丁立云, 陳文靜, 賀鳳蘭, 傅雪軍, 傅義龍, 付輝云
(1.江西省水產(chǎn)科學(xué)研究所,江西南昌330039;2.南昌市疾病預(yù)防控制中心,江西南昌330038;3.江西省水產(chǎn)技術(shù)推廣站,江西南昌330046)
脂肪是魚(yú)類正常生長(zhǎng)發(fā)育所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和能量來(lái)源, 具有重要的生理功能和作用(NRC,2011)。研究表明,魚(yú)油因具有均衡的脂肪酸組成, 一直是魚(yú)類配合飼料中理想的脂肪源(劉洋等,2018)。 然而,隨著魚(yú)油價(jià)格不斷攀升,全球魚(yú)粉、 魚(yú)油資源短缺的現(xiàn)狀以及極易被空氣氧化的風(fēng)險(xiǎn)(馬倩倩,2018),在水產(chǎn)飼料中尋找適宜的脂肪源替代魚(yú)油已經(jīng)成為近年來(lái)飼料行業(yè)和相關(guān)科研人員關(guān)注的熱點(diǎn)之一。 全世界植物油的產(chǎn)量約是魚(yú)油的100 倍,其價(jià)格穩(wěn)定,來(lái)源廣泛,易于儲(chǔ)存,已成為可持續(xù)的魚(yú)油替代品(吳美煥等,2020;覃川杰等,2013)。 植物油如豆油、菜籽油、棕櫚油、玉米油、花生油、亞麻油、磷脂油和橄欖油等已在很多水產(chǎn)動(dòng)物中開(kāi)展了應(yīng)用研究并取得良好效果。
彭澤鯽(Carassius auratusvar.Pengze)隸屬鯉形目、鯉科、鯉亞科、鯽屬,為鯽魚(yú)的一個(gè)品種,其具有生長(zhǎng)快、耐低氧、抗病力強(qiáng)、不易脫鱗、肉味鮮嫩、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高等優(yōu)良性狀(丁立云等,2018)。 近年來(lái), 關(guān)于彭澤鯽飼料脂肪水平 (付輝云等,2020)、蛋白源替代(曹宏忠,2019)、投喂策略(丁立云等,2017)、生態(tài)環(huán)境學(xué)(Zheng 等,2016)以及苗種繁育技術(shù)(付永進(jìn)等,2016)等方面均有報(bào)道。但有關(guān)飼料中不同脂肪源對(duì)彭澤鯽的影響鮮有研究。 本試驗(yàn)旨在研究不同脂肪源飼料對(duì)養(yǎng)成期彭澤鯽生長(zhǎng)、 體組成、 抗氧化和血清生化指標(biāo)的影響,探討彭澤鯽對(duì)不同脂肪源的利用情況,為彭澤鯽的飼料配制及優(yōu)化提供科學(xué)依據(jù)。
1.1 試驗(yàn)魚(yú)及飼養(yǎng)管理 彭澤鯽由江西省水產(chǎn)科學(xué)研究所黃馬基地提供, 正式試驗(yàn)前在循環(huán)水系統(tǒng)中馴養(yǎng)2 周。 隨機(jī)選取體質(zhì)量一致且健康有活力的彭澤鯽240 尾, 初始體質(zhì)量為 (53.63±0.10) g,隨機(jī)分為4 組,每組設(shè)3 個(gè)平行,每個(gè)平行20 尾魚(yú), 每個(gè)圓形養(yǎng)殖桶(規(guī)格為¢800 mm×650 mm)對(duì)應(yīng)一個(gè)平行,在室內(nèi)循環(huán)水系統(tǒng)中養(yǎng)殖8 周。 試驗(yàn)魚(yú)每日9 :00 和17 :00 飽食投喂試驗(yàn)日糧兩次。整個(gè)試驗(yàn)期間水質(zhì)監(jiān)測(cè)情況為:水溫(26±1.5)℃,溶解氧濃度不低于7 mg/L,pH(7.53±0.12),氨氮和亞硝酸濃度不高于0.1 mg/L,光周期為自然周期。
