楊文聰 魏統(tǒng)雙

1.四川省劍閣縣中醫(yī)醫(yī)院檢驗科(四川 劍閣 628300)

2.四川省劍閣縣中醫(yī)醫(yī)院放射科(四川 劍閣 628300)

肝癌居全球癌癥病死率的第3位，早期發(fā)現(xiàn)與診斷是現(xiàn)階段肝癌治療的關(guān)鍵。肝穿刺活檢是肝癌評估的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但存在組織取樣不均勻、操作侵入性強(qiáng)以及早期無癥狀患者不易接受等原因，導(dǎo)致其在臨床上早期廣泛應(yīng)用具有一定的局限性。多層螺旋電子計算機(jī)斷層掃描(multi-slice spiral computed tomography，MSCT)自1998年應(yīng)用于肝臟增強(qiáng)掃描以來，已廣泛應(yīng)用于肝癌的診斷當(dāng)中。MSCT以其快速掃描，1次屏氣即可完成對全肝的掃描，可有效避免呼吸運動導(dǎo)致的偽影以及遺漏，但其對于肝癌與小血管瘤、小膿腫、肝硬化再生結(jié)節(jié)的鑒別診斷中易出現(xiàn)誤診，診斷準(zhǔn)確率有待提高。血清學(xué)檢查在一定程度上能夠反應(yīng)肝臟病變程度[1]，且操作簡便，經(jīng)濟(jì)實用，有助于全程追蹤肝臟疾病進(jìn)展。miRNA是近年來發(fā)現(xiàn)的非編碼調(diào)控單鏈RNA，參與細(xì)胞增殖、分化、凋亡。研究顯示肝癌患者癌組織以及血清中miR-122-5p表達(dá)水平均會出現(xiàn)明顯變化，且這些變化和疾病的發(fā)生具有密切關(guān)系[2]。目前臨床上尚無血清miR-122-5p水平聯(lián)合MSCT診斷肝癌的相關(guān)報道。本研究選取2016年1月至2019年1月期間我院收治的80例肝癌患者作為觀察組，旨在探討血清miR-122-5p水平聯(lián)合MSCT對肝癌的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取我院2016年1月至2019年1月收治的80例肝癌患者作為觀察組，其中男性61例，女性19例；年齡46～78歲，平均年齡(65.91±6.70)歲。另收集同期進(jìn)行肝癌篩查的健康人群100例相關(guān)資料作為正常對照組，其中男性74例，女性26例；年齡45～79歲，平均年齡(65.03±6.16)歲。

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合中華醫(yī)學(xué)會慢性乙肝肝硬化肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，證實為乙肝感染；谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)正?；蛏叻鹊陀谡Ｖ档?倍、總膽紅素正常、體質(zhì)指數(shù)＜28kg/m2；納入患者未接受過抗病毒及降酶藥物治療；納入患者均行血常規(guī)、生化檢查及肝臟活檢病理檢查；病歷資料與影像學(xué)資料均完整。

排除標(biāo)準(zhǔn)：合并血液性疾病或嚴(yán)重凝血功能障礙；合并其他肝病類型；心、肺、腎功能嚴(yán)重不全者；結(jié)核病或惡性腫瘤者；認(rèn)知障礙、精神疾患者；病歷資料不全者；過敏體質(zhì)或自身免疫性疾病者；妊娠以及哺乳期患者；活動性肝病或轉(zhuǎn)移性肝癌。

1.2 方法

1.2.1 實驗室檢測 采集靜脈血3000r/min轉(zhuǎn)速下離心10min，分離血清，實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測miR-122-5p、miR-486-5p表達(dá)水平。

1.2.2 影像學(xué)檢查 儀器為GE Lightspeed 16層螺旋CT，參數(shù)設(shè)置：電壓、電流分別為120kV、250mA，層厚、層距分別為5、2.5mm，螺距設(shè)置為1.0。檢查前禁食水8h，檢查范圍包括整個肝臟，先行平掃，之后靜脈注射碘海醇對比劑80～100mL，流率3mL/s，肝臟三期動態(tài)增強(qiáng)掃描。注射25～30s后，開啟肝動脈期掃描模式，于50～60、180～240s分別進(jìn)行門靜脈與實質(zhì)期掃描，平衡期、延遲期分別在2～3、5～7min，掃描過程中患者需屏住呼吸。

