章 瑾 岳桂敏 趙巧蓮

肺癌為最常見惡性腫瘤之一，多由肺炎、肺部結(jié)節(jié)等發(fā)展而來。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，部分肺癌患者經(jīng)過手術(shù)切除后具有很好的預(yù)后，但是5年生存率一直比較低[1]，主要在于肺癌患者的早期診斷率比較低，很多患者在就診時(shí)已為中晚期[2]，因此早期診斷對改善患者的預(yù)后具有重要價(jià)值。血液分子標(biāo)志物的檢測作為一種易于推廣、簡便、無創(chuàng)的檢測方法，當(dāng)前在臨床上的應(yīng)用比較多，特別是在惡性腫瘤的診斷中顯示出了較高的靈敏度和特異度[4]。細(xì)胞角蛋白21-1(CYFRA21-1)與肺癌的發(fā)生與發(fā)展密切相關(guān)，其主要分布于單層和復(fù)層上皮腫瘤細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)，當(dāng)細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，其以溶解片段的形式釋放入血清中，導(dǎo)致血清CYFRA21-1表達(dá)水平上升[5-6]?，F(xiàn)代研究表明惡性腫瘤患者存在明顯的體液免疫與免疫監(jiān)視情況，從而可在機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生自身抗體。DLL4蛋白與Notch蛋白可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、分化和凋亡，也有助于促進(jìn)機(jī)體血管生成[7]，并且該通路在進(jìn)化過程中屬于高度保守的信號通路，屬于自身抗體的類型[8]。本文具體探討了CYFRA21-1在肺癌患者血清中的表達(dá)及自身抗體與臨床病理特征的相關(guān)性，希望為早期肺癌的發(fā)現(xiàn)提供參考?，F(xiàn)總結(jié)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)與所有患者的知情同意。選取本院2015年6月到2019年11月收治的肺癌患者78例作為肺癌組，納入標(biāo)準(zhǔn)：病理診斷為非小細(xì)胞肺癌；術(shù)前均未行放、化療及其它抗腫瘤治療；年齡在30～70歲；無嚴(yán)重的自身免疫系統(tǒng)、血液系統(tǒng)疾??；無嚴(yán)重的心腦血管、肝腎等器官組織疾??；臨床與病理資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他惡性腫瘤；伴有遺傳代謝性疾病；伴有其他基因疾病患者。同期選擇性別相同(按比例匹配)和年齡相近的健康人78例作為健康組。

肺癌組中男性40例，女性38例；年齡最小35歲，最大68歲，平均年齡(54.29±2.18)歲；病理類型：鱗狀細(xì)胞癌50例，腺癌28例；分化類型：高分化16例，中分化35例，低分化27例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移31例；臨床分期：Ⅰ期18例，Ⅱ期27例，Ⅲ期33例。健康組中男性41例，女性37例；年齡最小35歲，最大68歲，平均年齡(54.29±2.18)歲。2組患者的性別、年齡等一般資料對比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 CYFRA21-1與自身抗體表達(dá)檢測

抽取所有入選者的空腹靜脈血2～3 ml，不抗凝，室溫靜置30 min，1500 rpm/min離心10 min，取上層血清，采用免疫發(fā)光法檢測血清CYFRA21-1含量，采用酶聯(lián)免疫法檢測血清DLL4與Notch含量。正常上限值：CYFRA21-1：3.3 ng/ml；DLL4：11.1 U/ml；Notch：10.3 U/ml。

1.3 調(diào)查內(nèi)容

本研究調(diào)查了肺癌的臨床病理特征資料，包括病理類型、分化類型、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 22.00統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)以%表示，計(jì)量數(shù)據(jù)與計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)的對比采用t檢驗(yàn)與卡方χ2檢驗(yàn)等，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析與二分類變量Logistic回歸分析(選入變量與剔除變量P值分別為0.05和0.1)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果以P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CYFRA21-1與自身抗體表達(dá)陽性率對比

肺癌組的CYFRA21-1、DLL4與Notch表達(dá)陽性率分別為85.9%、83.3%和62.8%，都顯著高于健康組的5.1%、6.4%和5.1%(P<0.05)。見表1。

表1 2組CYFRA21-1與自身抗體表達(dá)陽性率對比(例，%)

2.2 CYFRA21-1與自身抗體表達(dá)陽性率與肺癌病理特征的關(guān)系

在肺癌組中，不同分化類型、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌患者CYFRA21-1、DLL4、Notch表達(dá)陽性率對比差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

2.3 相關(guān)性分析

在肺癌組中，Pearson相關(guān)性分析顯示CYFRA21-1、DLL4、Notch表達(dá)陽性率與分化類型、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移都呈現(xiàn)相關(guān)性(P<0.05)。Logistic回歸分析顯示分化類型、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為影響CYFRA21-1、DLL4、Notch表達(dá)的主要因素(P<0.05)。見表3與表4。

