黃榮，馬曉玲，舒適

(1.青海大學畜牧獸醫(yī)科學院，西寧 81000；2.青海大學農牧學院，西寧 81000)

薈萃分析(Meta-analysis)，又稱Meta分析，是對原始研究的再次定量研究、同一類問題的定量合成，屬于二次研究。該分析方法要求具備系統(tǒng)性、可重復性及客觀性[1,2]。它也是一種綜合多個研究結果的分析思路或規(guī)則，根據研究結果的類型和不同的分析目的可有數(shù)目繁多的統(tǒng)計方法供選擇[3,4]。Meta分析最早是由英國教育心理學家Glass提出的[5]，目前已廣泛用于心理學、教育學、臨床醫(yī)學和流行病學的醫(yī)學健康領域，并為臨床科研提供可靠的數(shù)據[6，7，8]。Meta分析是循證醫(yī)學大量文獻分析的核心方法[9,10]。在20世紀90年代，Meta分析被引入到了生態(tài)學領域，得到了生態(tài)學界的廣泛關注，并且研究者將Meta分析方法運用于生態(tài)學野外實驗的評價和分析中。隨著生態(tài)學科的發(fā)展，Meta分析在全球變化生態(tài)學和應用生態(tài)學領域也得到了長足的發(fā)展[11]。Meta分析在1998年首次由彭少麟等人引入我國生態(tài)學界的研究領域，之后該分析方法被廣大的生態(tài)學者熟知并應用[12]。Meta分析還應用于經濟學研究，對解決實證研究結果不一致的問題提供了方法途徑[13]。而在管理領域研究方面，如產品創(chuàng)新與企業(yè)績效的相關關系、組織學習與組織績效、創(chuàng)新與企業(yè)績效等，也采用Meta分析的方法[14]。但是在以生產性能評估為核心的傳統(tǒng)動物營養(yǎng)領域中由于數(shù)據資料不完善等原因，Meta分析尚未得到推廣和應用[15]。Meta分析能夠增加統(tǒng)計學檢驗效能、定量估計研究效應、提出新的研究方向和臨床決策。應用Meta分析也能夠對文獻質量嚴格把關，及時發(fā)現(xiàn)過去研究中存在的不足之處，進而得到全面、量化、可靠的結論。同時，Meta分析能夠解決爭議大、研究數(shù)量多、同時具有明確對比的科研問題[15,16]。基于此，本文就Meta分析的概念與分類、原理與基本流程以及應用進行以下綜述。

1 Meta分析的概述

1.1 Meta分析的概念

Meta分析是現(xiàn)代科學研究中系統(tǒng)評價的重要方法，狹義的Meta分析是指一種對已有的資料進行最佳利用的方法，而廣義的Meta分析是指對資料進行定量合成的統(tǒng)計處理方法。Meta分析可以根據其分析特征翻譯為元分析、薈萃分析、匯后分析、匯總分析、整合分析、二次分析、再分析等，也可以音譯為梅塔分析或媒太分析等，但是直譯的“Meta”分析最為貼切[17]。該方法源于著名統(tǒng)計學家Pearson在1904年的“血清接種預防腸熱病的療效”研究，以及Fisher在1920年“合并P值”的思想。而在1976年，心理學家Glass進一步將之發(fā)展為“合并統(tǒng)計量”，并正式將這類分析命名為“Meta-analysis”[16,18，19，20]。此方法的核心思想是認為科學的進步依賴于從一批研究里提煉普遍性結論[21]。Meta分析所合并的結果指標有二分類數(shù)據、連續(xù)性數(shù)據、有序數(shù)據、計數(shù)或率，以及時間—事件數(shù)據五大類。其中，對連續(xù)性數(shù)據進行Meta分析時，合并的統(tǒng)計量為均數(shù)差(mean difference，MD)，即兩組間均數(shù)的差值[22]。Meta分析本質上是一種觀察性研究，就是將相同研究目的的多個研究結果匯總，并分析評價其合并效應量的一系列過程，即通過綜合多個研究結果而提供一個量化的平均效果或聯(lián)系來回答問題[19]。Meta分析主要內容包括綜合檢驗(對某一檢驗假設的若干個別檢驗統(tǒng)計量進行綜合檢驗)、綜合評估實驗效應(提供效應大小的統(tǒng)計指標)、如是相關性研究(可綜合評價相關效應的大小)。此外，有時還作齊性檢驗(檢驗各個結果是否一致，討論產生不一致的原因)和敏感性分析(按不同研究特征分為亞組再進行綜合)[23]。