1.3 圖像處理與分析所有圖像均經(jīng)2位5年以上經(jīng)驗放射科醫(yī)師共同分析得出相關(guān)診斷結(jié)果，若出現(xiàn)意見不一致不可確定的情況，則再請主任醫(yī)師進(jìn)行核實。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS 20.0軟件，計量資料符合正態(tài)分布以“Mean±SD”表示，組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料以例數(shù)(百分比)表示，診斷價值分析采用ROC曲線，曲線下面積(AUC)代表評估效能。P＜0.05代表差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 肝癌的影像學(xué)特點80例肝癌患者進(jìn)行MSCT多期掃描共發(fā)現(xiàn)107個病灶，病灶大小為 5～10mm，單個癌結(jié)節(jié)58例，2個癌結(jié)節(jié)17例，3個癌結(jié)節(jié)5例；肝右葉病灶50例(多發(fā)13例)，左葉病灶27例(多發(fā)6例)，左右葉病灶3例；其中92個強(qiáng)化病灶中68個病灶呈明顯或輕度較均勻強(qiáng)化，24個病灶呈不均勻強(qiáng)化，表現(xiàn)為腫瘤邊緣環(huán)形強(qiáng)化、部分性強(qiáng)化、中心點狀強(qiáng)化(圖1)。MSCT各期檢出率分別為動脈期88.79%(95/107)、門靜脈期71.96%(77/107)、平衡期77.57%(83/107)、延遲期83.18%(89/107)，多時相綜合掃描檢出率為93.46%(100/107)，見表1。

圖1 典型病例影像圖。1A：1例肝硬化，男，61歲，平掃未見異常密度病灶；1B：1例肝癌，男，59歲，動脈期肝右前葉見大小9mm×10mm高密度強(qiáng)化病灶；1C-1D：1例肝癌，男，70歲，門脈期、平衡期病灶呈等密度影。

表1 MSCT 多時相薄層掃描各期表現(xiàn)[n(%)]

2.2 兩組患者血清指標(biāo)水平對比由表2可知，肝癌患者血清miR-122-5p表達(dá)水平低于對照組(P＜0.05)。

表2 兩組患者血清指標(biāo)水平對比()

表2 兩組患者血清指標(biāo)水平對比()

2.3 不同檢測方式在肝癌診斷中的應(yīng)用價值分析將血清miR-122-5p表達(dá)水平與MSCT掃描結(jié)果納入ROC曲線分析，由圖2和表3可知，聯(lián)合檢測的AUC為0.884，miR-122-5p的AUC為0.795，MSCT的AUC為0.766。

表3 ROC曲線分析數(shù)據(jù)表

圖2 ROC曲線圖。2A：miR-122-5p診斷肝癌的ROC曲線；2B：MSCT診斷肝癌的ROC曲線；2C：聯(lián)合診斷肝癌的ROC曲線。

3 討 論

文獻(xiàn)報道近幾年來肝癌發(fā)病率呈不斷上升趨勢，其中很大一部分患者確診時已然錯過手術(shù)最佳時機(jī)，故生存率較低[4]。早期準(zhǔn)確診斷能夠有效預(yù)防肝病的進(jìn)展，對于改善乙型肝炎肝硬化肝癌的預(yù)后也有著重要的作用。肝穿刺病理檢驗為有創(chuàng)操作，在臨床上不適宜反復(fù)操作，同時肝穿刺也有一定的風(fēng)險，故而導(dǎo)致其在臨床上作為早期診斷手段具有很大的局限性。隨著多層螺旋CT的高速發(fā)展，MSCT掃描以其快速成像、高空間分辨率、高密度等準(zhǔn)確反映病灶情況及與血供特點，一次性注射造影劑后就能進(jìn)行多時相掃描檢查，能夠根據(jù)肝臟及其腫瘤的血供特點，大大提高微小肝癌檢出率[5-6]。研究表明，miR-122-5p參與了肝細(xì)胞肝癌的發(fā)生與發(fā)展，監(jiān)控血清miR-122-5p水平對肝癌具有一定的診斷及預(yù)測價值[7]。

