謝 梅 徐 平

遵義醫(yī)科大學附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，貴州遵義 563000

認知功能是大腦接受外界刺激后加工處理獲取有效信息的過程，包含記憶、語言、執(zhí)行和理解等。突觸可塑性在神經(jīng)系統(tǒng)學習與記憶的認知過程中起著重要作用，而樹突棘是大腦發(fā)揮其認知功能的關(guān)鍵場所，其形態(tài)變化和發(fā)育嚴重影響大腦行使高級功能的能力，其中位于樹突棘的Drebrin 能夠特異性結(jié)合神經(jīng)元肌動蛋白，參與樹突棘和突觸可塑性動態(tài)變化過程，故與大腦認知功能密切相關(guān)。深入探討Drebrin 樹突棘發(fā)育及認知功能的關(guān)系，可能有利于將來對認知功能障礙疾病的治療和預防提供新靶點，本文就此進行綜述。

1 Drebrin 的生物特性

Drebrin 是一個分子量約為120 000 D 的單體蛋白，目前研究發(fā)現(xiàn)其主要包含N-末端肌動蛋白解聚因子同源結(jié)構(gòu)域（N-terminal actin-depolymerizing factor homology，ADF-H）、卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域（coiled-coil，CC）和羧基尾部，分為Drebrin E 和Drebrin A，當Drebrin中插入ins2 序列后，Drebrin E 逐漸被Drebrin A 替代，其中與肌動蛋白結(jié)合的區(qū)域是CC 結(jié)構(gòu)域，ADF-H區(qū)域可與組蛋白標記閱讀器ZMYND8 相互作用，羧基尾部則與突觸后支架蛋白Homer 結(jié)合參與興奮性突觸的樹突棘穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)作用[1]。Homer 是突觸后致密區(qū)（postsynaptic density，PSD）中最豐富的支架蛋白之一，當Homer 四聚體化和磷酸化后，可特異性結(jié)合Drebrin，加強Drebrin 與肌動蛋白的結(jié)合，誘導神經(jīng)元樹突棘的絲狀偽足形成[2]。最近報道Drebrin 的ADF-H 結(jié)構(gòu)域還能與Ca2+/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱ的β 亞基結(jié)合（CaMKⅡβ），參與調(diào)節(jié)CaMKⅡβ 在樹突棘中的定位[3]。

2 樹突棘、認知功能與Drebrin 的關(guān)系

2.1 Drebrin 參與樹突棘形成

樹突棘是中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮性突觸發(fā)生的重要場所，突觸連接強度直接影響神經(jīng)元的交流，其形態(tài)與突觸活動密不可分，包含細長型、蘑菇型、短粗型及絲狀偽足。有研究發(fā)現(xiàn)，與正常人比較，有認知功能障礙的阿爾茲海默?。ˋlzheimer’s disease，AD）患者的瘦長型和蘑菇型的樹突棘數(shù)量明顯減少[4]。樹突棘的結(jié)構(gòu)和功能直接影響包括學習和記憶在內(nèi)的認知功能，而樹突棘的形成、維持和調(diào)節(jié)主要受F-肌動蛋白及其與各種肌動蛋白結(jié)合蛋白相互作用的調(diào)控，其中Drebrin 是一種與神經(jīng)元發(fā)育密切相關(guān)的肌動蛋白結(jié)合蛋白，絕大部分存在于興奮性突觸的樹突棘中，在調(diào)節(jié)樹突棘生長發(fā)育過程中起關(guān)鍵作用[5-6]。González-Tapia 等[7]研究結(jié)果證明，樹突棘形態(tài)及密度隨著Drebrin 的變化而變化，同時成年大鼠表現(xiàn)出不同程度的認知功能，進一步揭示了樹突棘可塑性的分子機制。

樹突棘作為大腦信息處理的基本單元，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)絕大部分興奮性突觸的接受區(qū)域，大多數(shù)谷氨酸能突觸前的末端支配樹突棘，樹突棘的結(jié)構(gòu)由肌動蛋白骨架和PSD 組成[8]。肌動蛋白包含G-肌動蛋白和F-肌動蛋白，兩者的動態(tài)平衡是肌動蛋白骨架形成的關(guān)鍵因素。PSD 是一種高度集中于位于樹突棘突觸后膜的支架蛋白，可直接與谷氨酸受體相互作用改變樹突棘形態(tài)，因此，有人提出肌動蛋白細胞骨架和PSD 共同調(diào)節(jié)樹突棘形態(tài)變化，進而參與認知功能[9]。Takahashi 等[10]發(fā)現(xiàn)，Drebrin A 呈簇狀分布的絲狀偽足是成熟樹突棘的前體，可誘導PSD-95 重新聚集，對樹突棘的形成至關(guān)重要。樹突棘的成熟伴隨著肌動蛋白骨架從線性到分支的變化，其機制可能是Drebrin A 與mDia2-formin 構(gòu)建體的FH2 結(jié)構(gòu)域相互作用，抑制肌動蛋白成束，誘導肌動蛋白向分支變化[11]?？傊鬌rebrin A 水平下降將出現(xiàn)樹突棘發(fā)育障礙，導致大腦學習、記憶等認知功能受損。