相對于傳統(tǒng)的文獻綜述，Meta分析具有以下主要的特點：第一，有明確的研究問題和研究假設，對原始研究的異質性能夠做出判斷；第二，分析對象是某研究領域的研究中尚未闡明，尤其是有爭議或結論矛盾的問題；第三，Meta分析的數(shù)據來源于文獻資料的統(tǒng)計結果，如：率、均數(shù)等；第四，分析過程是一個基于有效全面的檢索策略，篩選評價文獻后合并同質統(tǒng)計量進行定量分析的過程，可以對每個研究報告中的統(tǒng)計量進行加權合并，得出相關臨床研究結果的更精確估計；第五，Meta分析有其自身的質控措施，能夠盡可能避免人為造成的一些選擇性、樣本大小及研究異質性的偏倚；第六，Meta分析可以利用合并資料后樣本擴大的優(yōu)勢形成新的研究假設，并推測出單獨驗證這一假設的研究所需樣本大小，為進一步研究提供依據[24-26]。

1.2 Meta分析的分類

近年來隨著研究方法的進展，Meta分析越來越多的應用于各個研究領域，也在動物研究中得到應用。常規(guī)Meta分析的優(yōu)勢在于提高統(tǒng)計效能、定量綜合評價效應的平均水平及發(fā)現(xiàn)以往研究的不足之處，提出新的研究問題，為進一步研究指明方向[8]。應用的類型包括網狀Meta分析、累積Meta分析、劑量—反應Meta分析、基于模型的Meta分析、前瞻性Meta分析和診斷性Meta分析等。

網狀Meta分析的出現(xiàn)大大提升了單個研究的價值，有利于現(xiàn)有研究數(shù)據的充分利用[27]。這種分析的最大優(yōu)勢在于可以量化、比較同類疾病在不同干預措施下，對結果進行合并直接比較和間接比較，并按照某一結果指標的優(yōu)劣排序，從而優(yōu)選最佳的方案[28]。

累積Meta分析指各原始研究按照某個變量的變化，依次引入Meta分析過程的一種獨特的分析方法[29]。它在傳統(tǒng)Meta分析的基礎上又具備新的特點：第一，高效性，累積Meta分析可以通過整合同類臨床研究，擴大樣本容量，減少隨機誤差的發(fā)生，大大提高統(tǒng)計效能[30]；第二，整合性，可簡化復雜多樣的數(shù)據，總結出合理、可靠的結論；第三動態(tài)性，可以按照某種特定順序進行累積分析，每加入一項研究即再次執(zhí)行Meta分析，可反映研究結果隨某種特定順序的動態(tài)變化趨勢；第四指導性，可以通過合并分析易發(fā)現(xiàn)單項研究難以察覺的問題,對臨床研究的深入和科研思維的開拓具有一定的指導意義[31]。

劑量—反應Meta分析是對多個原始劑量—反應研究進行綜合匯總，得出一個合并的劑量—反應關系效應值，并繪制線性或非線性曲線的一類Meta分析[32]。劑量—反應Meta分析在探討自變量與因變量關系中起著十分重要的作用[33]，相比傳統(tǒng)的二分類及連續(xù)性資料Meta分析，劑量—反應Meta分析可同時處理3個及以上組別的數(shù)據，并直接估計暴露因素與疾病的劑量—反應關系[34,35]。