文獻(xiàn)報道肝癌病灶平掃結(jié)果多呈現(xiàn)低密度，但也有部分表現(xiàn)為等密度或高密度，這主要和腫瘤分化情況有關(guān)，還與患者原本的基礎(chǔ)肝臟功能有關(guān)[8]。研究表明，肝癌增強(qiáng)掃描動脈期多表現(xiàn)為密度增高，且門靜脈期可表現(xiàn)為稍高、等、低密度，平衡與延遲期為低或等密度[9]，這是由于肝臟正常血供中其中有2/3來自于門靜脈，此外的 1/3來源于肝動脈。文獻(xiàn)報道，肝癌螺旋CT掃描中動脈期、門靜脈期、平衡期檢出率分別為68.3%、29.3%、2.2%[10]，本研究中MSCT對肝癌的檢出率動脈期88.79%，門靜脈期71.96%，平衡期77.57%，延遲期83.18%，均較明顯高于文獻(xiàn)報道，這是與采取(3～5mm)的薄層掃描有關(guān)，5～10mm的病灶不易漏診。臨床研究認(rèn)為，MSCT動脈期掃描在腫瘤多血供中應(yīng)用價值較高,，門靜脈期、延遲期在腫瘤少血供中價值較高[11]。由于肝癌MSCT定性診斷主要根據(jù)增強(qiáng)掃描動態(tài)變化進(jìn)行評估，因此需動脈期、平衡期、門脈期、延遲期結(jié)合，以此來提高診斷特異性,提高檢出率，對降低患者術(shù)后復(fù)發(fā)率，有效提高患者術(shù)后生存時間具有重要價值，本研究中多時相綜合掃描檢出率為93.46%，高于動脈期。因此把MSCT薄層多時相掃描作為肝癌診斷常規(guī)檢測方法，具有很大的臨床實用價值，與國內(nèi)文獻(xiàn)[12]報道一致。

外周血中含穩(wěn)定表達(dá)的miRNA，文獻(xiàn)報道顯示部分腫瘤相關(guān)miRNA在患者血清中出現(xiàn)異常變化，且其變化情況往往呈現(xiàn)組織特異性，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展情況以及患者預(yù)后狀態(tài)等均密切相關(guān)[13]，有學(xué)者推測，miRNA可能是一個腫瘤評估重要指標(biāo)和治療重要靶點[14]。miR-122-5p作為肝臟特異性高表達(dá)水平miRNA，參與調(diào)控肝臟細(xì)胞發(fā)育、細(xì)胞分化、細(xì)胞代謝，在肝細(xì)胞應(yīng)激應(yīng)答中均具有重要價值。肝癌細(xì)胞miR-122-5p表達(dá)下調(diào)，在疾病的發(fā)生與發(fā)展中呈現(xiàn)抑癌性質(zhì)。臨床研究證實ADAM-10、Bcl-w、CyclinG1、IgflR、TCF-4、Wnt1和β-catenin等致癌基因是miR-122-5p的下游靶基因[15-16]，另有研究經(jīng)人為調(diào)高miR-122-5p表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)肝癌細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移均受到抑制[17]。本研究中肝癌患者血清miR-122-5p水平較對照組低，提示患者miR-122-5p呈現(xiàn)高表達(dá)，且這種異常升高狀態(tài)可能與腫瘤造成的肝損害相關(guān)，與患者預(yù)后關(guān)系密切，與何佳等[18]在血清miR－122－5p和miR－486－5p在肝癌診斷中的臨床應(yīng)用中結(jié)果一致。

本研究ROC曲線分析結(jié)果顯示，聯(lián)合血清miR-122-5p與MSCT掃描結(jié)果診斷肝癌曲線下AUC值高于兩項指標(biāo)單獨用于疾病診斷，提示聯(lián)合檢查集各項優(yōu)勢提高疾病診斷價值，與Zhou等[17]研究結(jié)果一致。但目前血清miR-122-5p作為肝癌檢測標(biāo)記物仍處于早期階段，尚且存在一些需要解決的關(guān)鍵性問題：(1)血清miR-122-5p檢測尚需標(biāo)準(zhǔn)化；(2)作為肝癌血清標(biāo)志物，miR-122-5p參考值范圍還需進(jìn)一步研究論證；(3)樣本量普遍不足，缺乏長期隨訪資料。

綜上所述，miR122是新發(fā)現(xiàn)的肝腫瘤標(biāo)志物，其血清表達(dá)水平與肝癌的臨床病理特征關(guān)系密切，結(jié)合MSCT可有效提高肝癌的診斷價值。隨著臨床上對于癌癥發(fā)生發(fā)展中miRNA作用的進(jìn)一步研究，發(fā)現(xiàn)血清miRNA表達(dá)水平不僅可用于早期肝臟癌變診斷，同時治療過程中也可通過腫瘤miRNA調(diào)控來有效抑制疾病發(fā)展，其可能成為疾病治療新途徑之一。