1.2 試驗(yàn)飼料 試驗(yàn)飼料以魚(yú)粉和發(fā)酵豆粕為主要蛋白源,分別以魚(yú)油、豆油、菜籽油、大豆磷脂為脂肪源,配制4 種等氮等脂的試驗(yàn)飼料,所有原料粉碎后過(guò)80 目篩,按配方比例稱量后,加油和水混合制成直徑為2 mm 的顆粒飼料, 晾干后用封口袋封裝,-20 °C 冰箱保存?zhèn)溆谩?飼料組成和營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。
表1 試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))%
1.3 樣品采集與分析 飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后, 饑餓24 h,分別從每個(gè)養(yǎng)殖桶中隨機(jī)取3 尾魚(yú)測(cè)體長(zhǎng)、稱體重,以計(jì)算肥滿度,然后用自封袋進(jìn)行分裝,-20 ℃冰箱保存用于全魚(yú)常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分分析。 每桶再隨機(jī)取6 尾魚(yú),經(jīng)MS-222 麻醉采血后,隨即在準(zhǔn)備好的冰盤(pán)上進(jìn)行樣品采集工作, 用1 mL無(wú)菌注射器尾靜脈采血, 冰上解剖分離肝臟和肌肉組織。 血液置于無(wú)菌離心管中,4 ℃靜置12 h,4000 r/min 離心10 min,取其上清液,經(jīng)沉淀離心取血清,樣品放于-70 ℃冰箱保存待測(cè)。
參照AOAC(2006)的方法測(cè)定試驗(yàn)飼料、全魚(yú)和肌肉常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分。水分、粗脂肪和粗蛋白質(zhì)分別采用恒溫干燥法(105 ℃)、索氏抽提法和凱氏定氮法測(cè)定, 粗灰分含量測(cè)定采用550 ℃馬弗爐灼燒法。
血清生化指標(biāo)使用日立7600-110 型全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行測(cè)定;超氧化物歧化酶(SOD) 活力采用黃嘌呤氧化酶法,丙二醛(MDA)采用硫代巴比妥酸縮合比色法, 溶菌酶 (LZM) 采用比濁法, 總抗氧化活性 (T-AOC)、 過(guò)氧化氫酶活性(CAT)等均采用南京建成生物工程研究所試劑盒檢測(cè),按說(shuō)明書(shū)要求操作并計(jì)算。
1.4 計(jì)算公式及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法
增重率/%=(終末總重-初始總重)/初始總重×100;
飼料系數(shù)=攝食飼料總重量/(終末總重-初始總重);
特定生長(zhǎng)率/(%/d)=(ln 終末總重-ln 初始總重)/試驗(yàn)天數(shù)×100;
肥滿度/%=試驗(yàn)?zāi)~(yú)體質(zhì)量/試驗(yàn)?zāi)~(yú)體長(zhǎng)度3×100 。
試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)用SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA),當(dāng)差異達(dá)到差異顯著(P<0.05) 時(shí),采用Turkey 氏法進(jìn)行組間的多重比較。 試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。
2.1 不同脂肪源飼料對(duì)彭澤鯽生長(zhǎng)性能的影響由表2 可知,大豆磷脂組增重率最高,較菜籽油組提高了5.91%(P<0.05),但與魚(yú)油、豆油組無(wú)顯著性差異(P>0.05);各組之間末重和特定生長(zhǎng)率的變化趨勢(shì)與增重率相同。 各組之間飼料系數(shù)及肥滿度沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。
