陳劉鎮(zhèn) 王在國(guó) 鄭驚雷

東莞市人民醫(yī)院普外科 (廣東 東莞 523000)

乳腺癌根據(jù)基因表達(dá)的差異，分為四型，其中最常見(jiàn)的為Her-2過(guò)表達(dá)型，研究顯示Her-2的高表達(dá)是乳腺癌患者轉(zhuǎn)移的主要因素之一，而乳腺癌患者轉(zhuǎn)移又是患者死亡的因素[1]。目前關(guān)于Her-2高表達(dá)型乳腺癌的分子尚不清楚。p120ctn在正常的細(xì)胞中表達(dá)，但是在上皮性的惡性腫瘤中表達(dá)缺失，其表達(dá)缺失與腫瘤的侵襲增強(qiáng)、分化減弱以及患者預(yù)后差有密切的關(guān)系[2]。有研究表明，p63的缺失與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移也有密切的關(guān)系[3]。因此，本研究將選取我院2019年1月到2020年1月我院普外科收治的乳腺癌患者60例，進(jìn)行深入的對(duì)比研究，進(jìn)一步探討 p63、p120ctm在Her-2陽(yáng)性的乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取我院2019年1月至2020年1月普外科收治的乳腺癌患者60例，均為女性，病理分級(jí)：Ⅰ級(jí)9例，Ⅱ級(jí)11例，Ⅲ級(jí)19例。年齡45～75歲，平均年齡(58.36±6.29)歲。左側(cè)31例，右側(cè)29例。所有患者均在我院行乳腺癌根治術(shù)切除腫物，并在本院病理科檢查確診為乳腺癌，所有患者均行Her-2檢查，所有病例手術(shù)前均未進(jìn)行放療或化療，患者簽署知情同意書(shū)，并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 免疫組化方法 組織經(jīng)福爾馬林固定超過(guò)24h，浸蠟與石蠟包埋。將5μm厚度的組織切片放置載玻片上。用二甲苯脫蠟30min，并經(jīng)梯度酒精水化，隨后用PBS緩沖液沖洗干凈。用 0.3%過(guò)氧化氫浸泡10min消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，血清封閉15min。滴加第一抗體：除去血清，用1∶100的抗體4°C孵育過(guò)夜。PBS 沖洗3次，每次5min。加入生物素標(biāo)記的二抗，在37°C條件下繼續(xù)孵育30min；滴加DAB染色。蘇木精復(fù)染，樹(shù)膠封片。

1.3 結(jié)果判斷 p120ctn結(jié)果判定：在癌細(xì)胞細(xì)胞膜中呈陽(yáng)性表達(dá)，陽(yáng)性細(xì)胞率≥75% 則為正常表達(dá)，＜75% 則為減弱，若陽(yáng)性定位于胞質(zhì)，且陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≥10% 則為異位表達(dá)。膜表達(dá)減弱及異位表達(dá)統(tǒng)一定義為異常表達(dá)。P63、Her-2染色結(jié)果判定：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≥30% 為陽(yáng)性，＜30%為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，定性資料的組間比較采用χ2檢驗(yàn)，著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)α值規(guī)定為0.05，定量資料比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 P63 、P120ctn在Her-2陰性乳腺癌中的表達(dá) 在21例Her-2陰性組中，P63的陽(yáng)性表達(dá)率為38.09%，P120ctn的異位表達(dá)率為47.62%，與Her-2陽(yáng)性組比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表1。

表1 P63 、P120ctn在Her-2陰性乳腺癌中的表達(dá)

2.2 P63 、P120ctn的表達(dá)與Her-2陽(yáng)性組中乳腺癌患者病理分級(jí)的關(guān)系 在39例Her-2陽(yáng)性患者中，隨著乳腺癌病理分級(jí)的增加，P63的陽(yáng)性率增加，在Ⅲ中的陽(yáng)性率達(dá)94.74%，而P120ctn異位表達(dá)率亦隨之增加，Ⅲ中的異位率達(dá)84.21%，組間比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表2。

