陳澎濤 鄒華偉 丁 華

甲狀腺癌發(fā)病率約占全身惡性腫瘤的1%左右，按照病理類型可分為甲狀腺乳頭狀癌、甲狀腺濾泡狀癌、甲狀腺髓樣癌和未分化癌四大類，其中甲狀腺髓樣癌是甲狀腺癌中較為少見的病理類型，發(fā)病率占甲狀腺惡性腫瘤的3%～5%，50歲以上人群為高發(fā)群體，病死率約占甲狀腺癌的13.4%[1-4]。NCAM、CEA和caspase-3都是臨床上較為常用的惡性腫瘤鑒別指標(biāo)，在諸如胃癌、大腸癌等疾患的鑒別診斷中經(jīng)臨床驗(yàn)證具有較高的準(zhǔn)確性[5-6]。本研究旨在分析NCAM、CEA和caspase-3的表達(dá)在甲狀腺髓樣癌中的臨床價(jià)值，現(xiàn)詳述如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年1月至2020年1月于我院接受治療的82例甲狀腺髓樣癌患者為實(shí)驗(yàn)組，另選取同期于我院接受治療的41例良性甲狀腺病變組織為對(duì)照組。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①入組對(duì)象有完整的病理學(xué)和免疫組織化學(xué)資料；②實(shí)驗(yàn)組患者均經(jīng)病理學(xué)檢測(cè)確診為甲狀腺髓樣癌；③意識(shí)清晰能夠配合進(jìn)行調(diào)研；④調(diào)研報(bào)醫(yī)院倫理學(xué)會(huì)批準(zhǔn)實(shí)施；⑤患者或其家屬簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并精神疾患者；②非原發(fā)甲狀腺疾病患者；③術(shù)前接受放化療或免疫治療者；④依從性較差者。

1.2 干預(yù)方法

分別采集實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組甲狀腺病變組織，使用石蠟包埋后實(shí)施常規(guī)HE染色，而后切片并采用免疫組化檢測(cè)分析2組患者NCAM和caspase-3的染色情況；同時(shí)采集2組患者血清并使用羅氏Modular Analytics E170全自動(dòng)化學(xué)免疫發(fā)光分析儀對(duì)2組患者血清CEA水平進(jìn)行檢測(cè)(正常水平為<5 ng/ml)。

1.3 觀察指標(biāo)及評(píng)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

觀察指標(biāo)為實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組患者甲狀腺病變組織中NCAM和caspase-3的表達(dá)情況，以及血清CEA水平，其中NCAM和caspase-3的表達(dá)由兩位資深病理醫(yī)師在雙盲條件下閱片，免疫組化結(jié)果參照相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行計(jì)算[7-8]，著色細(xì)胞百分比評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)如下：著色細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)≤5%為0分，>5%～25%為1分，>25%～50%為2分，>50%為3分；細(xì)胞著色強(qiáng)度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)如下：胞質(zhì)或胞核不染色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)如下：著色細(xì)胞占比×著色強(qiáng)度得分0～1分為陰性(-)，得分2～3分代表弱陽(yáng)性(+)，得分4～6分代表陽(yáng)性(++)，得分6分以上代表強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 2組患者一般臨床資料差異性比較

經(jīng)比較發(fā)現(xiàn)，2組患者一般臨床指標(biāo)諸如性別、平均年齡、平均體重、受教育程度、婚姻狀態(tài)等比較差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性，見表1所示。

2.2 2組患者組織NCAM表達(dá)差異性比較

實(shí)驗(yàn)組患者甲狀腺髓樣癌組織中NCAM陽(yáng)性表達(dá)率為4.88%(4/82)，對(duì)照組患者甲狀腺病變組織中NCAM陽(yáng)性表達(dá)率87.80%(36/41)，組間比較差異明顯(χ2=85.655,P<0.001)，見表2。

表1 2組患者一般臨床指標(biāo)比較例)

表2 2組患者NCAM表達(dá)差異性比較/例

2.3 2組患者CEA水平差異性比較

經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組患者血清CEA平均水平為(15.33±2.31)ng/ml，對(duì)照組患者血清CEA水平為(5.21±0.31)ng/ml，2組患者組間比較差異明顯(t=36.132，P<0.001)。

2.4 2組患者組織caspase-3表達(dá)差異性分析

經(jīng)免疫組化分析發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組患者中caspase-3表達(dá)陽(yáng)性率為24.39%(20/82)，對(duì)照組患者中caspase-3表達(dá)陽(yáng)性率為78.05%(32/41)，2組比較差異明顯(χ2=32.249,P<0.001)，見表3。

表3 2組患者caspase-3表達(dá)差異性比較/例

·

2.5 NCAM、caspase-3、CEA表達(dá)與甲狀腺髓樣癌臨床病理特征的關(guān)系分析

經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，NCAM、caspase-3、CEA的表達(dá)與甲狀腺髓樣癌患者的性別、年齡、是否雙側(cè)均無(wú)明顯的相關(guān)性(P>0.05)，而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期存在一定的關(guān)聯(lián)(P<0.05)，見表4。

