生菌、病原體、過(guò)敏原、致癌物等。臨床研究顯示95%以上感染皆發(fā)生于黏膜，因此維持正常黏膜屏障功能在抵御外界抗原感染中具有重要意義。

許多研究表明，miRNAs 對(duì)維持黏膜完整性至關(guān)重要。例如，Dicer1 酶基因缺失的小鼠表現(xiàn)出腸上皮組織紊亂、上皮細(xì)胞非正常凋亡增加并出現(xiàn)黏膜的缺失［17］。miRNAs 對(duì)于正常黏膜上皮細(xì)胞的發(fā)育和增殖不可或缺。已知成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（fibroblast growth factor，F(xiàn)GF）是調(diào)控形成肺分支形態(tài)和上皮細(xì)胞增殖的關(guān)鍵信號(hào)，其受體是酪氨酸激酶信號(hào)之一，miR-let-7a靶向結(jié)合位于酪氨酸激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)下游的Ras 蛋白的mRNA，抑制Ras 蛋白表達(dá)，從而調(diào)控肺上皮細(xì)胞增殖［18］。此外，LU 等［19］發(fā)現(xiàn)miR-17-92 可靶向調(diào)節(jié)腫瘤抑制基因Rbl2 的表達(dá)，促進(jìn)肺上皮祖細(xì)胞的增殖并抑制其分化，miR-17-92 簇缺陷的小鼠表現(xiàn)出肺發(fā)育不全，室間隔缺損以及B 細(xì)胞發(fā)育異常，實(shí)驗(yàn)小鼠出現(xiàn)異常的肺黏膜表型。

除了黏膜完整性，miRNAs 還參與調(diào)控黏膜屏障功能。上皮細(xì)胞之間的緊密連接是構(gòu)成黏膜屏障的重要組成部分［20］，YANG 等［21］觀察到炎癥性腸病患者腸道黏膜組織和外周血miR-21明顯升高，升高的miR-21 作用于其目的基因RhoB mRNA，使RhoB 表達(dá)明顯減少，RhoB 與腸道通透性密切相關(guān)，RhoB 表達(dá)減少可導(dǎo)致腸道黏膜組織和體外培養(yǎng)細(xì)胞的緊密連接蛋白o(hù)ccludin 和ZO-1 明顯減少，從而破壞上皮屏障。miR-122a 是另一種參與調(diào)控腸上皮緊密連接的miRNA，通過(guò)直接誘導(dǎo)緊密連接蛋白o(hù)ccludin mRNA 降解，導(dǎo)致腸上皮細(xì)胞中occludin 減少，TNF-α誘導(dǎo)的腸上皮通透性增加，該研究提示了靶向降低miR-122a 以保護(hù)腸道屏障的可行性［22］。此外，有研究表明，miR-495 靶向下調(diào)STAT3 的表達(dá)，抑制JAK-STAT3 炎性信號(hào)通路激活，從而改善了小鼠的腸黏膜屏障功能［23］。

3 miRNAs在調(diào)節(jié)黏膜炎癥反應(yīng)中的作用

3.1 miRNAs 在急性肺損傷中的作用 急性肺損傷（acute lung injury，ALI）的特征是肺內(nèi)嚴(yán)重炎癥，肺泡-毛細(xì)血管膜完整性和肺黏膜屏障破壞，導(dǎo)致大量中性粒細(xì)胞和其他炎癥細(xì)胞流入肺泡，釋放炎癥和細(xì)胞毒性介質(zhì)，肺泡內(nèi)充滿富含蛋白質(zhì)的液體，表面活性物質(zhì)的合成和代謝受損以及局部促凝狀態(tài)，因此，抑制炎性反應(yīng)可能是ALI治療的關(guān)鍵［24］。