表2 P63 、P120ctn的表達(dá)與Her-2陽(yáng)性組中乳腺癌患者病理分級(jí)的關(guān)系

3 討論

乳腺癌是較為常見(jiàn)的惡性腫瘤，而乳腺癌患者出現(xiàn)轉(zhuǎn)移和侵潤(rùn)是影響患者預(yù)后的主要因素。Her-2是表皮生長(zhǎng)因子受體家族的成員，具有酪氨酸蛋白酶活性，Her-2的高表達(dá)，不但增加了乳腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力，而且與雌激素和孕激素受體狀態(tài)及患者不良預(yù)后有關(guān)[4]。Her-2蛋白的過(guò)表達(dá)促進(jìn)了細(xì)胞的惡性增殖，Her-2的增高也是患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。 同時(shí)也被研究證實(shí)是目前可以對(duì)乳腺癌患者靶向治療的分子靶點(diǎn)之一。因此，本研究將進(jìn)一步探討Her-2陽(yáng)性的乳腺癌患者潛在相關(guān)的靶向分子。

本研究進(jìn)行了60例的乳腺癌組織P120ctn的檢測(cè)和相關(guān)分析，結(jié)果顯示，在 Her-2陽(yáng)性組中，P120ctn異位表達(dá)率為均明顯高于21例Her-2陰組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P120ctn與Her-2的表達(dá)具有明顯的相關(guān)性，可能是因?yàn)镻120ctn表達(dá)與乳腺癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為有關(guān)。因此在Her-2陽(yáng)性的乳腺癌組織中，病理分級(jí)較高，并且在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中，P120ctn蛋白通常具有較高的異位表達(dá)率[5]。國(guó)外的研究顯示，P120ctns是惡性腫瘤患者早期復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素[6]。P120ctn是新發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞內(nèi)傳導(dǎo)分子和一種新型的靶分子，E與-Cadherin分子結(jié)合而產(chǎn)生生物效應(yīng)。P120ctn在正常細(xì)胞中表達(dá)，并且可以與E-Cadherin蛋白一起維護(hù)細(xì)胞的粘附功能。然而研究證實(shí)，P120ctn控制的E-Cadherin的表達(dá)水平, P120ctn的表達(dá)下降之后，可以下調(diào)E-Cadherin的表達(dá)，導(dǎo)致細(xì)胞間黏附能力下降，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞間的侵襲和轉(zhuǎn)移的發(fā)生[7]。研究表明，在分化較差、惡性程度較高的惡性腫瘤患者中，P120ctn多異常表達(dá)，而異常表達(dá)P120ctn是腫瘤發(fā)生侵襲、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的主要因素[8]。大量研究顯示, P120ctn的異常表達(dá)于人體多種實(shí)體腫瘤如胃癌、肺癌、乳腺癌中，并與腫瘤的惡性生物學(xué)行為均有關(guān)[9]，本研究結(jié)果也顯示，P120ctn異位表達(dá)率與Her-2的表達(dá)具有密切的相關(guān)性，進(jìn)一步與病理分級(jí)的研究也發(fā)現(xiàn)，在39例Her-2陽(yáng)性患者中，隨著乳腺癌病理分級(jí)的增加，P120ctn異位表達(dá)率亦隨之增加，Ⅲ中的異位率達(dá)84.21%，可見(jiàn)，P120ctn是反映Her-2陽(yáng)性乳腺癌惡性腫瘤行為的一項(xiàng)指標(biāo)之一。P63是腫瘤的P53家族成員之一，具有高度的同源性，且與腫瘤的轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系[10]，P63正常表達(dá)于肌上皮細(xì)胞中，雖然與P53有同源性，但是P53被研究證實(shí)是一種抑癌基因，但P63在腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用機(jī)制尚存在爭(zhēng)議[11]。本研究結(jié)果顯示，在21例Her-2陰組中，P63的陽(yáng)性表達(dá)率38.09%；在39例Her-2陽(yáng)性患者中，隨著乳腺癌病理分級(jí)的增加，P63的陽(yáng)性率增加，在Ⅲ中的陽(yáng)性率達(dá)94.74%。P63表達(dá)與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系，反映乳腺癌具有更高的侵襲性和容易轉(zhuǎn)移的特點(diǎn)。

綜上所述，P63的高表達(dá)以及P120ctn的異常表達(dá)與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展起到了協(xié)同作用。聯(lián)合檢測(cè)對(duì)評(píng)估患者預(yù)合、靶向治療具有重要的臨床意義。深入研究乳腺癌的分子分型生物標(biāo)志，以期提供更為準(zhǔn)確有效的治療，更重要的參考依據(jù)。