王 俊，聞曉波，冉旭華

輪狀病毒(rotavirus, RV)屬于呼腸孤病毒科、輪狀病毒屬成員，是引起嬰幼兒及幼齡動物輪狀病毒性腹瀉的主要病原體[1]，臨床癥狀為嘔吐、腹瀉、脫水，嚴(yán)重的可造成死亡。輪狀病毒在全球感染廣泛，據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球每年超過20萬嬰幼兒、兒童死于輪狀病毒感染相關(guān)性疾病，其中在發(fā)展中國家5歲以下兒童死亡人數(shù)占總死亡數(shù)的85%，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)和社會負(fù)擔(dān)[2]。目前尚無特效藥物對輪狀病毒性腹瀉進(jìn)行治療，只能通過疫苗進(jìn)行預(yù)防。因此，研發(fā)安全、高效的疫苗對預(yù)防和控制輪狀病毒性疾病的發(fā)生以及降低經(jīng)濟(jì)損失具有重要意義。本文根據(jù)目前各國學(xué)者的研究結(jié)果對國內(nèi)外輪狀病毒疫苗的研究現(xiàn)狀做一綜述，為輪狀病毒疫苗研發(fā)相關(guān)工作提供一定的參考。

1 輪狀病毒概況

輪狀病毒為二十面體對稱的雙鏈RNA病毒，直徑約70 nm，無囊膜，完整的具有感染性的病毒粒子為三層衣殼結(jié)構(gòu)，其中最內(nèi)層衣殼由VP1、VP2、VP3蛋白構(gòu)成，中間層由VP6構(gòu)成，最外層由VP4、VP7構(gòu)成。輪狀病毒基因組約為18 555 bp，由11個節(jié)段組成，編碼6種結(jié)構(gòu)蛋白和5種或6種非結(jié)構(gòu)蛋白(VP1～VP4，VP6，VP7，NSP1～NSP5或NSP6)[3-4]。其中結(jié)構(gòu)蛋白VP4為纖突蛋白，具有黏附細(xì)胞的功能，在富含胰蛋白酶的腸道環(huán)境中可裂解為VP5*和VP8*；VP7糖蛋白為主要的中和抗原，具有CTL識別的抗原決定簇，同時(shí)能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞膜Ca2+濃度，改變細(xì)胞膜通透性。VP6可刺激機(jī)體產(chǎn)生IgA，IgA與多聚免疫球蛋白受體結(jié)合并轉(zhuǎn)運(yùn)至腸腔，轉(zhuǎn)運(yùn)中與雙層病毒顆粒結(jié)合抑制輪狀病毒的轉(zhuǎn)錄和復(fù)制，也為輪狀病毒候選疫苗的研究提供了方向。

輪狀病毒根據(jù)血清學(xué)分類方法，可將已鑒定出的輪狀病毒毒株可分為A～J 10個群，引起嬰幼兒和幼齡動物腹瀉主要為A群[5-7]。外衣殼蛋白VP4、VP7與中和抗體的反應(yīng)性決定了輪狀病毒的血清型，根據(jù)外衣殼蛋白VP4、VP7的抗原性，又可將A群輪狀病毒分為P血清型(protease sensitive)和G血清型(glycoprotein)[8-9]。最新研究表明，目前已鑒定出可感染人和動物的血清型中，有32種G血清型和47種P血清型[10]。

2 輪狀病毒現(xiàn)有疫苗概況

鑒于輪狀病毒的高發(fā)病率和高死亡率，世界衛(wèi)生組織(WHO)建議接種輪狀病毒疫苗來預(yù)防輪狀病毒性腹瀉。目前使用的輪狀病毒疫苗主要有：Rotarix、RotaTeq、Rotavac、ROTASIIL、Rotavin-M1、LLR。其中前4種已通過WHO的使用資格預(yù)審。截至2018年底，全球已有92個國家將Rotarix或RotaTeq輪狀病毒疫苗納入其國家免疫計(jì)劃，另有6個國家分階段或在個別地區(qū)實(shí)施了疫苗免疫計(jì)劃。另外，在國家免疫計(jì)劃中，74個國家選擇Rotarix單價(jià)疫苗，14個國家使用RotaTeq五價(jià)疫苗；9個國家同時(shí)使用Rotarix和RotaTeq[11-12]。隨著研究的不斷深入，輪狀病毒疫苗種類也開始逐漸增加，出現(xiàn)了如非復(fù)制型的新型疫苗，但此類疫苗正處于臨床試驗(yàn)階段，未真正投入市場。