許多學(xué)者證明了不同的miRNAs 在調(diào)控ALI 炎癥中發(fā)揮的作用。WANG 等［25］發(fā)現(xiàn) miR-155 在小鼠ALI 時(shí)表達(dá)增加，并通過(guò)負(fù)調(diào)控巨噬細(xì)胞中SOCS-1蛋白的表達(dá)，促進(jìn)炎癥細(xì)胞因子TNF-α、IL-6 的釋放，在脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）誘導(dǎo)的ALI小鼠模型中發(fā)揮促炎作用。在另一項(xiàng)研究中，miR-34b-5也被發(fā)現(xiàn)在肺損傷期間表達(dá)上調(diào)，miR-34b-5p抑制減弱了肺通透性、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和細(xì)胞因子水平，且靶向上調(diào)生長(zhǎng)因子proanulin（PGRN）表達(dá)，促進(jìn)創(chuàng)面愈合和減少細(xì)胞凋亡，進(jìn)而在LPS 誘導(dǎo)的ALI 中發(fā)揮保護(hù)作用，這一研究提示了miR-34b-5p參與調(diào)控ALI的病程發(fā)展［26］。

ZHU 等［27］在 LPS 誘導(dǎo)的 ALI 大鼠模型中發(fā)現(xiàn)miR-21 的表達(dá)顯著升高，Nuclear factor-κB（NF-κB）是炎性過(guò)程中關(guān)鍵性的核轉(zhuǎn)錄因子，在ALI 的早期階段促進(jìn)活化的巨噬細(xì)胞分泌產(chǎn)生各種促炎細(xì)胞因子。體外實(shí)驗(yàn)顯示miR-21 會(huì)阻礙巨噬細(xì)胞中TLR4-NF-κB通路的激活，從而負(fù)向調(diào)節(jié)LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。同樣的，SHI 等［28］觀察到 miR-21 在Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞（typeⅡalveolar epithelial cells，AECⅡ）內(nèi)高表達(dá)，且在細(xì)胞凋亡過(guò)程中明顯下調(diào)。研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)過(guò)表達(dá)miR-21-5p 可上調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)，同時(shí)下調(diào)促凋亡蛋白天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶 3（caspase-3）和 Bax 表達(dá)，減少 AECⅡ凋亡，從而減輕高氧性急性肺損傷。這些研究均證明了miR-21 在ALI 損傷中發(fā)揮保護(hù)作用。TLR4是LPS 的模式識(shí)別受體，在ALI 的動(dòng)物模型和體外細(xì)胞模型炎癥反應(yīng)的上調(diào)和炎癥細(xì)胞因子的釋放中起著非常重要的作用。JU 等［29］研究顯示miR-27a靶向負(fù)調(diào)控TLR4 蛋白水平，抑制TLR4-MyD88-NF-κB 通路激活，減弱LPS 誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞凋亡和炎癥反應(yīng)。同樣的，YANG 等［30］研究顯示在 LPS 誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞中，miR-16 與 TLR4 的 3'UTR 相互作用，下調(diào)TLR4-NF-κB 通路，抑制下游NLRP3炎癥小體激活，從而發(fā)揮改善炎癥的作用。