表2 不同脂肪源飼料對(duì)彭澤鯽生長(zhǎng)性能的影響
2.2 不同脂肪源飼料對(duì)彭澤鯽體組成的影響由表3 可知,不同脂肪源對(duì)彭澤鯽全魚(yú)水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和灰分均無(wú)顯著影響(P>0.05)。
表3 不同脂肪源飼料對(duì)彭澤鯽全魚(yú)體組成的影響%濕重
如表4 所示,不同脂肪源對(duì)彭澤鯽肌肉粗蛋白質(zhì)含量產(chǎn)生顯著影響,魚(yú)油組肌肉粗蛋白質(zhì)含量較大豆磷脂組提高了6.24%(P<0.05),與豆油組及菜籽油組無(wú)顯著差異(P>0.05)。 不同脂肪源對(duì)彭澤鯽肌肉水分和粗脂肪含量無(wú)顯著影響(P>0.05)。
表4 不同脂肪源飼料對(duì)彭澤鯽肌肉營(yíng)養(yǎng)成分的影響% 濕重
2.3 不同脂肪源飼料對(duì)彭澤鯽抗氧化及血清生化指標(biāo)的影響 由表5 可知,豆油組的血清溶菌酶活性顯著高于其余各組(P<0.05);大豆磷脂組的血清超氧化物歧化酶活性較菜籽油組提高了19.89%(P<0.05), 但與魚(yú)油和豆油組無(wú)顯著差異 (P>0.05); 大豆磷脂組的血清高密度脂蛋白含量顯著高于其余各組(P<0.05)。各組之間血清總蛋白、葡萄糖、甘油三酯、膽固醇、低密度脂蛋白含量及谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶活性沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。
表5 不同脂肪源飼料對(duì)彭澤鯽血清生化指標(biāo)的影響
如表6 所示, 魚(yú)油組和大豆磷脂組的肝臟超氧化物歧化酶活性顯著高于菜籽油組, 分別較菜籽油組提高了11.04%和10.48%(P<0.05),但與豆油組無(wú)顯著性差異(P>0.05)。各組之間肝臟丙二醛含量、 過(guò)氧化氫酶及總抗氧化活性沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。
表6 不同脂肪源飼料對(duì)彭澤鯽肝臟抗氧化指標(biāo)的影響
研究認(rèn)為, 不同脂肪源因脂肪酸組成不同對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的影響不盡相同。魚(yú)油資源緊缺,價(jià)格不斷上漲,所以在水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與商業(yè)飼料配方中,對(duì)植物油的研究和應(yīng)用愈來(lái)愈受到重視。 陳家林等(2011)研究表明,相比魚(yú)油,投喂含有豆油和椰子油的飼料對(duì)異育銀鯽(Carassius auratus gibelio)幼魚(yú)的促生長(zhǎng)效果更好。 在泥鰍 (Misgurnus anguillicadatus)、洛 氏 鱥(Phoxinus lagowskii)、俄 羅斯鱘(Acipenser gueldenstaedti) 等研究中同樣發(fā)現(xiàn),飼料中添加植物油如大豆油、玉米油、花生油、棕櫚油、葵花籽油、亞麻油等促生長(zhǎng)效果與魚(yú)油無(wú)顯著差異 (李民等,2019;Zhu 等,2017; 高堅(jiān)等,2016)。本試驗(yàn)中,飼料中添加單一植物脂肪源、豆油、大豆磷脂及菜籽油,彭澤鯽的增重率與魚(yú)油組無(wú)顯著差異,表明在彭澤鯽的飼料配方中,植物油可以較好的替代魚(yú)油而對(duì)彭澤鯽的生長(zhǎng)無(wú)顯著影響,與前人研究結(jié)果一致。 