陳微（通信作者），王會(huì)如，楊忠，康娟，宋偉，朱晉升

北京市醫(yī)療器械檢驗(yàn)所·醫(yī)療器械檢驗(yàn)與安全性評(píng)價(jià)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 （北京 101111）

CNAS-CL01：2018《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則》[1]規(guī)定質(zhì)量控制的要求，質(zhì)量控制是利用現(xiàn)代科學(xué)管理的方法和技術(shù)分析過(guò)程中的誤差，控制與分析有關(guān)的各個(gè)環(huán)節(jié)，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠[2]。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制可分為外部質(zhì)量控制和內(nèi)部質(zhì)量控制，實(shí)驗(yàn)室外部質(zhì)量控制一般通過(guò)實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)、能力驗(yàn)證等方式進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制一般通過(guò)人員比對(duì)、不同方法比對(duì)、不同儀器比對(duì)、質(zhì)量控制圖、回收實(shí)驗(yàn)等方式進(jìn)行[3]。

隨著我國(guó)科技的快速發(fā)展，對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的要求越來(lái)越高。為保障實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系有效運(yùn)行，確保數(shù)據(jù)結(jié)果的可追溯性，實(shí)驗(yàn)人員的經(jīng)驗(yàn)和技能是首要影響因素，并關(guān)系到實(shí)驗(yàn)室專(zhuān)業(yè)技術(shù)水平、質(zhì)量水平，故人員能力建設(shè)是重要組成部分，需要推進(jìn)、完善、提升。人員比對(duì)實(shí)驗(yàn)是指在相同的環(huán)境條件下，采用相同的實(shí)驗(yàn)方法、相同的儀器，由不同實(shí)驗(yàn)人員對(duì)同一樣品進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)[4]。采取人員比對(duì)的方式進(jìn)行內(nèi)部質(zhì)量控制，不僅可提升實(shí)驗(yàn)人員的操作能力，而且可使用比對(duì)數(shù)據(jù)縮小實(shí)驗(yàn)人員數(shù)據(jù)結(jié)果的差異，發(fā)現(xiàn)存在的問(wèn)題并進(jìn)行糾正和改進(jìn)。本研究通過(guò)對(duì)紅細(xì)胞和白細(xì)胞參考測(cè)量方法進(jìn)行人員比對(duì)實(shí)驗(yàn)，并對(duì)其結(jié)果進(jìn)行分析評(píng)價(jià)，對(duì)于提高實(shí)驗(yàn)人員的技術(shù)能力、為本實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制提供可靠的數(shù)據(jù)與依據(jù)具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料

樣本：選取15份新鮮血樣本，紅細(xì)胞要求正常范圍3.8×1012/L～5.8×1012/L，白細(xì)胞要求正常范圍3.5×109/L～9.5×109/L。

儀器與試劑：SYSMEX 半自動(dòng)電阻抗粒子計(jì)數(shù)儀，乙二胺四乙酸二鉀（ethylene diamine tetraacetic acid-K2，EDTAK2）采血管，移液器（20、200、1 000 μl），容量瓶（100、1 000 ml），稀釋液，溶血?jiǎng)?/p>

1.2 方法

1.2.1 比對(duì)人員要求及比對(duì)頻次

本實(shí)驗(yàn)室選取2名授權(quán)人員，工作滿(mǎn)8年并取得中級(jí)以上職稱(chēng)資格；每半年進(jìn)行1次內(nèi)部比對(duì)考核。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)方法

每名比對(duì)人員按照WS/T 245-2005《紅細(xì)胞和白細(xì)胞計(jì)數(shù)參考方法》[5]操作。紅細(xì)胞計(jì)數(shù)：使用20 μl 移液器吸取新鮮血樣本，加入1 000 ml 容量瓶中，使其混合均勻，倒入稀釋杯中，根據(jù)半自動(dòng)電阻抗粒子計(jì)數(shù)儀紅細(xì)胞操作規(guī)定得出該樣本中紅細(xì)胞個(gè)數(shù)。白細(xì)胞計(jì)數(shù)：使用200 μl 移液器吸取新鮮血樣本及1 000 μl 移液器吸取溶血?jiǎng)?，分別加入100 ml 容量瓶中，使其混合均勻，靜置15 min 后倒入稀釋杯中，根據(jù)半自動(dòng)電阻抗粒子計(jì)數(shù)儀白細(xì)胞操作規(guī)定得出該樣本中白細(xì)胞個(gè)數(shù)。

