連 元 邱新平 王革麗 劉楠楠 楊 奇

胃癌發(fā)病率和死亡率都比較高，也是影響我國健康的重大常見疾病[1-2]。大多數(shù)病患者就診時已到了中晚期，使得該病患者的5年生存率一般不超過20%，為此需要有效與特異的生物標志物來早期發(fā)現(xiàn)胃癌以及評估患者的預后意義重大[3]。傳統(tǒng)的腫瘤標志物是輔助診斷胃癌的非侵入性檢查方法，但多數(shù)標志物的敏感性不高[4]。同時當前胃癌的具體發(fā)病機制還不明確，是多步驟、多基因、多階段參與的細胞遺傳性疾病，涉及到錯配修復基因突變、癌基因激活、抑癌基因失活等[5]。晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(the Receptor of Advanced Glycation Endproducts,RAGE)是1種由400多個氨基酸組成的跨膜蛋白，也是啟動炎性和免疫反應的重要膜蛋白，在促進機體免疫調(diào)節(jié)、血管生成和心肌能量代謝等均發(fā)揮著重要的作用[6-7]。本文具體探討與分析了血清可溶性RAGE(serum RAGE，sRAGE)及RAGE在胃癌患者中的臨床意義，希望有助于是深入了解胃癌的發(fā)生發(fā)展機制。現(xiàn)總結(jié)報告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象

選擇2016年8月至2019年6月在我院手術(shù)切除的78例胃癌患者(胃癌組)與78例胃良性腫瘤患者(良性組)，納入標準：所有病例診斷均經(jīng)術(shù)后病理證實；醫(yī)院倫理委員會批準了此次研究；患者術(shù)前均未行放化療及免疫治療；既往沒有進行其他損傷腸膜的手術(shù)史；首次進行手術(shù)治療。排除標準：臨床與病理資料缺乏者；標本資料無法進行病理分析者。

在78例胃癌患者中，男性40例，女性38例；年齡43～78歲，其中年齡≤60歲 35例，>60歲43例；腫瘤直徑≤5 cm 40例，>5 cm 38例；組織學分化程度：高分化22例，中分化28例，低分化28例；臨床分期：Ⅰ～Ⅱ期 50例，Ⅲ～Ⅳ期28例；漿膜浸潤30例；病理類型：腺癌70例，鱗癌8例。

在78例胃良性腫瘤患者中，男性39例，女性39例；年齡42～79歲，其中年齡≤60歲34例，>60歲44例。

1.2 RAGE表達檢測

取所有患者的胃癌組織標本，切除的組織標本經(jīng)10%福爾馬林液固定后，制成4 μm切片，蒸餾水浸泡后抗原修復，滴加一抗RAGE(美國，1∶200稀釋)，室溫孵育60 min，滴加生物素標記的二抗(羊抗兔IgG)，室溫孵育10 min。P滴加鏈霉菌抗生物素一過氧化物酶溶液，室溫孵育10 min，采用DAB顯色，自來水沖洗，蘇木精復染，酒精脫水干燥，免疫結(jié)果由兩位有經(jīng)驗的病理科醫(yī)師分別判讀，采用雙盲法進行陽性判斷，以兩者意見達到一致為標準，若有不一致請上級病理科醫(yī)生進行判定。

1.3 sRAGE表達檢測

取所有患者的空腹血液學樣本，低溫離心后分離上層血清，采用酶聯(lián)免疫法檢測sRAGE表達水平。

1.4 調(diào)查內(nèi)容

調(diào)查所有患者的病歷與病理資料，記錄患者的性別、年齡、腫瘤直徑、分化程度、臨床分期、病理類型、漿膜浸潤情況。

1.5 統(tǒng)計方法

2 結(jié)果

2.1 sRAGE表達水平對比

胃癌組的sRAGE表達水平顯著高于良性組(P<0.05)，見表1。

表1 兩組sRAGE表達水平對比

2.2 胃癌患者sRAGE表達水平與其臨床病理特征的相關(guān)性

在胃癌組中，sRAGE表達水平與患者年齡、性別、病理類型等無相關(guān)性(P>0.05)，與臨床分期、腫瘤直徑、漿膜浸潤、組織學分化程度等有顯著相關(guān)性(P<0.05)，見表2。