2.2 Drebrin 參與突觸可塑性過程

突觸可塑性包含短期和長期：短期突觸可塑性即易化、抑制和增強；長期突觸可塑性包括長時程增強（long-term potentiation，LTP）和長時程抑制（long-term depression，LDP），是細胞學習記憶的生物學基礎(chǔ)。Siegel-Hertz 等[12]使用Drebrin A 基因敲除小鼠的海馬切片進行電生理學研究，海馬區(qū)LTP 出現(xiàn)損傷，并且在成年小鼠中表現(xiàn)更加明顯，小鼠的海馬依賴性恐懼記憶也同樣受損，表明Drebrin A 對成人突觸可塑性和學習記憶的認知功能極其重要?；钚哉{(diào)節(jié)的骨骼相關(guān)蛋白是LTP 的主要調(diào)節(jié)因子，其泛素化后與Drebrin A形成復合物，參與LTP 的動態(tài)電弧持續(xù)合成過程[13]。Drebrin A 參與突觸可塑性的LTP 過程，其機制還可能與LTP 誘導Drebrin A 和F-肌動蛋白復合物的迅速外流和隨后的復合物重新進入樹突棘有關(guān)，該過程與NMDA 受體激活誘導的Ca2+進入樹突棘調(diào)節(jié)Drebrin A、F-肌動蛋白復合物外流和肌球蛋白ⅡATP 酶抑制劑抑制該復合物外流有關(guān)[14]。LTD 是一種活動依賴性突觸功能降低的表現(xiàn)形式，在大腦發(fā)育中占主導地位，于成年后逐漸消失，對神經(jīng)連接的發(fā)育及重塑至關(guān)重要。Yasuda 等[15]經(jīng)實驗證明，同時敲除Drebrin E和A 的小鼠無法誘導NMADA 受體依賴的LTD，若單獨敲除Drebrin A 則表現(xiàn)高強度LTD，說明如果Drebrin E 向Drebrin A 的轉(zhuǎn)化出現(xiàn)障礙后將引起LTD。

2.3 Drebrin 參與細胞氧化應激后的保護作用

神經(jīng)元是一種代謝能力高度活躍的細胞，高耗氧的同時活性氧（reactive oxygen species，ROS）也大量產(chǎn)生，過量的ROS 導致神經(jīng)元產(chǎn)生氧化應激反應進而損害神經(jīng)元樹突棘結(jié)構(gòu)。雖然ROS 可被抗氧化系統(tǒng)緩沖，但在衰老、高強度活動等特定條件下，ROS 可誘導酶等大分子活化產(chǎn)生氧化損傷，損害突觸可塑性，進而降低大腦認知功能[16]。共濟失調(diào)-毛細血管擴張癥突變（ataxia-telangiectasia mutated，ATM）激酶是一種由DNA 雙鏈斷裂引起Mre-Rad50-Nbs1（MRN）DNA 修復復合物激活的一種蛋白激酶，其氧化形式中的二硫鍵交聯(lián)體可特異性阻斷氧化途徑的活化，缺乏ATM 激酶可對ROS 和一些能夠誘導產(chǎn)生氧化應激的藥物產(chǎn)生超敏反應[17]。有實驗證明，大腦中存在ATM 激酶，其介導Drebrin 磷酸化后對抗細胞氧化應激，ATM 和Drebrin 共同調(diào)節(jié)肌動蛋白骨架來對抗能量消耗及ROS，是一種保護神經(jīng)元免受ROS 傷害的機制之一，從而防止突觸功能障礙及由其產(chǎn)生的認知功能缺陷[18]。

2.4 Drebrin 參與認知功能的其他作用

Elizondo 等[19]研究發(fā)現(xiàn)，Drebrin 參與樹突狀細胞內(nèi)肌動蛋白骨架的穩(wěn)定，有利于樹突狀細胞對大顆粒的攝取和內(nèi)吞，不僅阻止病毒、細菌等異物侵入，還能促進樹突狀細胞對T 細胞的抗原呈遞作用和炎癥因子的分泌以維持免疫應答，維持神經(jīng)元發(fā)育和認知功能形成相對安全的環(huán)境。神經(jīng)元從生發(fā)區(qū)遷移至最終層流區(qū)對神經(jīng)回路的形成至關(guān)重要，認知功能的執(zhí)行離不開神經(jīng)元的正常發(fā)育，而神經(jīng)元的發(fā)育需經(jīng)歷遷移和極性的形成，Drebrin 介導的微管-肌動蛋白偶聯(lián)參與了神經(jīng)元的遷移途徑，通過Drebrin 和Siah2 E3泛素連接酶相互作用來協(xié)調(diào)遷移神經(jīng)元中極化細胞器的運輸[20-21]。CX43 是一種普遍的細胞間連接蛋白，其與細胞骨架之間的相互作用需要Drebrin 的直接參與，該過程與神經(jīng)元遷移和細胞通訊密切相關(guān)[22]。故Drebrin 可能是神經(jīng)元遷移的重要功能蛋白之一。細胞通訊是一種通過突觸釋放神經(jīng)介質(zhì)和細胞縫隙連接通道來調(diào)節(jié)神經(jīng)元Ca2+、cAMP、cGMP 等細胞信號的傳導，Drebrin 參與的細胞骨架重排可影響細胞縫隙連接通道的狀態(tài)，Drebrin 的降低能直接導致星形膠質(zhì)細胞縫隙連接通道喪失功能，而Drebrin 主要根據(jù)細胞活性變化來形成或重新定位星形膠質(zhì)細胞的連接蛋白通道，進而參與神經(jīng)元細胞通訊的調(diào)控[23]。

