司 華 閆 燦 曾憲煥

相關(guān)癌癥調(diào)查報(bào)告顯示：2018年肺癌新發(fā)病例及死亡病例均居惡性腫瘤第一位，而原發(fā)性肺癌中非小細(xì)胞肺癌占比達(dá)到80%左右，其治療方式主要以手術(shù)治療、放療、化療以及聯(lián)合治療等[1-2]。近年來，基因分子藥物的應(yīng)用為肺癌的治療提供了新思路，因此其新的生物標(biāo)志物的尋找以及在此基礎(chǔ)上采取靶向藥物的治療是未來肺癌治療的研究重點(diǎn)[3]。細(xì)胞外間質(zhì)韌黏素-C(Tenascin-C,TN-C)屬于細(xì)胞外機(jī)制糖蛋白，在炎性反應(yīng)中高表達(dá)，可調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖與分化，在惡性腫瘤發(fā)生、進(jìn)展過程中也呈高表達(dá)[4]。Ki-67是與細(xì)胞周期調(diào)控密切相關(guān)的蛋白，在大多數(shù)腫瘤發(fā)生、發(fā)展以及患者預(yù)后評(píng)估中至關(guān)重要，相關(guān)研究顯示，其可能在NSCLC轉(zhuǎn)移及腫瘤細(xì)胞侵襲過程中具有重要作用[5-6]。但目前這兩個(gè)指標(biāo)的表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌臨床病理學(xué)特征相關(guān)研究仍為該腫瘤的熱點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選擇南陽市第二人民醫(yī)院2017年12月至2019年12月收治的459例非小細(xì)胞肺癌患者作為本次研究對(duì)象，所有患者均經(jīng)臨床病理學(xué)證實(shí)為非小細(xì)胞肺癌。收集所有患者手術(shù)后病理組織樣本。所有患者中，男性324例，女性135例；年齡30～76歲，平均(49.71±4.22)歲；組織學(xué)類型：鱗癌243例，腺癌216例；分化程度：高度分化94例，中度分化202例，低度分化163例；腫瘤位置：周圍型238例，中央型221例；轉(zhuǎn)移情況：淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移158例，無轉(zhuǎn)移例301；腫瘤直徑：1～7 cm，平均(2.83±0.63)cm；TMN分期：Ⅰ期～Ⅳ期。

1.2 免疫組化檢測TN-C和ki-67陽性表達(dá)

取非小細(xì)胞肺癌患者病理組織標(biāo)本，常規(guī)病理學(xué)切片，然后采用TN-C和ki-67免疫組化試劑盒(購自美國Thermo fisher Scientific)進(jìn)行染色，具體步驟根據(jù)試劑盒說明進(jìn)行操作，最后DBA顯色，顯微鏡下觀察并拍照。

蛋白陽性判定標(biāo)準(zhǔn)[5]：①陰性(-)：胞核與胞質(zhì)中均無明顯棕黃色顆粒出現(xiàn)；②弱陽性(+)：胞核或胞質(zhì)中出現(xiàn)明顯棕黃色小顆粒；③中陽性(++)：胞核或胞質(zhì)中出現(xiàn)明顯棕黃色大顆粒；④強(qiáng)陽性(+++)：胞核或胞質(zhì)中出現(xiàn)明顯棕褐色大顆粒。判定結(jié)果：陽性：(++)、(+++)和(+)例數(shù)之和；陰性：(-)例數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析，計(jì)數(shù)資料以率(%)表示，比較采用卡方檢驗(yàn)(χ2)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 TN-C陽性表達(dá)結(jié)果與臨床病理特征關(guān)系

TN-C在不同性別、年齡、組織學(xué)類型、分化程度以及腫瘤位置非小細(xì)胞肺癌患者中的陽性表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；而與非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者相比，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者TN-C陽性表達(dá)率顯著升高(P<0.05)；與腫瘤直徑<3 cm患者相比，腫瘤直徑≥3 cm的患者TN-C陽性表達(dá)率顯著升高(P<0.05)；與Ⅰ～Ⅱ期患者相比，Ⅲ～Ⅳ期患者TN-C陽性表達(dá)率顯著升高(P<0.05)。見表1。

Ki-67在不同性別、年齡、腫瘤位置、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及腫瘤直徑的非小細(xì)胞肺癌患者中的陽性表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；而與鱗癌患者相比，腺癌患者Ki-67陽性表達(dá)率顯著升高(P<0.05)；與中、高分化程度腫瘤患者相比，低分化程度患者Ki-67陽性表達(dá)率顯著升高(P<0.05)；與Ⅰ～Ⅱ期患者相比，Ⅲ～Ⅳ期患者Ki-67陽性表達(dá)率顯著升高(P<0.05)。見表1。