2.1Rotashield 四價(jià)基因重配苗Rotashield是最早用于預(yù)防人輪狀病毒性腹瀉的疫苗，該疫苗由恒河猴輪狀病毒(RRV, G3血清型)與恒河猴-人輪狀病毒重配株(G1、G2、G4血清型)組成[13]，1998年在美國上市。相關(guān)試驗(yàn)表明，該疫苗對重癥輪狀病毒性腹瀉保護(hù)率為69%～90%，對所有輪狀病毒性腹瀉保護(hù)率為49%～68%，但該疫苗在使用中發(fā)現(xiàn)與腸套疊等安全性問題存在相關(guān)性，于1999年被召回[14]。至此，人輪狀病毒疫苗出現(xiàn)了多年空窗期。

2.2Rotarix Rotarix是比利時(shí)葛蘭素-史克(GlaxoSmithKline, GSK)公司研制的口服減毒活疫苗，Rotarix的毒株為RIX444(G1P[8])，經(jīng)89-12親代株傳代而來，用于預(yù)防6～24周齡嬰兒輪狀病毒引起的腹瀉[15-16]。免疫接種劑量為2劑，每劑間隔4周。該疫苗2005年在墨西哥上市并于2009年通過WHO的資格預(yù)審。

Malakalinga等[17]相關(guān)研究表明，坦桑尼亞5歲以下兒童接種Rotarix輪狀病毒疫苗后，輪狀病毒性腹瀉死亡率從2008年的72%下降到2013年的36%。相關(guān)研究表明，受營養(yǎng)水平、腸道菌群、微量元素、母源抗體水平、遺傳因素等因素影響[18]，該疫苗在發(fā)展中國家和發(fā)達(dá)國家的免疫效果也大有不同，在發(fā)達(dá)國家免疫效果較高，但在一些中等收入和低收入國家，疫苗的免疫效果較差。

Rotarix在使用中，也出現(xiàn)了問題。2010年Victoria等[19]在接種疫苗后嬰兒的糞便中檢測到了豬圓環(huán)病毒(porcine circovirus, PCV)1型DNA片段，盡管后續(xù)的研究中證實(shí)，Rotarix中污染的PCV-1，只是疫苗生產(chǎn)中的質(zhì)量控制偶然事件，對免疫接種兒童不會造成嚴(yán)重的安全風(fēng)險(xiǎn)[20]，但是還是有必要進(jìn)一步研究確認(rèn)該疫苗潛在的安全性問題。

2.3RotaTeq RotaTeq是美國默克(Merck)公司開發(fā)于2006年上市，于2008年通過WHO資格預(yù)審的口服五價(jià)人-牛重配輪狀病毒減毒活疫苗[21]。用于預(yù)防6～32周齡嬰兒輪狀病毒引起的腹瀉，免疫接種劑量為3劑。

RotaTeq以牛輪狀病毒W(wǎng)C3株為基礎(chǔ)，通過基因重配，將人輪狀病毒毒株中編碼VP4和VP7的基因替代原毒株相應(yīng)基因得到[22-23]。Sanneh等[24]對岡比亞人群使用RotaTeq疫苗前后輪狀病毒發(fā)病率進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)輪狀病毒發(fā)病率從2013年的22%下降到2015年的11%；對于臨床癥狀嚴(yán)重的患者，輪狀病毒發(fā)病率從2013年的33%下降到2015年的8%。2019年Mo等[25]對4 040名6～12周中國嬰兒進(jìn)行了III期臨床研究，發(fā)現(xiàn)疫苗組的抗輪狀病毒IgA的幾何平均滴度和血清反應(yīng)率高于對照組，并且RotaTeq和三價(jià)口服脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗(tOPV)[26]和無細(xì)胞百日咳疫苗(DTaP)[27]同時(shí)使用時(shí)，RotaTeq對其他疫苗的免疫應(yīng)答無影響。與Rotarix相似，RotaTeq的疫苗保護(hù)率存在著地區(qū)差異，對不同血清型和不同病情程度的輪狀病毒性腹瀉保護(hù)率也有所差異。大量的臨床試驗(yàn)證實(shí)，RotaTeq疫苗的免疫效力似乎與國家經(jīng)濟(jì)水平呈現(xiàn)一定的相關(guān)性，例如，該疫苗在發(fā)達(dá)國家具有較高的免疫效力[28-30]；然而在低收入國家，如非洲、東南亞等國家，該疫苗的免疫效力甚至低于50%[31-32]。