近年來(lái)有研究發(fā)現(xiàn)，miRNAs 可以在細(xì)胞間轉(zhuǎn)移并介導(dǎo)關(guān)鍵效應(yīng)細(xì)胞間的通訊，進(jìn)而在ALI 炎癥中發(fā)揮作用。miR-223 因其在肺部炎癥過(guò)程中介導(dǎo)肺浸潤(rùn)性多形核中性粒細(xì)胞（polymor-phonuclear neutrophils，PMNs）和肺泡上皮細(xì)胞（alveolar epithelial cells，AECs）之間的信號(hào)，受到 NEUDECKER等［31］的關(guān)注，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，miR-223 在 PMNs 中選擇性升高并在轉(zhuǎn)移到AECs 后靶向抑制PARP-1的表達(dá)，下調(diào)炎癥因子的釋放，從而起到緩解炎癥的作用。miRNAs 還可以通過(guò)外泌體分泌的方式從供體細(xì)胞轉(zhuǎn)移到受體組織，從而調(diào)節(jié)它們的生物學(xué)行為。在 WU 等［32］研究中，內(nèi)皮祖細(xì)胞（endothelial progenitor cell，EPCs）釋放的外泌體中的 miR-126 轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細(xì)胞（endothelial cells，ECs），靶向下調(diào)SPRED-1 表達(dá)，部分增強(qiáng)了RAF-ERK 信號(hào)通路，可以有效改善大鼠的肺損傷，恢復(fù)肺毛細(xì)血管的完整性，減少肺部炎癥和水腫的形成。在另一項(xiàng)研究中，間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSCs）分泌的外泌體中miR-30b-3p 轉(zhuǎn)移到AECs 后，直接靶向抑制血清淀粉樣蛋白A3（serum amyloid A3，SAA3）的表達(dá)參與 ALI［33］。總之，miRNAs 在細(xì)胞間直接傳遞或通過(guò)外泌體轉(zhuǎn)移的方式在受體組織中發(fā)揮作用，將為ALI的治療提供新的視角。

3.2 miRNAs 在炎癥性腸病中的作用 炎癥性腸?。╥nflammatory bowel disease，IBD）是一組累及胃腸道的慢性、復(fù)發(fā)性、非特異性炎癥性疾病。外界的各種刺激因素均可導(dǎo)致腸道黏膜屏障的完整性受損和通透性增加，使得病原菌易于穿過(guò)黏膜上皮屏障，造成黏膜固有免疫細(xì)胞和效應(yīng)T 細(xì)胞的異?；罨?，炎癥因子的大量產(chǎn)生以及免疫耐受機(jī)制的打破，最終導(dǎo)致腸道炎癥的發(fā)生［34］。為了更具體地研究miRNAs 在調(diào)控IBD 發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮的作用，一些研究確定了腸黏膜中功能性的miRNAs。ROJASFERIA［35］團(tuán)隊(duì)篩選比較了活動(dòng)性克羅恩病（Crohn's disease，CD）和健康對(duì)照者結(jié)腸黏膜中miRNAs 的表達(dá)差異，分析顯示 4 個(gè)miRNAs（miR-144、miR-211、miR-373-3p 和miR-519）在炎癥的黏膜中顯著上升，提示miRNAs 譜可作為活動(dòng)性CD 的生物標(biāo)志物。另外有研究也致力于比較潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）和 CD 中 miRNAs 的表達(dá)差異，利用微陣列 分 析 提 示 miRNAs（miR-19a、miR-21、miR-31、miR-101、miR-146a 和 miR-375）可作為識(shí)別和區(qū)分CD和UC的標(biāo)志物［36］。