2.2 TN-C和Ki-67表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌病理學(xué)特征的相關(guān)性分析

相關(guān)性分析結(jié)果顯示：TN-C表達(dá)陽性率與非小細(xì)胞肺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤直徑以及TMN分期均呈正顯著相關(guān)性(γ>0，P<0.05)，Ki-67表達(dá)陽性率與非小細(xì)胞肺癌患者分化程度和TMN分期均呈正顯著相關(guān)性(γ>0，P<0.05)，與組織學(xué)類型無顯著相關(guān)性(P>0.05)。見表2。

3 討論

肺癌早期發(fā)病隱匿，且易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，因此其早期診斷較為困難，中晚期患者治愈率及生存率均較低[7-8]。目前該腫瘤治療方式以手術(shù)、放化療以及免疫治療為主[9-10]。

近年來癌癥標(biāo)志性指標(biāo)研究對(duì)其臨床診斷的發(fā)展具有積極意義，非小細(xì)胞肺癌標(biāo)志指標(biāo)，如：基質(zhì)金屬蛋白酶家族蛋白(MMPs)、環(huán)氧化酶(Cyclooxygenase,COX)等均為臨床診治的研究熱點(diǎn)內(nèi)容[11-12]。但是標(biāo)志性指標(biāo)的診斷仍存在局限性，因此新指標(biāo)及聯(lián)合靶標(biāo)的應(yīng)用是非小細(xì)胞肺癌診治中仍待解決的問題。TN-C是1種細(xì)胞外機(jī)制糖蛋白，相關(guān)研究表明，該蛋白在腫瘤組織或腫瘤細(xì)胞中呈高表達(dá)狀態(tài)，并對(duì)腫瘤細(xì)胞侵襲、遷移具有促進(jìn)作用[13]。Ki-67是1種增殖細(xì)胞的相關(guān)抗原，其功能與細(xì)胞有絲分裂以及細(xì)胞增殖等過程密切相關(guān)，相關(guān)研究顯示：Ki-67增殖指數(shù)與非小細(xì)胞患者的生存期成反比[14]。

表1 不同臨床病理特征非小細(xì)胞肺癌組織中TN-C、Ki-67陽性表達(dá)差異/例

表2 TN-C和Ki-67表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌病理學(xué)特征相關(guān)性分析

本研究采用免疫組化檢測所有患者病理組織樣本中TN-C和ki-67陽性率，從而進(jìn)一步分析TN-C和Ki-67的表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌臨床病理特征的相關(guān)性，結(jié)果顯示：TN-C在不同性別、年齡、組織學(xué)類型、分化程度以及腫瘤位置非小細(xì)胞肺癌患者中其陽性表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而與非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者相比，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者TN-C陽性表達(dá)率顯著升高(P<0.05)，與腫瘤直徑<3 cm患者相比，腫瘤直徑≥3 cm的患者TN-C陽性表達(dá)率顯著升高(P<0.05)，與Ⅰ～Ⅱ期患者相比，Ⅲ～Ⅳ期患者TN-C陽性表達(dá)率顯著升高(P<0.05)，表明TN-C的表達(dá)在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤直徑<3 cm以及Ⅲ～Ⅳ期患者中呈現(xiàn)顯著陽性表達(dá)，對(duì)以上病理特征具有準(zhǔn)確診斷率。另外，Ki-67在不同性別、年齡、腫瘤位置、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及腫瘤直徑的非小細(xì)胞肺癌患者中其陽性表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而與腺癌患者相比，鱗癌患者Ki-67陽性表達(dá)率顯著升高(P<0.05)，與中、高分化程度腫瘤患者相比，低分化程度患者Ki-67陽性表達(dá)率顯著升高(P<0.05)，與Ⅰ～Ⅱ期患者相比，Ⅲ～Ⅳ期患者Ki-67陽性表達(dá)率顯著升高(P<0.05)，表明：Ki-67的表達(dá)在組織學(xué)類型為鱗癌、低分化程度以及Ⅲ～Ⅳ期患者中呈現(xiàn)顯著陽性表達(dá)，對(duì)以上病理特征具有準(zhǔn)確診斷率。相關(guān)性分析結(jié)果顯示：TN-C表達(dá)陽性率與非小細(xì)胞肺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤直徑以及TMN分期均呈正顯著相關(guān)性(γ>0，P<0.05)，Ki-67表達(dá)陽性率與非小細(xì)胞肺癌患者分化程度和TMN分期均呈正顯著相關(guān)性(γ>0，P<0.05)，與組織學(xué)類型無顯著相關(guān)性(P>0.05)。

總之，TN-C和Ki-67的表達(dá)均與非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生、進(jìn)展等密切相關(guān)，可作為該腫瘤臨床診治的病理學(xué)依據(jù)。