秦凱煒 陶艷霞 王家瑞

重慶市開州區(qū)人民醫(yī)院皮膚燒傷科，重慶 405400

慢性自發(fā)性蕁麻疹（chronic spontaneous urticaria，CSU）是一種皮膚科常見的慢性疾病，也稱為慢性特發(fā)性蕁麻疹，臨床主要特點(diǎn)是自發(fā)性發(fā)生的風(fēng)團(tuán)，伴有劇烈瘙癢，沒有明顯的刺激，發(fā)病時(shí)間通常超過6 周[1-2]。CSU 的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，可能的原因包括急性或慢性感染，對(duì)食物、藥物或昆蟲叮咬的過敏反應(yīng)或自身免疫性反應(yīng)[3]。近年來有研究發(fā)現(xiàn)[4]，細(xì)胞免疫失衡與CSU 密切相關(guān)，CD4+T 細(xì)胞被分為Th1 細(xì)胞、Th2 細(xì)胞、Th17 細(xì)胞以及Treg 細(xì)胞4 種亞型。有研究認(rèn)為Th17 細(xì)胞與Treg 細(xì)胞的比例失衡是可能導(dǎo)致慢性蕁麻疹發(fā)病的重要原因[5]。Treg 細(xì)胞可以通過合成細(xì)胞因子白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-35 和轉(zhuǎn)化生長因子β1（transforming growth factor β1，TGF-β1）進(jìn)行調(diào)節(jié)免疫耐受，并且在炎癥平衡中發(fā)揮作用[6]。Th17細(xì)胞分泌的IL-17 能夠誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞分泌IL-6、IL-8 等炎癥因子從而抑制炎癥反應(yīng)，形成炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)[7]。本研究通過檢測CSU 患者血清IL-35、IL-17 和TGF-β1 水平，旨在探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2016 年1 月—2019 年1 月重慶市開州區(qū)人民醫(yī)院（以下簡稱“我院”）收治的CSU 患者350 例為研究對(duì)象，將其作為病例組，其男192 例，女158 例；年齡31～61 歲，平均（37.6±8.5）歲。另選取我院健康體檢者60 名作為對(duì)照組，其中男35 名，女25 名；年齡30～59 歲，平均（36.9±8.6）歲，兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05），具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《蕁麻疹治療指南（2014 版）》的診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]；②病程＞8 周，每周至少發(fā)作2 次。排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料不全者；②伴有嚴(yán)重感染或合并嚴(yán)重肝臟、腎臟及心臟疾?。虎燮渌愋偷氖n麻疹；④近期服用免疫抑制劑、抗組胺類以及糖皮質(zhì)激素等藥物。所有研究對(duì)象及家屬均知情同意，且經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 CSU 病情嚴(yán)重程度評(píng)分

依據(jù)蕁麻疹活動(dòng)評(píng)分（urticaria activity score，UAS）[9]，每項(xiàng)0～3 分，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：0 分為無風(fēng)團(tuán)無瘙癢；1 分為風(fēng)團(tuán)數(shù)量<20 個(gè)，伴輕度瘙癢；2 分為風(fēng)團(tuán)數(shù)量20～50 個(gè)，瘙癢明顯但不影響日?；顒?dòng)和睡眠；3 分為風(fēng)團(tuán)數(shù)量>50 個(gè)，瘙癢明顯，日常活動(dòng)和睡眠受到影響。將各項(xiàng)評(píng)分相加，依據(jù)分?jǐn)?shù)分組，≤2 分為輕度組142 例，3～4 分為中度組124 例，≥5 分為重度組84 例。

1.3 觀察指標(biāo)與檢測方法

檢測患者及健康體檢者血清IL-35、IL-17 和TGFβ1 水平，采集患者清晨空腹靜脈血3 mL 于真空采血管中，離心半徑10 cm，3000 r/min 離心15 min，收集上清液用于檢測。試劑盒均購自美國RAPIDBIO 公司（批號(hào)：20151016、20150721、20151204），采用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）檢測IL-35、IL-17 和TGF-β1 水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較采用t 檢驗(yàn)，多組比較采用單因素方差分析進(jìn)行，兩兩比較采用LSD-t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。運(yùn)用Pearson 進(jìn)行相關(guān)性分析。以P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清IL-35、IL-17 和TGF-β1 水平比較

病例組血清IL-35 水平顯著低于對(duì)照組，IL-17、TGF-β1 水平顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P ＜0.05）。見表1。

表1 兩組血清IL-35、IL-17 和TGF-β1 水平比較（ng/mL，）

表1 兩組血清IL-35、IL-17 和TGF-β1 水平比較（ng/mL，）

注：IL：白細(xì)胞介素；TGF-β1：轉(zhuǎn)化生長因子β1

2.2 不同病情患者血清IL-35、IL-17 和TGF-β1 的比較

重度組血清IL-35 水平低于中度組、輕度組，且中度組低于輕度組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P ＜0.05）；重度組血清IL-17、TGF-β1 水平高于中度組和輕度組，且中度組亦高于輕度組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P ＜0.05）。見表2。

表2 不同病情患者血清IL-35、IL-17 和TGF-β1 的比較（ng/mL，）

表2 不同病情患者血清IL-35、IL-17 和TGF-β1 的比較（ng/mL，）

注：與輕度組比較，*P ＜0.05；與中度組比較，#P ＜0.05。IL：白細(xì)胞介素；TGF-β1：轉(zhuǎn)化生長因子β1

2.3 患者血清IL-35、IL-17 和TGF-β1 與病情程度的相關(guān)性

Pearson 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，CSU 患者血清IL-35水平與UAS 評(píng)分呈負(fù)相關(guān)（r=-0.687，P=0.029），而血清IL-17 與TGF-β1 水平和UAS 評(píng)分均呈正相關(guān)（r=0.684、0.709，P=0.028、0.022）。