腸黏膜局部T細(xì)胞在黏膜炎癥反應(yīng)中有重要作用，miRNAs 可以通過(guò)調(diào)控黏膜組織中T 細(xì)胞的成熟、分化、活化或其產(chǎn)生的細(xì)胞因子來(lái)影響?zhàn)つぱ装Y的發(fā)生發(fā)展。YANG 等［37］研究發(fā)現(xiàn) IBD 患者結(jié)腸黏膜中高表達(dá)的miR-425 通過(guò)下調(diào)靶基因Foxo1 導(dǎo)致Th17 細(xì)胞分化增加，活化后的Th17 細(xì)胞又產(chǎn)生多種細(xì)胞因子（IL-17、IL-12、IL-21等）、趨化因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等參與黏膜炎性反應(yīng)，從而加重TNBS 誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎。miR-125a 在IBD 患者腸道黏膜和外周血單個(gè)核細(xì)胞中低表達(dá)，主要表達(dá)于CD4+T 細(xì)胞。E26 轉(zhuǎn)化特異性-1（E26 transformationspecific 1，ETS-1）在Th1 細(xì)胞分化中是一個(gè)重要的靶點(diǎn)，在miR-125a-/-小鼠中，ETS-1 表達(dá)上調(diào)。實(shí)驗(yàn)表明miR-125a 是通過(guò)抑制ETS-1 的表達(dá)，從而抑制CD4+T 細(xì)胞向Th1 細(xì)胞的分化，在TNBS 誘導(dǎo)的小鼠腸道黏膜炎癥中起保護(hù)作用［38］。CHAO 等［39］觀察到IBD 患者外周血調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞（Treg）中 miR-155 的升高，F(xiàn)oxp3+Treg細(xì)胞中特異性過(guò)表達(dá)miR-155的小鼠表現(xiàn)出自發(fā)的自身免疫和更嚴(yán)重的DSS誘導(dǎo)的腸道損傷，CTLA-4 是一種由T 細(xì)胞表達(dá)的共抑制分子，是一種重要的免疫調(diào)節(jié)因子和炎癥抑制劑，體外實(shí)驗(yàn)表明miR-155的促炎效果是靶向抑制CTLA-4表達(dá)來(lái)介導(dǎo)的。SHI等［40］發(fā)現(xiàn) CD 患者和 UC 患者黏膜組織中升高的miR-31 通過(guò)降低IL-25 在轉(zhuǎn)錄物和蛋白質(zhì)的表達(dá)水平，增強(qiáng)Th2 反應(yīng)的同時(shí)抑制了Th1 和Th17 的細(xì)胞因子反應(yīng)。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)均顯示miR-31 抑制劑的治療降低了抗原提呈細(xì)胞中IL-12和IL-23 的水平，并且伴隨著結(jié)腸IL-25 的升高而改善了結(jié)腸炎癥。miR-31還可以調(diào)控參與T細(xì)胞成熟和極化的細(xì)胞因子——胸腺間質(zhì)淋巴生成素（thymic stromal lymphopoietin，TSLP）的表達(dá)，使其在UC中促進(jìn)黏膜愈合和調(diào)節(jié)炎癥中發(fā)揮作用，而UC 患者的淋巴細(xì)胞中表達(dá)增加的miR-31 直接靶向下調(diào)TSLP表達(dá)，加重破壞炎癥黏膜屏障的完整性［41］。

miRNAs 還可以通過(guò)激活或抑制炎癥信號(hào)通路來(lái)調(diào)控黏膜炎癥反應(yīng)。LIN 等［42］在活動(dòng)性 CD 中觀察到表達(dá)上調(diào)的miR-143 與自噬相關(guān)基因2B（autophagy-related gene 2B，ATG2B）表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，增強(qiáng)的自噬體活性能有效減輕NF-κB 介導(dǎo)的炎癥，而miR-143 靶向抑制 ATG2B 的表達(dá)，引起 NF-κB 通路異常激活，增加促炎細(xì)胞因子的水平，從而加重了CD 的炎癥反應(yīng)。同樣，UC 患者炎癥結(jié)腸組織中miR-193a-3p 的下調(diào)伴隨著PepT1（一種攝取細(xì)菌產(chǎn)物的二/三肽轉(zhuǎn)運(yùn)體）的上調(diào)，抑制NF-κB 途徑激活，減輕了 DSS 誘導(dǎo)的結(jié)腸炎［43］。GUO 等［44］研究顯示，miR-7 靶向三葉因子家族3（trefoil factor family 3，TFF3）抑制PI3K-AKT 信號(hào)通路來(lái)調(diào)節(jié)結(jié)腸細(xì)胞的增殖和遷移。抑制miR-7表達(dá)促進(jìn)杯狀細(xì)胞分泌TFF3蛋白，恢復(fù)緊密連接蛋白表達(dá)和細(xì)胞骨架重排來(lái)降低腸道通透性，對(duì)TNBS誘導(dǎo)的IBD動(dòng)物模型的腸黏膜損傷具有保護(hù)作用。