3 討論

肺癌是目前全球發(fā)病率最高的癌癥，每年約有100多萬人死于肺癌，其中80%以上為非小細(xì)胞肺癌。非小細(xì)胞肺癌的惡性程度比較高，多數(shù)患者就診時(shí)既已發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，伴隨有血管生成，失去手術(shù)治療機(jī)會(huì)，導(dǎo)致5年生存率低[9]。本研究顯示肺癌組的CYFRA21-1、DLL4與Notch表達(dá)陽性率分別為85.9%、83.3%和62.8%，都顯著高于健康組的5.1%、6.4%和5.1%(P<0.05)。CYFRA21-1是細(xì)胞角蛋白家族成員之一，也是一個(gè)分子量為4 kD的酸性細(xì)胞蛋白，由細(xì)胞角蛋白19片段的2個(gè)單克隆抗體組成。已有研究顯示惡性腫瘤患者的血清與胸水中CYFRA21-1濃度升高，其敏感性隨病情進(jìn)展而發(fā)生變化，與惡性腫瘤的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)[10]。在多種腫瘤患者血清中均有多種自身抗體表達(dá)，腫瘤的生長與腫瘤的血管生成密切相關(guān)，新生血管形成可以與機(jī)體血液循環(huán)相通，使得腫瘤組織能得到更好的血液供應(yīng)，促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移與侵襲[11]。DLL4與Notch的表達(dá)都可調(diào)節(jié)腫瘤干細(xì)胞的分化，特別是DLL4高表達(dá)可促使腫瘤干細(xì)胞比例增加，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞克隆形成，抑制細(xì)胞分化和凋亡。Notch具有很強(qiáng)的致瘤、血管侵襲能力；在增殖過程中，Notch可能會(huì)分泌某種化學(xué)因子，使得腫瘤細(xì)胞具有新生血管的微環(huán)境，從而調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，并促進(jìn)血管的發(fā)育和成熟[12]。

表2 CYFRA21-1、自身抗體表達(dá)陽性率與肺癌病理特征的關(guān)系/例

表3 CYFRA21-1、自身抗體與肺癌臨床病理特征的相關(guān)性(n=78)

表4 影響肺癌患者CYFRA21-1、自身抗體表達(dá)的因素(n=78)

隨著醫(yī)療水平的不斷發(fā)展與進(jìn)步，肺癌的治療手段逐漸走向精準(zhǔn)化與多樣化的體系，免疫治療與分子靶向藥物的問世給很多肺癌患者帶來了新的希望，而只有做到早期診斷，抓住最佳治療時(shí)機(jī)，才能從根本上改善患者的預(yù)后。本研究顯示不同分化類型、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌患者CYFRA21-1、DLL4、Notch表達(dá)陽性率對比差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。從機(jī)制上分析CYFRA21-1是肺鱗癌患者生存及復(fù)發(fā)的一種獨(dú)立預(yù)后因素，血清CYFRA21-1增高還可見于膽道癌、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌等腫瘤性疾病[13]。DLL4-Notch信號通路是影響腫瘤血管生成的重要信號通路，DLL4是唯一特異性存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞的Notch 配體，可調(diào)控血管萌發(fā)和分支的形態(tài)。DLL4只存在于內(nèi)皮細(xì)胞的表面，在腫瘤組織中呈現(xiàn)高表達(dá)狀況，可促進(jìn)腫瘤生長；阻斷DLL4信號，可能起到協(xié)同抑制腫瘤生長的作用[14]。Notch通過鄰近細(xì)胞間的相互作用來調(diào)控細(xì)胞的生物學(xué)行為；Notch1的異?；罨赡苁羌?xì)胞過度增殖和侵襲[15]。

與自身抗原、血清學(xué)標(biāo)志物相比，自身抗體有其重要的優(yōu)勢，比如血清樣本易獲得、半衰期較長、反應(yīng)靈敏、操作簡便等[16]。本研究Pearson相關(guān)性分析顯示肺癌患者的CYFRA21-1、DLL4、Notch表達(dá)陽性率與分化類型、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移都呈現(xiàn)相關(guān)性(P<0.05)；Logistic回歸分析顯示分化類型、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為影響CYFRA21-1、DLL4、Notch表達(dá)的主要因素(P<0.05)。同時(shí)有研究顯示，采用自身抗體聯(lián)合檢測的方法，可提高惡性腫瘤的診斷靈敏度與特異性，增加檢測效能[17]。本研究也存在一定的不足，沒有納入良性肺部疾病患者，CYFRA21-1、DLL4、Notch陽性標(biāo)準(zhǔn)范圍比較窄，可能影響判定效果，將在后續(xù)研究中深入探討。

總之，CYFRA21-1與自身抗體DLL4、Notch在肺癌患者中呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，與患者的病理分化類型、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性。