3 討論

CSU 是一種復(fù)雜的變態(tài)性皮膚疾病，其特征是由于已知或未知原因造成的反復(fù)發(fā)癢的風(fēng)疹和/或血管性水腫，由于反復(fù)發(fā)作、病情遷延，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，并給患者家庭帶來巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[10-11]。當(dāng)前臨床CSU 發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，可能與患者自身免疫能力、自身過敏源等原因有關(guān)。既往研究普遍認(rèn)同免疫球蛋白E（immunoglobulin E，IgE）與受體結(jié)合激活肥大細(xì)胞脫顆粒，使其釋放組胺及其他血管活性介質(zhì)是CSU 發(fā)病的直接原因[12-13]。因此通過探究CSU 患者發(fā)病機(jī)制過程去選擇合適的血清標(biāo)志物以輔助臨床評(píng)估CSU 病變程度，對(duì)診治及改善預(yù)后具有積極意義。

輔助性T 細(xì)胞在人體細(xì)胞免疫機(jī)制調(diào)節(jié)中具有重要的作用，主要分為Th1、Th2、Th17 和Treg 細(xì)胞[14]。有報(bào)道稱，CSU 患者外周血Th1/Th2 細(xì)胞存在比例不均衡的情況，且以Th2 細(xì)胞比例升高為主，Th2 細(xì)胞主要通過調(diào)節(jié)B 淋巴細(xì)胞的表達(dá)參與CSU 發(fā)病，并使血清IgE 水平異常升高，加重致敏過程[15]。亦有研究發(fā)現(xiàn)，Th17/Treg 細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子相互拮抗形成動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，Th17/Treg 細(xì)胞水平失衡與CSU 患者密切相關(guān)，Treg 主要分泌IL-35 和TGF-β，其中IL-35 可調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能，具有促進(jìn)Treg 細(xì)胞擴(kuò)增和Th1 細(xì)胞分化、抑制Th17 細(xì)胞產(chǎn)生的作用，是體內(nèi)發(fā)揮免疫抑制作用的重要因子[16-17]。當(dāng)細(xì)胞Treg 數(shù)目減少或功能降低可誘發(fā)自身免疫性疾病。TGF-β1 是由浸潤細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等多種實(shí)質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的一種具有多種生物學(xué)功能的細(xì)胞因子，可調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長、分化和凋亡，亦可調(diào)節(jié)Th17 細(xì)胞或Treg 細(xì)胞譜系分化[18]。當(dāng)TGF-β1 表達(dá)降低時(shí)Th17 細(xì)胞分泌增加，還可以誘導(dǎo)肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等炎癥細(xì)胞趨化加重炎癥反應(yīng)。當(dāng)TGF-β1高表達(dá)時(shí)，可以促進(jìn)Treg 細(xì)胞分化及功能激活，同時(shí)抑制炎癥細(xì)胞增殖，發(fā)揮免疫抑制及抗炎作用[19-20]。IL-17 是由Th17 細(xì)胞合成并分泌的新型細(xì)胞因子，是常見促炎因子、具有較強(qiáng)的生物學(xué)功能，介導(dǎo)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、哮喘等自身免疫疾病的發(fā)病[21-22]。

本研究結(jié)果顯示，CSU 患者血清IL-35 水平顯著低于對(duì)照組，且重度組血清IL-35 水平低于中度組、輕度組，中度組低于輕度組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P ＜0.05）；而IL-17、TGF－β1 水平顯著高于對(duì)照組，且重度組血清IL-17、TGF-β1 水平高于中度組和輕度組，中度組亦高于輕度組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P ＜0.05），提示血清IL-35、IL-17、TGF-β1 水平可能參與CSU 的發(fā)病過程。分析原因，CSU 患者炎癥反應(yīng)嚴(yán)重，機(jī)體免疫功能受到嚴(yán)重?fù)p傷，Th1 介導(dǎo)的細(xì)胞免疫作用減弱，Th2 細(xì)胞介導(dǎo)B 淋巴細(xì)胞分泌IgE 發(fā)揮體液免疫增強(qiáng)，進(jìn)而變態(tài)反應(yīng)增強(qiáng)加重病情[12,23]。Treg 細(xì)胞表達(dá)降低導(dǎo)致IL-35 分泌減少，使其抑制致炎T 淋巴細(xì)胞活性減弱，Th1、Th17 等致炎T 淋巴細(xì)胞活性增強(qiáng)，分泌炎癥因子、免疫因子等增多，導(dǎo)致免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)增強(qiáng)，患者病情加重，Th17 細(xì)胞活性增強(qiáng)，IL-17 分泌增加，IL-17 水平升高，其作為炎癥啟動(dòng)因子，可通過誘導(dǎo)其他炎癥因子來促進(jìn)中性粒細(xì)胞增殖、遷移，激活炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)，加重患者病情[24]。除此之外，CSU 患者病變加重，Treg 細(xì)胞表達(dá)降低，分泌TGFβ1 減少，大量非淋巴細(xì)胞分泌TGF-β1 增加，高水平TGF-β1 會(huì)抑制Th17 分化促進(jìn)Treg 細(xì)胞的增殖發(fā)育來抑制免疫反應(yīng)，同時(shí)還抑制中性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞增殖及活性來發(fā)揮抗炎作用[25-26]。

綜上所述，CSU 患者血清IL-35 水平與患者病情嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)，IL-17 與TGF-β1 水平與患者病情程度呈正相關(guān)，通過檢測患者血清IL-35、IL-17 與TGF-β1 水平可評(píng)估CSU 患者病情嚴(yán)重程度，有利于為臨床診治提供幫助。