基于模型的Meta分析是通過收集近年來臨床研究文獻的數(shù)據，建立數(shù)學模型進行分析的一種定量分析方法。它是成為系統(tǒng)評價藥物有效性和安全性的重要工具，為藥物研發(fā)中的決策、藥物治療學特征的描述、給藥方案的制定等提供依據?；谀Ｐ偷腗eta分析納入的文獻種類更為寬泛，既可以關聯(lián)小樣本數(shù)據，也可以對大數(shù)據進行分析。而且，具有預測和模擬的功能，能夠提供更大的信息量，發(fā)現(xiàn)更多的影響因素，更好為個體化治療提供依據。另外，它還包含更完整的科學研究過程等優(yōu)點[36-39]。

前瞻性Meta分析是指在隨機對照試驗的結果尚未出來之前，先進行系統(tǒng)檢索、評價和制定納入及排除標準的一種Meta分析。前瞻性Meta分析在研究開始之前或者進行中就制定好了計劃，可以避免各研究間出現(xiàn)較大的差異，同時具有個體數(shù)據Meta分析的優(yōu)點[40]。

診斷性Meta分析主要是為評價某種診斷措施對目標疾病的準確率，多為對目標疾病的敏感性、特異性進行評價，報道似然比、診斷比值比等[40]。

1.3 Meta分析的原理和基本步驟

Meta分析從本質上來講是定量化的綜述，可以對某個問題的多個獨立結果進行系統(tǒng)性的定性或定量。研究者不是進行原始的研究，而是對研究已獲得的結果進行綜合分析。一般收集有關該問題的全部研究成果(包括尚未發(fā)表的和已發(fā)表的)，再對這些研究成果進行評估。舍掉不可接受的研究成果，最后用適當?shù)慕y(tǒng)計方法進行合并分析。在此過程中的統(tǒng)計方法可以分為兩步：第一，計算各個獨立研究的綜合統(tǒng)計量；第二，進行異質性檢驗和對每個研究報告中的統(tǒng)計量(效應大小)進行加權合并[26,41]。

Meta分析的步驟包括三個階段的總體思路和七個基本步驟(圖1)[8]，三個階段分別為設計準備階段、數(shù)據收集階段和分析總結階段。七個基本步驟分別為提出問題(宜簡單明確)，擬定研究方案；構建檢索策略，系統(tǒng)檢索去重后形成原始文獻庫；設定文獻的納入標準和排除標準，按照系統(tǒng)評價和Meta分析優(yōu)先報告的條目(Preferred ReportingItems for Systematic Review and Meta-analysis,PRIS-MA)文獻收集流程，篩選并納入符合標準的文獻；對納入的文獻進行研究設計質量評價(如有無對照、是否隨機分組等)；制表、錄入、提取數(shù)據及建立分析數(shù)據庫；對數(shù)據進行定性綜合及定量綜合(Meta分析、Meta回歸)，最后分析研究結果，得出綜合結論(統(tǒng)計學處理)，撰寫研究報告或論文[8,21,41]。

圖1 Meta分析步驟圖

2 Meta分析在動物中的應用

Meta分析作為一種統(tǒng)計方法，相比于醫(yī)學領域，在我國獸醫(yī)與畜牧中的應用是處于剛剛起步階段，尤其在動物營養(yǎng)研究領域中，而針對奶牛Meta分析和定量綜述的研究僅發(fā)表了150篇[42]。Oetzel[43]和Enevoldsen[44]研究了奶牛產乳熱因素，研究發(fā)現(xiàn)日糧中的S離子的濃度和陰陽離子平衡與乳熱發(fā)生是最密切相關的兩個營養(yǎng)因素，而且陰離子陽離子平衡對這種疾病的發(fā)生具有強烈的線性影響。李飛[45]等人利用Meta分析方法優(yōu)化泌乳奶牛日糧粗飼料中性洗滌纖維和瘤胃可降解淀粉供應，為保障奶牛的瘤胃健康與高產提供理論依據。張千等人[46]利用Meta分析評估斷奶應激對犢牛免疫功能的影響，發(fā)現(xiàn)犢牛血液中觸珠蛋白和纖維蛋白原濃度在犢牛斷奶后2周仍高于斷奶前水平，可以考慮將其作為潛在應激標志物應用于今后反芻動物應激反應的研究中。同時，該研究為犢牛的健康管理、疾病預防以及犢牛斷奶應激和免疫功能相關的研究提供了科學依據。