表4 NCAM caspase-3、CEA表達(dá)與甲狀腺髓樣癌臨床病理特征關(guān)系分析/例

3 討論

甲狀腺髓樣癌是一種起源于產(chǎn)降鈣素的甲狀腺濾泡旁(C細(xì)胞)的神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，最早于1959年被學(xué)者Hazard和Crile描述，臨床調(diào)研顯示，甲狀腺髓樣癌雖然不具有濾泡組織，但具有高度淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移特性，是實(shí)體甲狀腺惡性腫瘤之一，占全部甲狀腺癌的3%～5%[9-10]。甲狀腺髓樣癌的惡性程度介于分化型和未分化型，男女發(fā)病率相當(dāng)，該病雖然發(fā)病率較低，但惡性程度較高，且容易出現(xiàn)腺外侵犯、區(qū)域淋巴結(jié)和遠(yuǎn)隔臟器(如肺、肝臟等)轉(zhuǎn)移，故而預(yù)后往往較差，恰當(dāng)?shù)脑缙诟深A(yù)對(duì)改善甲狀腺髓樣癌患者預(yù)后具有重要意義[11-12]。傳統(tǒng)甲狀腺髓樣癌的鑒別診斷方式主要依賴組織病理學(xué)、影像學(xué)等，臨床實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，組織病理學(xué)檢測(cè)雖然屬金標(biāo)準(zhǔn)，但存在檢測(cè)周期長(zhǎng)、檢測(cè)費(fèi)用高、有創(chuàng)操作、可重復(fù)性低等不足，部分患者難以耐受，影像學(xué)檢測(cè)雖然較為快速，但受個(gè)體因素影響較大，易出現(xiàn)較大的誤差，從而影響后續(xù)治療方案的確定[13-14]。隨著近些年分子生物學(xué)的發(fā)展，越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)志物被應(yīng)用于惡性腫瘤的鑒別診斷以及預(yù)后判斷中。

本研究通過(guò)設(shè)立不同分組的方式，就NCAM、CEA以及caspase-3的表達(dá)在甲狀腺髓樣癌中的臨床價(jià)值進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示，相比于良性病變甲狀腺組織，甲狀腺髓樣癌組織的NCAM和caspase-3表達(dá)陽(yáng)性率明顯更低，CEA水平明顯更高，組間差異明顯。本文作者分析認(rèn)為，NCAM屬于免疫球蛋白超家族的一種，廣泛存在于神經(jīng)外胚層的細(xì)胞以及組織中，臨床研究發(fā)現(xiàn)NCAM對(duì)于腫瘤細(xì)胞的遷移以及腫瘤相關(guān)淋巴管的形成會(huì)產(chǎn)生明顯影響，有研究結(jié)果顯示甲狀腺乳頭癌組織中NCAM表達(dá)呈陰性，而在除癌變組織外的良性病變及正常組織中表達(dá)呈陽(yáng)性，特異度接近100%[15]。另有研究指出，NCAM在甲狀腺正常組織以及良性病變組織中高表達(dá)，但在甲狀腺癌組織中低表達(dá)，這與本文結(jié)果類似[16]。CEA已經(jīng)被多項(xiàng)研究證實(shí)同惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展存在密切相關(guān)性，同時(shí)還有研究指出CEA的水平與惡性腫瘤的病理分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)[17]，與本文研究結(jié)果一致。caspase-3屬于caspase家族的一種，caspase家族在細(xì)胞的凋亡進(jìn)程中能夠發(fā)揮截?cái)嗟蛲黾?xì)胞與周圍細(xì)胞聯(lián)系的作用，具有阻止凋亡細(xì)胞DNA修復(fù)、徹底破壞核結(jié)構(gòu)、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的效果，caspase-3又被稱為半胱氨酸蛋白酶32，在細(xì)胞凋亡過(guò)程中占據(jù)核心地位，又被稱為“死亡執(zhí)行蛋白酶”，具有促凋亡的作用[18-20]。本文中研究組患者caspase-3表達(dá)陽(yáng)性率為24.39%，遠(yuǎn)低于對(duì)照組的78.05%，分析其原因?yàn)閻盒阅[瘤細(xì)胞具有高度增殖特性，其特點(diǎn)就是細(xì)胞失去或減弱凋亡能力，無(wú)限制的增生浸潤(rùn)，凋亡率顯著低于正常細(xì)胞，因而caspase-3的表達(dá)會(huì)出現(xiàn)顯著降低。

本研究還就NCAM、CEA以及caspase-3的表達(dá)與甲狀腺髓樣癌的臨床病理特征進(jìn)行了相關(guān)性分析，結(jié)果顯示淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期與NCAM、CEA以及caspase-3的表達(dá)呈現(xiàn)明顯的相關(guān)性，淋巴結(jié)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移、TNM分期升高的甲狀腺髓樣癌患者NCAM以及caspase-3的表達(dá)水平更低，CEA水平更高，分析其原因也與上文結(jié)果類似，NCAM的低表達(dá)促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的遷移增殖，而caspase-3的低表達(dá)降低了腫瘤細(xì)胞的凋亡率，因而甲狀腺髓樣癌患者出現(xiàn)了更高的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率，以及更高的臨床TNM分期。

綜上所述，NCAM和caspase-3在甲狀腺髓樣癌組織中呈現(xiàn)明顯低表達(dá)態(tài)，CEA水平明顯增高，同時(shí)臨床病理特征分析顯示NCAM、caspase-3的低表達(dá)和CEA的異常高水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與TNM分期相關(guān)。