本試驗(yàn)中,投喂添加大豆磷脂的飼料,彭澤鯽增重率和特定生長(zhǎng)率顯著高于添加菜籽油的飼料組。 其原因?yàn)榇蠖沽字兄舅岫鄶?shù)以磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇等復(fù)合脂形式存在, 在魚(yú)體內(nèi)脂質(zhì)和相關(guān)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收、消化、轉(zhuǎn)運(yùn)與代謝過(guò)程中,起到重要的生理功能作用(馮健等,2006;Inge 等,1998)。研究表明,飼料中以菜籽油作為單一脂肪源時(shí),紅螯螯蝦、 細(xì)鱗鮭和團(tuán)頭魴的增重率和特定生長(zhǎng)率顯著降低(魯耀鵬等,2019;劉洋等,2018;劉瑋等,1997),與本試驗(yàn)結(jié)果類似。
從彭澤鯽的肌肉組成來(lái)看,不同脂肪源對(duì)彭澤鯽的肌肉粗蛋白質(zhì)含量有顯著的影響,魚(yú)油組彭澤鯽肌肉粗蛋白質(zhì)含量的提升效果最佳,其次為豆油、菜籽油組,二者沒(méi)有顯著差異,但顯著高于大豆磷脂組。這可能是因?yàn)轸~(yú)油中含有較豐富的n-3 高不飽和脂肪酸,有利于肌肉中蛋白質(zhì)的沉積(王煜恒等,2010;Bell 等,2001)。 對(duì)洛氏鱥、異育銀鯽、 鯉魚(yú) (Cyprinus carpio) 和青魚(yú)(Mylopharyngodon piceus)的研究也發(fā)現(xiàn),魚(yú)油組肌肉中粗蛋白質(zhì)含量?jī)?yōu)于其余各組,表明魚(yú)油的攝入有利于魚(yú)體肌肉蛋白質(zhì)的合成和積累 (李民等,2019;潘瑜等,2012;王煜恒等,2010;王道尊等,1989)。
魚(yú)類血液指標(biāo)與機(jī)體的代謝、飼料營(yíng)養(yǎng)狀況及肝臟機(jī)能有著緊密的聯(lián)系,當(dāng)魚(yú)體受到外界因子的影響而發(fā)生生理或病理變化時(shí),通常會(huì)在血清生化成分中反映出來(lái)(范澤等,2019)。 溶菌酶是魚(yú)類機(jī)體反映吞噬細(xì)胞吞噬病原菌能力的重要指標(biāo),在天然防御體系中具有重要的作用(周小秋等,2014)。 周小秋等(2005)研究發(fā)現(xiàn),在脂肪酸含量保持不變的條件下,通過(guò)調(diào)整不飽和脂肪酸n-3 和n-6 的比例, 建鯉 (Cyprinus carpio var Jian) 溶菌酶活性發(fā)生顯著變化。 本研究中,豆油組血清溶菌酶活性顯著高于其余各組,表明飼料中添加豆油在一定程度上可以增強(qiáng)彭澤鯽的天然免疫力。唐威(2010)研究魚(yú)油、豆油、牛油及其混合油對(duì)斑點(diǎn)叉尾鮰(Ietalurus Punetaus)血清溶菌酶活性的影響, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)豆油組活性最高,與本試驗(yàn)結(jié)果一致。 超氧化物歧化酶是機(jī)體內(nèi)重要的抗氧化酶,廣泛存在于生物體的胞漿和線粒體基質(zhì)中,可清除魚(yú)體中有害的活性氧自由基,增強(qiáng)魚(yú)體吞噬細(xì)胞的活性(劉康等,2014)。本研究中,不同脂肪源的飼料對(duì)彭澤鯽肝臟超氧化物歧化酶活性產(chǎn)生顯著影響,菜籽油組顯著低于魚(yú)油和大豆磷脂組, 其余各組無(wú)顯著性差異,表明菜籽油作為彭澤鯽飼料單一脂肪源可能會(huì)損害彭澤鯽肝臟健康。
本試驗(yàn)結(jié)果表明,魚(yú)油、豆油和大豆磷脂可作為養(yǎng)成期彭澤鯽飼料合適的脂肪源, 而菜籽油組魚(yú)體肝臟可能受到一定程度的損傷, 因此菜籽油不適宜作為養(yǎng)成期彭澤鯽飼料的單一脂肪源。