1.3 評(píng)價(jià)方法

紅細(xì)胞和白細(xì)胞比對(duì)結(jié)果應(yīng)符合本實(shí)驗(yàn)室制定的作業(yè)指導(dǎo)書(shū)《參考測(cè)量項(xiàng)目人員間比對(duì)》規(guī)定要求，計(jì)算比對(duì)人員同一天紅細(xì)胞和白細(xì)胞樣本數(shù)值的平均值，將A 人員數(shù)據(jù)作為參考值，比對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果按照公式（1）進(jìn)行評(píng)價(jià)：

其中， xi為B 人員測(cè)定值，x 為A 人員參考值。

紅細(xì)胞2%、白細(xì)胞4%為《參考測(cè)量項(xiàng)目人員間比對(duì)》規(guī)定的相對(duì)允差。

2 結(jié)果與分析

2.1 結(jié)果

同一天使用3支新鮮血樣本，計(jì)算每3支樣本總平均值，由表1和表2可以看出，實(shí)驗(yàn)人員比對(duì)項(xiàng)目數(shù)據(jù)結(jié)果的相對(duì)允差全部符合規(guī)定要求，保證了實(shí)驗(yàn)過(guò)程和數(shù)據(jù)的可靠性、有效性，并發(fā)現(xiàn)具有提升空間。

表1 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)比對(duì)結(jié)果匯總

表2 人員比對(duì)結(jié)果分析評(píng)價(jià)

2.2 實(shí)驗(yàn)操作分析

（1）樣本：新鮮血樣本需在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)，放置時(shí)間越長(zhǎng)，血液成分變化越大，越易影響數(shù)據(jù)結(jié)果。（2）儀器設(shè)備：儀器設(shè)備的參數(shù)和維護(hù)是保證結(jié)果可靠的關(guān)鍵，SYSMEX 半自動(dòng)電阻抗粒子計(jì)數(shù)儀由廠家定期校準(zhǔn)計(jì)數(shù)體積，每周使用質(zhì)控物監(jiān)測(cè)儀器的穩(wěn)定性，并由授權(quán)專(zhuān)人進(jìn)行該臺(tái)儀器的維護(hù)[6]。（3）人員：紅細(xì)胞和白細(xì)胞參考測(cè)量方法是一項(xiàng)細(xì)致的實(shí)驗(yàn)工作[7]，需要高素質(zhì)的專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員及更多的經(jīng)驗(yàn)積累，個(gè)人在獨(dú)立完成操作的前提下，定期組織人員比對(duì)實(shí)驗(yàn)確保其在規(guī)定范圍內(nèi)，也是對(duì)實(shí)驗(yàn)人員技術(shù)能力的監(jiān)督。（4）其他：實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，環(huán)境的溫度和濕度相對(duì)恒定，樣本混勻程度和溶血時(shí)間等因素都會(huì)影響數(shù)據(jù)結(jié)果。

3 討論

人員比對(duì)是內(nèi)部質(zhì)量管理控制的方法之一，在實(shí)驗(yàn)活動(dòng)中實(shí)施內(nèi)部質(zhì)量控制和質(zhì)量監(jiān)督，采取糾正措施和預(yù)防措施持續(xù)改進(jìn)管理體系，可提高實(shí)驗(yàn)人員的技術(shù)水平及素質(zhì)能力，其主要通過(guò)考核實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性來(lái)保證數(shù)據(jù)結(jié)果的可靠性和有效性[8]。如果實(shí)驗(yàn)人員未經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)的培訓(xùn)和考核，不同實(shí)驗(yàn)人員對(duì)同一實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行操作，得出的結(jié)果會(huì)有很大差異[9]。實(shí)驗(yàn)人員嚴(yán)格按照內(nèi)部制定的作業(yè)指導(dǎo)書(shū)及標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，盡量減少環(huán)境設(shè)備等影響因素，可使內(nèi)部質(zhì)量得到有效控制；定期組織開(kāi)展人員比對(duì)實(shí)驗(yàn)，分析實(shí)驗(yàn)人員之間的差異，可使其從自身分析過(guò)程中找出存在的問(wèn)題。

總之，影響實(shí)驗(yàn)工作準(zhǔn)確性的因素有很多，為切實(shí)提升實(shí)驗(yàn)室的能力，有效控制實(shí)驗(yàn)室的內(nèi)部質(zhì)量，需通過(guò)人員比對(duì)及外部機(jī)構(gòu)組織的能力驗(yàn)證活動(dòng)，了解真實(shí)水平，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，并進(jìn)行糾正和整改，才可有效達(dá)成目標(biāo)[10]。