2010—2012年對該疫苗的監(jiān)測中，Roy等[33]、Bucardo等[34]在嬰兒糞便中提取的RV A毒株中發(fā)現(xiàn)了RotaTeq衍生的NSP2基因，這表明RotaTeq疫苗株與流行野毒株之間進(jìn)行了重組。2009年Laserson等[35]對RotaTeq在免疫缺陷人群中的安全性進(jìn)行了評估，37名HIV感染的嬰兒中，5/21名(23.8%)疫苗接種者和2/16名(12.5%)安慰劑接種者出現(xiàn)了嚴(yán)重不良反應(yīng)。疫苗組死亡8例，其中2例與輪狀病毒性胃腸炎有關(guān)；對照組死亡4例中3例與輪狀病毒性胃腸炎有關(guān)，但疫苗組不良反應(yīng)發(fā)生率與對照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。然而此次評估中，免疫缺陷人群數(shù)量較少，不能全面評估疫苗對免疫缺陷人群的安全性。

2.4Rotavac Rotavac是由印度Bharat公司研制的一種單價(jià)液體冷凍減毒活疫苗。Rotavac應(yīng)在嬰兒6周齡時(shí)開始口服免疫，共3劑，每劑間隔4周。Rotavac是一種獨(dú)特的輪狀病毒疫苗配方，無需緩沖即可使用。它可以在2 ℃～8 ℃下保存24個月。該疫苗在2014年上市，并于2018年通過WHO的資格預(yù)審，這也是繼Rotarix、RotaTeq通過資格預(yù)審后的10年內(nèi)新一代通過資格預(yù)審的疫苗，目前只在印度和巴基斯坦使用，隨著研究不斷深入，相信不久能夠全球推廣。

Bhandari等[36]一項(xiàng)臨床試驗(yàn)對該疫苗的有效性進(jìn)行了評估，在免疫接種第1年里，疫苗的有效率為56.4%，第2年疫苗的有效率為49%。2020年，Bhandari等[37]對印度嬰兒接種Rotavac后出現(xiàn)腸套疊的風(fēng)險(xiǎn)評估發(fā)現(xiàn)，腸套疊在第1次免疫和第2次免疫后21天內(nèi)的相對發(fā)病率(風(fēng)險(xiǎn)期發(fā)病率與對照之比)為1.56，在第3次免疫后的相對發(fā)病率為1.88，接種疫苗并沒有增加腸套疊風(fēng)險(xiǎn)。一系列的試驗(yàn)和監(jiān)測表明，該疫苗在嬰兒中安全有效，并且和其他輪狀病毒活疫苗無明顯差異，能夠安全有效地與其他嬰兒疫苗同時(shí)使用，不會干擾其他疫苗的免疫應(yīng)答，有望成為下一個全球使用的疫苗。然而，對于該疫苗潛在的安全性問題，目前只有少數(shù)腸套疊的報(bào)道，沒有足夠證據(jù)來評估其與腸套疊的相關(guān)性，不能準(zhǔn)確判斷其風(fēng)險(xiǎn)，仍然需要大量試驗(yàn)來進(jìn)一步的評估和監(jiān)測。疫苗目前采用的是冷鏈運(yùn)輸和儲存，這一過程涉及儲存、運(yùn)輸、配送等各種物流問題，而由于疫苗儲存和運(yùn)輸設(shè)施的不足，會造成疫苗的大量浪費(fèi)，使疫苗的成本大幅上升。因此國家在推廣疫苗時(shí)，不僅要考慮疫苗成本，還需考慮冷藏設(shè)施的運(yùn)輸成本和相關(guān)人員服務(wù)費(fèi)用，尤其是在農(nóng)村地區(qū)受電力供應(yīng)影響情況下的成本。