表2 胃癌患者組織中sRAGE表達與臨床病理特征的相關(guān)性

2.3 RAGE表達陽性率對比

胃癌組RAGE表達陽性率為83.3%，顯著高于良性組的20.5%(P<0.05)，見表3。

2.4 影響因素分析

以RAGE表達陽性率作為因變量，以胃癌患者的臨床分期、腫瘤直徑、漿膜浸潤、組織學分化程度作為自變量，logistic分析顯示臨床分期、腫瘤直徑、漿膜浸潤為影響患者RAGE表達陽性率的主要因素(P<0.05)，見表4。

表3 兩組RAGE表達陽性對比(例，%)

表4 影響胃癌患者RAGE表達陽性率的主要因素

3 討論

胃癌是最常見的惡性腫瘤之一，胃癌的總體預后隨著外科手術(shù)及輔助治療手段的不斷更新改進已經(jīng)有了很大的改善。但是很多患者在術(shù)后容易發(fā)生復發(fā)與轉(zhuǎn)移，從而直接影響患者的預后[8]。常規(guī)診斷方法的準確性有限，使得胃癌患者容易漏診，為此尋找新的診斷方法與手段意義重大[9]。

RAGE由404個氨基酸組成，分別由細胞外段、跨膜段、細胞內(nèi)段等組成，可參與生命過程中一系列重要的進程，包括早期胚胎發(fā)育、腫瘤發(fā)生發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移、細胞增殖、細胞凋亡、細胞死亡、脂肪代謝等[10-11]。已有研究顯示RAGE表達水平在惡性腫瘤患者和正常人中不同，可作為診斷包括肺癌在內(nèi)的多種疾病的標志物[12]。本研究顯示胃癌組的sRAGE表達水平顯著高于良性組；胃癌組的RAGE表達陽性率為83.3%，顯著高于良性組的20.5%，表明胃癌患者血液中sRAGE呈現(xiàn)高表達，組織中RAGE表達陽性率高。

胃癌是癌癥相關(guān)死亡率的重要惡性腫瘤。以手術(shù)為主的綜合治療使得早期胃癌患者的5年生存率在50%以上，因此及早發(fā)現(xiàn)胃癌可明顯減少胃癌的死亡率[13]。RAGE是免疫球蛋白超家族的一員，在單核細胞、巨噬細胞、血管內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞、成纖維細胞等細胞的胞膜中均存在表達[14-15]。sRAGE是RAGE的內(nèi)源分泌型，與RAGE相比缺少跨膜段，在炎癥相關(guān)疾病與免疫失調(diào)相關(guān)疾病中，可被當做一種可靠的炎性生物標記物[16-17]。 RAGE可促進釋放大量炎性因子TNF-α和IL-6等，參與到機體的炎性反應和免疫應答等過程中，也可能通過調(diào)節(jié)免疫應答作用在惡性腫瘤的發(fā)病機制中發(fā)揮重要作用[18-20]。本研究顯示在胃癌組中，sRAGE表達水平與患者的年齡、性別、病理類型等無相關(guān)性，與臨床分期、腫瘤直徑、漿膜浸潤、組織學分化程度等有顯著相關(guān)性；logistic分析顯示臨床分期、腫瘤直徑、漿膜浸潤為影響患者RAGE表達陽性率的主要因素，表明胃癌患者的臨床病理特征可影響sRAGE及RAGE表達水平。不過本研究也有一定的不足，sRAGE及RAGE對于胃癌的調(diào)控可能是多靶點和多方向的，本研究還有待進一步深入分析。

總之，胃癌患者血液中sRAGE呈現(xiàn)高表達，組織中RAGE表達陽性率高，與患者的臨床分期、腫瘤直徑、漿膜浸潤、組織學分化程度等顯著相關(guān)。