目前，在腸黏膜炎癥相關(guān)的miRNAs 中，miR-146a 和miR-155 在調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。研究顯示miR-146a 在暴露于細(xì)菌LPS 和肽聚糖以及鞭毛蛋白后誘導(dǎo)其高表達(dá)，過(guò)表達(dá)的miR-146a 降低TNF 受體相關(guān)因子（TRAF）-6 和 IL-1 受體相關(guān)激酶（IRAK）-1 的表達(dá)，因此認(rèn)為 miR-146a 在負(fù)反饋機(jī)制中起防止過(guò)度炎癥的作用［45］。與之一致的是，在ANZOLA 等［46］研究中，促炎細(xì)胞因子誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞中miR-146a表達(dá)升高，過(guò)度表達(dá)的miR-146a又誘導(dǎo)免疫耐受，抑制細(xì)胞因子MCP-1 和GROα/IL-8對(duì)LPS 或IL-1β 的反應(yīng)。然而有報(bào)道顯示高表達(dá)的miR-146a 增加了小鼠對(duì)DSS 結(jié)腸炎的易感性，腸道內(nèi)過(guò)表達(dá)的miR-146a 抑制腸屏障基因表達(dá)，還抑制固有層內(nèi)Th17 細(xì)胞和Treg 細(xì)胞的數(shù)量，miR-146a-/-小鼠通過(guò)增強(qiáng)MyD88 信號(hào)的機(jī)制增強(qiáng)了腸道內(nèi)的屏障功能［47］?？傊谀c黏膜炎癥中，miR-146a 不僅調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，而且還影響屏障功能，但miR-146a 到底發(fā)揮促炎還是抑炎的作用似乎還需要更多的研究。LI 等［48］發(fā)現(xiàn) miR-155 在 UC 中是一種強(qiáng)有力的調(diào)節(jié)因子來(lái)調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化，其缺乏可導(dǎo)致巨噬細(xì)胞M1 型轉(zhuǎn)變成M2 型，M2 在結(jié)腸中的優(yōu)勢(shì)可導(dǎo)致腸道免疫細(xì)胞增殖受抑制并抑制CD4+T細(xì)胞向Th1 和Th17 極化，從而影響IBD 的發(fā)生發(fā)展?，F(xiàn)有研究提示了miRNAs 可以通過(guò)多種途徑參與調(diào)控腸黏膜炎癥的發(fā)生發(fā)展，深入研究miRNAs 在腸黏膜炎癥中的調(diào)控機(jī)制有望為IBD靶向特異性治療及改善預(yù)后等提供新的方向。