3 Drebrin 與認知功能障礙相關(guān)疾病

Drebrin 作為一種大腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白，參與神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)發(fā)育和功能變化，與各種認知功能障礙相關(guān)的疾病，尤其是中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病密切相關(guān)。AD 是一種影響老年人記憶與認知的神經(jīng)退行性疾病，β 淀粉樣蛋白（amyloid β，Aβ）是AD 發(fā)生的重要病理生理機制，已經(jīng)明確突觸傳遞速度的降低和樹突棘的喪失發(fā)生于AD 淀粉樣斑塊和神經(jīng)元細胞損失之前，Aβ 衍生的可擴散配體（Aβ-derived diffusible ligand，ADDL）可介導Aβ 毒性，ADDL 與突觸后位點結(jié)合誘導樹突棘的Drebrin 損失，且Drebrin 數(shù)量減少發(fā)生于樹突棘形態(tài)和密度變化之前，故有研究者認為，Drebrin 可作為AD 前驅(qū)期的觀察指標[24]。Gordon-Weeks[25]對AD的樹突棘可塑性研究發(fā)現(xiàn)，Drebrin/EB3/Cdk3 細胞內(nèi)信號途徑參與了該過程，即當Drebrin 與肌動蛋白側(cè)鏈結(jié)合后，末端結(jié)合蛋白（end-binding protein，EB）作為一種微管加端追蹤蛋白，可特異性結(jié)合Drebrin，加強動力微管與肌動蛋白骨架在LTP 期間的結(jié)合，促進樹突棘成熟，但AD 中Drebrin 顯著減少，影響突觸可塑性并因此導致認知功能障礙。Cofilin 是另一種肌動蛋白結(jié)合蛋白，可競爭Drebrin 結(jié)合F-肌動蛋白，甚至這兩種蛋白可與F-肌動蛋白完全結(jié)合，Cofilin 促進F-肌動蛋白轉(zhuǎn)換，而Drebrin 抑制F-肌動蛋白解聚以穩(wěn)定肌動蛋白細胞骨架，兩者之間的分子串擾參與神經(jīng)元細胞骨架調(diào)節(jié)途徑，該途徑受損被認為是AD、衰老、唐氏綜合征及癲癇合并認知功能障礙的機制之一[26]。Dombroski 等[27]對癲癇患者海馬進行研究發(fā)現(xiàn)，海馬Drebrin 的表達與癲癇發(fā)作頻率呈負相關(guān)，與言語記憶等呈正相關(guān)。同時，抗Drebrin 血清陽性患者出現(xiàn)癲癇發(fā)作、記憶障礙和腦脊液蛋白質(zhì)含量增加，研究證明，原代海馬神經(jīng)元暴露于抗Drebrin 自身抗體后，突觸組成和Drebrin 分布出現(xiàn)異常，棘波率增加，突觸放電出現(xiàn)反映網(wǎng)絡超興奮性。解釋：抗Drebrin 自身抗體定義了一種反復發(fā)作和神經(jīng)精神損害的慢性綜合征[28]。精神分裂癥、躁狂癥等疾病的認知功能下降均與樹突棘密度及形態(tài)變化密切相關(guān)[29]。成年大腦中Drebrin A 減少可誘導mGluR5 依賴的LTD 增強，增強的mGluR5 依賴的LTD 已被認為是脆性X 綜合征精神發(fā)育遲滯的基礎(chǔ)生理變化，除此之外，在抑郁、焦慮的大鼠腦中也能觀察到由Drebrin A 減少引起LTD增強的變化[30]。

4 展望

Drebrin 不僅參與樹突棘發(fā)育形成和突觸可塑性變化來影響認知功能，涉及各種認知功能障礙疾病，如AD、抑郁癥、精神發(fā)育遲滯等，最近也有研究發(fā)現(xiàn)，Drebrin 可結(jié)合一種修飾組蛋白的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子ZMYND8，抑制腫瘤轉(zhuǎn)移[31]。進一步研究Drebrin 在認知功能中的作用，有助于揭示認知功能障礙相關(guān)神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)生機制，可能成為藥物干預的新分子靶點。