Meta分析在其他動物研究中也得到了應用。郭振等人[47]通過Meta分析研究了中鏈甘油三酯干預對大鼠和小鼠體重影響，研究發(fā)現(xiàn)中鏈甘油三酯的干預可以減輕大鼠或小鼠的體重，Amlan[48]等人應用Meta分析研究了低質羊草與羊采食量的關系，研究表明補葉量或葉的質量與基礎牧草質量的交互作用能影響綿羊基礎日糧與總日糧的采食量及生長發(fā)育，及動物數(shù)量性狀基因座(Quantitative Trait Locus,QTL)的定位[49]。雖然Meta分析應用在動物QTL定位的研究起步較晚且研究的數(shù)量不多，但是已經廣泛的應用到牛、豬、羊[50]和雞[51]等主要的家畜物種。

Meta分析還應用于動物飼料方面的研究。Sterk[52]使用亞組分析和Meta回歸分析研究了日糧營養(yǎng)組成對乳汁不同脂肪酸(Fatty Acid,FA)比例的影響，研究發(fā)現(xiàn)該影響取決于脂肪的種類和形式。Knapp[53]利用Meta回歸分析方法發(fā)現(xiàn)，提高日糧粗脂肪可以降低每單位能量校正乳的甲烷釋放量，這對于提高產奶量的研究提供了一定的參考價值。徐博成[54]等人在研究發(fā)酵飼料對斷奶仔豬和生長育肥豬生長性能、腹瀉的影響中運用Meta分析，研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵飼料總體上可以提高豬的平均日增重(Average Day Gain,ADG)，并能降低料重比和腹瀉率。另外，還有研究人員采用Meta分析法對在青貯飼料中添加乳酸菌的效果進行分析，結果發(fā)現(xiàn)該方法可以減少青貯飼料中的乙酸生成，提高青貯飼料的品質[21]。

就動物疾病來說，雖然Meta分析方法的應用不是很廣泛，但是該方法對中藥治療奶牛乳房炎臨床試驗的系統(tǒng)評價研究，能夠為防治奶牛乳房炎提供更有價值的參考依據[55]。

隨著對Meta分析的深入研究，近幾年來Meta分析也被研究者應用到動物生殖生理方面的研究中。Dolecheck[56]等人運用Meta分析調查奶牛臨床或亞臨床乳腺炎與生殖性能之間的關系，結果發(fā)現(xiàn)奶牛乳腺炎的發(fā)病率與其繁殖性能之間存在可量化的關聯(lián)。目前對流行病學的Meta分析研究主要集中在單變量Meta分析，是因為流行病學本身的致病原因很復雜而且致病原因之間具有相關性[57]。Ran Xuhua[58]等人對我國奶牛病毒性腹瀉的發(fā)病率和流行率，通過系統(tǒng)的回顧和Meta分析進行研究，結果發(fā)現(xiàn)我國奶牛的病毒性腹瀉病的感染率雖然在研究數(shù)量上存在偏差，但是仍在不斷上升。

3 小結與展望

Meta分析是現(xiàn)代科學研究中系統(tǒng)評價的重要方法，而且作為一種統(tǒng)計方法，能增加統(tǒng)計學檢驗效能、定量估計研究效應、提出新的研究方向或臨床決策指導，而且Meta分析對文獻質量嚴格把關，能及時發(fā)現(xiàn)過去研究中存在的不足之處為目的得到全面、量化、可靠的結論以及解決爭議大、研究數(shù)量多、同時具有明確對比的科研問題。Meta分析雖然在其他方面得到廣泛的應用，但是在對動物方面的研究還處在初級階段[59]。隨著Meta分析應用領域逐漸的擴大，研究者也在奮力研究如何克服其局限性，使其不斷地改進和發(fā)展。經過統(tǒng)計學家和科研專家的精誠合作和不懈努力，Meta分析方法將會不斷地趨于成熟和易于使用，其功能也將會更強大，因而在今后的動物科研當中的應用也將會越來越廣泛。