3.3 miRNAs 在其他黏膜炎癥性疾病中的作用 除了肺和腸黏膜，miRNAs 對(duì)于其他部位的黏膜組織比如生殖道、口腔、皮膚黏膜的炎癥反應(yīng)中同樣發(fā)揮重要作用。傷口愈合是恢復(fù)皮膚完整性的一個(gè)基本的生物過(guò)程，其包括四個(gè)連續(xù)而重疊的階段：止血、炎癥、增殖和組織重構(gòu)，LI 等［49］在傷口愈合的炎癥期和增殖期，發(fā)現(xiàn)miR-31在角質(zhì)形成細(xì)胞中逐漸上調(diào)，并通過(guò)抑制其直接靶基因上皮膜蛋白1（epithelial membrane protein 1，emp1）促進(jìn)細(xì)胞增殖、遷移以及再上皮化，緩解炎癥促進(jìn)皮膚創(chuàng)面愈合，加快恢復(fù)完整的皮膚屏障。與LI 結(jié)果一致的是，SHI 等［50］的小鼠研究結(jié)果證實(shí)了 miR-31 通過(guò)直接靶向RAS/MAPK 通路的負(fù)調(diào)控因子Rasa1、Spred1、Spred2 和 Spry4 激活 RAS/MAPK 信號(hào)，促進(jìn)皮膚傷口愈合過(guò)程中的再上皮化，這為miR-31在皮膚創(chuàng)口愈合中的重要性提供了又一證據(jù)?？谇槐馄教μ\（oral lichen planus，OLP）是一種伴有基底角質(zhì)形成細(xì)胞變性的慢性炎癥性口腔黏膜疾病。miR-125b 通過(guò)PI3K/Ak/tmTOR 通路靶向負(fù)調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶2（matrix metalloproteinases 2，MMP-2）的表達(dá)，在OLP 疾病發(fā)展中抑制角質(zhì)形成細(xì)胞增殖，促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡，降低細(xì)胞癌變的可能性，這一結(jié)果提示了miR-125b是OLP 的潛在治療靶點(diǎn)［51］。ZHENG 等［52］在 OLP 患者的黏膜中發(fā)現(xiàn)骨橋蛋白（osteopontin，OPN）和 CD44 高表達(dá)，OPN 通過(guò)CD44 抑制CD8+T 細(xì)胞的凋亡，而口腔黏膜miRNA-214 靶向CD44 參與了口腔扁平苔蘚的發(fā)生發(fā)展。let-7c通過(guò)抑制LPS 誘導(dǎo) NF-κB 通路激活，調(diào)節(jié)下游促炎細(xì)胞因子的釋放，緩解上皮細(xì)胞的壞死和中性粒細(xì)胞的募集，從而減輕子宮內(nèi)膜上皮的損傷，提示let-7c對(duì)LPS刺激的子宮內(nèi)膜炎具有保護(hù)作用［53］。然而let-7c 作用的具體靶基因仍待闡明。同樣的，YIN 等［54］的研究表明 miR-19a 靶向目標(biāo)基因 TBK1減弱NF-κB信號(hào)通路的激活，減輕LPS誘導(dǎo)的炎癥。因此認(rèn)為miR-19a可能作為治療子宮內(nèi)膜炎的靶點(diǎn)。

4 總結(jié)與展望

本綜述強(qiáng)調(diào)了miRNAs 在維持黏膜屏障功能和調(diào)節(jié)黏膜炎癥過(guò)程中的作用，從體外和體內(nèi)研究中揭示了miRNAs 在急性或慢性黏膜疾病中的調(diào)控機(jī)制。當(dāng)前miRNAs 的研究發(fā)展迅速，獲得了重要的研究進(jìn)展，但miRNA 研究仍處于早期階段，無(wú)論是在實(shí)驗(yàn)室研究還是面向臨床應(yīng)用時(shí)，許多現(xiàn)實(shí)問題和技術(shù)性瓶頸仍有待解決。例如：①miRNA 制備過(guò)程中數(shù)量和質(zhì)量的不穩(wěn)定性，不同部位不同方法提取所得到的 RNA 質(zhì)量不同［55］；②每個(gè) miRNA 可預(yù)測(cè)出成百上千個(gè)可能作用的靶基因，使得辨別miRNA靶點(diǎn)和驗(yàn)證 miRNA 生物功能頗具復(fù)雜性［56］；③miRNA 調(diào)節(jié)藥物的特異性和失靶作用；④miRNA 治療藥物的劑量考慮；⑤miRNA 對(duì)藥物個(gè)體化治療差異的影響等等。

綜上所述，miRNAs 在疾病調(diào)控中表現(xiàn)出巨大潛力，盡管miRNAs 治療仍存有諸多局限，但未來(lái)的研究將揭示miRNAs 在調(diào)控疾病中的更多細(xì)節(jié)，使得miRNAs 有可能成為預(yù)防、檢測(cè)、治療、監(jiān)控、診斷疾病以及判斷疾病預(yù)后的靶點(diǎn)，并為臨床藥物相互作用提供新的思路。未來(lái)的研究挑戰(zhàn)在于將這些知識(shí)轉(zhuǎn)化為成功的臨床治療，使得miRNAs 治療成為最具潛力的新醫(yī)療方案。