2.5ROTASIIL ROTASIIL是印度血清研究所研制的牛-人輪狀病毒五價(jià)減毒活疫苗，其血清型包含G1，G2，G3，G4和G9。ROTASIIL為凍干粉劑，可在37 ℃穩(wěn)定保存18個月，并且能夠短期暴露于55 ℃的環(huán)境中，使用方便，只需在口服之前添加檸檬酸-碳酸氫鹽緩沖液[38]。該疫苗免疫方法與Rotavac相同，6周齡時(shí)開始首免，共3劑，每劑間隔4周。ROTASIIL在2018年通過WHO的資格預(yù)審，目前只在印度使用。

兩項(xiàng)III期臨床試驗(yàn)對ROTASIIL的有效性進(jìn)行了評估。在印度，該疫苗對重癥輪狀病毒性腹瀉保護(hù)率為54.7%～60.5%，對所有輪狀病毒性腹瀉保護(hù)率為36%～39.5%。在尼日爾，針對重癥輪狀病毒性腹瀉，疫苗的保護(hù)率為67%，與對照組相比，疫苗組的不良事件發(fā)生率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異[39-40]。因此，ROTASIIL是一種安全有效的疫苗。由于ROTASIIL使用的局限性，目前不能準(zhǔn)確判斷其潛在風(fēng)險(xiǎn)，不同地區(qū)存在不同的檢測結(jié)果，仍需大量試驗(yàn)表明其真正安全有效，才能商品化銷售。由于該疫苗是一種減毒活疫苗，所以維持抗原的生物學(xué)結(jié)構(gòu)是疫苗免疫的關(guān)鍵。冷凍干燥能夠保持抗原的結(jié)構(gòu)和性狀，防止疫苗成分之間不必要的化學(xué)反應(yīng)，并根據(jù)儲存溫度延長保存期，但是凍干會破壞疫苗的穩(wěn)定性，使約40%的病毒失去活性[41]。檸檬酸-碳酸氫鹽緩沖液的加入能維持pH，提高抗原蛋白的緩沖密度，從而形成分子間氫鍵，在凍干的過程中維持抗原的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。但是這一進(jìn)展并未改善冷鏈儲存和運(yùn)輸方面的問題。

2.6Rotavin-M1 Rotavin-M1是越南研究人員從一名兒童身上分離的G1P[8]株制成的冷凍減毒活疫苗，Rotavin-M1在6周齡開始口服免疫，共2劑，每劑間隔30 d。該疫苗在2012年上市，目前只允許在越南使用。

2012年Dang等[42]對該疫苗安全性和免疫原性進(jìn)行了評估。在嬰兒中，輪狀病毒IgA血清轉(zhuǎn)化率高達(dá)73%，并且Rotavin-M1不會導(dǎo)致發(fā)熱、腹瀉、嘔吐或過敏的幾率增加，表明該疫苗對越南嬰兒安全性和免疫原性較好。然而，該疫苗是否存在腸套疊等風(fēng)險(xiǎn)，目前沒有相關(guān)試驗(yàn)的報(bào)道，沒有足夠的證據(jù)來評估其與腸套疊的相關(guān)性。

2.7LLR 蘭州羔羊輪狀病毒疫苗(LLR)是蘭州生物制品所研制的單價(jià)減毒活疫苗，其采用1985年首次分離的羔羊輪狀病毒株G10P[12]接種新生牛腎細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)、收取病毒液、加穩(wěn)定劑后制成，為粉紅色液體。LLR疫苗在嬰幼兒2個月至3歲時(shí)服用，每年1次。該疫苗2001年在中國上市，目前只批準(zhǔn)在中國使用。

由于缺乏III期臨床試驗(yàn)，不同時(shí)間段和不同地區(qū)的病例對照研究估計(jì)了疫苗的有效性。研究表明不同時(shí)間段和地區(qū)產(chǎn)生的疫苗有效性從35%到77%不等[43]。2020年Xia等[44]對該疫苗的安全性和免疫原性進(jìn)行了評估。對于6至13周的中國嬰兒，疫苗對任何程度的輪狀病毒性腹瀉、重癥輪狀病毒性腹瀉和任何血清型所致的住院患兒的有效率分別為56.6%、70.3%和74.0%。并且疫苗組的抗輪狀病毒IgA的幾何平均滴度和血清反應(yīng)率明顯高于對照組。由于LLR疫苗的免疫效力、安全性只適用于中國，并且各項(xiàng)保護(hù)效力評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)不同，導(dǎo)致各數(shù)據(jù)間無法比較，進(jìn)而限制了該疫苗的推廣使用。

3 輪狀病毒候選疫苗概況

使用減毒活疫苗在預(yù)防病毒性疾病時(shí)存在一定的風(fēng)險(xiǎn)因素，迫切需要一種安全、有效、質(zhì)量可控、易于免疫識別的新型疫苗。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步以及人們對輪狀病毒的重視，極大促進(jìn)了輪狀病毒疫苗的研發(fā)進(jìn)度，開始出現(xiàn)不同類型的新型疫苗。其中認(rèn)為最具有發(fā)展前景的是非復(fù)制型疫苗。

3.1RV3-BB單價(jià)活疫苗 RV3-BB是以自然減毒的新生兒G3P[6]輪狀病毒株為基礎(chǔ)研發(fā)的口服疫苗。Bines等[45]在印度尼西亞的一項(xiàng)臨床試驗(yàn)中評估了RV3-BB的有效性。免疫接種后，新生兒組疫苗的有效率為94%，嬰兒組疫苗的有效率為77%，兩組均檢測到免疫應(yīng)答反應(yīng)，且兩組疫苗耐受性良好，說明RV3-BB具有預(yù)防輪狀病毒性腹瀉的疫苗應(yīng)用前景。同時(shí)進(jìn)一步試驗(yàn)表明RV3-BB與OPV聯(lián)合使用時(shí)不會降低任何一種疫苗的免疫原性。該疫苗是目前發(fā)展最快的候選疫苗。

3.2多價(jià)人-牛重配疫苗 多價(jià)人-牛重配疫苗是在四價(jià)基礎(chǔ)上將人輪狀病毒6種血清型的VP7基因替換牛輪狀病毒UK毒株相應(yīng)基因研制出的一種六價(jià)重配疫苗[46-47]。四價(jià)重配苗(BRV-TV)具有反應(yīng)性低、效率高的特點(diǎn)，兩劑BRV-TV疫苗足以誘導(dǎo)對重癥輪狀病毒性腹瀉的保護(hù)，且接種后無明顯發(fā)熱反應(yīng)，相信六價(jià)疫苗的保護(hù)效力更好，安全性更高，是一種很有前途的輪狀病毒候選疫苗，目前已完成Ⅲ期臨床試驗(yàn)人員的招募。

3.3病毒樣顆粒疫苗 病毒樣顆粒(Virus-like particles, VLPs)是一種基因工程亞單位疫苗，由一種或多種病毒的衣殼蛋白組成，與天然病毒有相似的空間構(gòu)象，但不包含遺傳物質(zhì)，目前廣泛應(yīng)用于疫苗、基因治療、藥物載體和材料科學(xué)等方面[48]。

1987年Estes等[49]利用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)合成輪狀病毒主要衣殼抗原，拉開了研究輪狀病毒樣顆粒疫苗的帷幕。Fromantin等[50]利用表達(dá)VP2和VP6的重組桿狀病毒共感染昆蟲細(xì)胞，成功制備出輪狀病毒2/6-VLP，經(jīng)鼻免疫小鼠后可引起高血清抗體反應(yīng)。Shuttleworth等[51]利用重組桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)把兩種輪狀病毒衣殼蛋白(猿猴VP2和小鼠VP6)自組裝成VLP 2/6，小鼠腹腔注射后可引起強(qiáng)烈的免疫應(yīng)答。另外，口服VLP 2/6可不依賴佐劑，進(jìn)一步證明VLP 2/6是一種有效的免疫原。Istrate等[52]將RF 8-2/6/7-VLP與輪狀病毒VP8蛋白融合到截短的VP2氨基端制備出RF 8-2/6/7輪狀病毒樣顆粒，小鼠肌肉注射后可誘導(dǎo)輪狀病毒特異性血清IgG和IgA。Siadat-Pajouh等[53]利用桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)制備出輪狀病毒2/6病毒樣顆粒(2/6-VLPs)，小鼠經(jīng)口或鼻腔免疫后均可產(chǎn)生IgA、IgM和IgG。Molinari等人在果蠅幼蟲體內(nèi)合成了RV2/6 VLP，大大降低了生產(chǎn)成本。Rodríguez-Limas等人首次利用酵母作為表達(dá)系統(tǒng)，通過采用不同分子和工藝來生產(chǎn)具有復(fù)雜結(jié)構(gòu)的RV病毒樣顆粒[54]。2016年由諾如病毒樣顆粒和桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)產(chǎn)生的重組RV VP6蛋白組成聯(lián)合疫苗，用于兒童急性輪狀病毒性腹瀉。相關(guān)試驗(yàn)表明，這兩種成分均能誘導(dǎo)強(qiáng)烈的免疫應(yīng)答，并且RV VP6蛋白在體內(nèi)對諾如病毒特異性抗體反應(yīng)具有免疫佐劑作用，并在體外促進(jìn)抗原提呈細(xì)胞的激活和成熟[55-58]，使得該疫苗達(dá)到一舉兩得的效果。但該疫苗只在小鼠、家兔和豬模型中評估了其免疫原性、有效性和安全性，尚未進(jìn)行人體試驗(yàn)。

3.4P2-VP8-P[8]重組亞單位疫苗 P2-VP8-P[8]由截短的RV VP8*(P[8])蛋白融合破傷風(fēng)毒素的P2 CD4+表位重組表達(dá)的一種非復(fù)制型輪狀病毒疫苗[59-60]。2016年Groome等[61]評估了不同劑量的P2-VP8-P[8]亞單位輪狀病毒疫苗的安全性和免疫原性。在528名嬰兒中，實(shí)驗(yàn)組(99%～100%)抗P2-VP8 IgG血清對P[4]、P[6]和P[8]抗原的應(yīng)答均高于安慰劑組(10%～29%)，P2-VP8-P[8]疫苗在嬰兒中具有良好的耐受性和免疫原性，接種疫苗的嬰兒表現(xiàn)出較強(qiáng)的IgG反應(yīng)，為欠發(fā)達(dá)地區(qū)提供了一個輪狀病毒候選疫苗，解決口服疫苗在這些地區(qū)免疫效力低的問題。更重要的是，P2-VP8-P[8]亞單位疫苗可以與其他常規(guī)嬰幼兒計(jì)劃免疫疫苗，如DTP、IPV、HBV等制備成聯(lián)合疫苗，簡化免疫程序、減少注射次數(shù)。

3.5滅活輪狀病毒疫苗(IRV) IRV是一種腸外給藥的滅活輪狀病毒疫苗，該候選疫苗基于G1P[8]毒株，已在小鼠、大鼠、兔和豬模型中試驗(yàn)，顯示出較好的免疫效果和保護(hù)作用。在進(jìn)行注射或微針貼片給藥后，小鼠除了產(chǎn)生強(qiáng)烈的血清抗體外，還可誘導(dǎo)腸黏膜免疫[62-64]，是實(shí)現(xiàn)輪狀病毒全球免疫最有希望的候選疫苗。

3.6輪狀病毒反向遺傳系統(tǒng) 2017年，Kanai等[65-66]研發(fā)了完全基于質(zhì)粒的輪狀病毒反向遺傳系統(tǒng)，并不斷優(yōu)化，開始在結(jié)構(gòu)功能、病毒復(fù)制研究和抗病毒藥物的篩選中進(jìn)行探索。將人輪狀病毒基因組拯救出活病毒，與輪狀病毒基因融合構(gòu)建外源基因表達(dá)，獲得一種安全的減毒重組輪狀病毒，在實(shí)驗(yàn)中可以對該系統(tǒng)進(jìn)行嚴(yán)格控制，為開發(fā)下一代安全的輪狀病毒疫苗提供了條件。然而，該系統(tǒng)的工作機(jī)制仍不清楚，評估這些方法取得成功的潛力還為時(shí)尚早。

4 展望和結(jié)論

近年來對輪狀病毒的研究已經(jīng)取得了一定進(jìn)展，但是輪狀病毒的血清型亦不斷增加；在疫苗研發(fā)方面也處于快速發(fā)展時(shí)期?；谝呙绨踩约爸圃斐杀究紤]，近年來研究人員逐漸開始轉(zhuǎn)向非復(fù)制型疫苗，但非復(fù)制型疫苗也存在不足，需要進(jìn)一步優(yōu)化生產(chǎn)工藝，以改善其免疫保護(hù)水平，并在將來替代傳統(tǒng)的減毒活疫苗。隨著研究的深入，相信在不久的將來輪狀病毒疫苗開發(fā)技術(shù)會更加成熟，新型疫苗也將更安全、高效、價(jià)廉。

利益沖突：無