朱愛(ài)民，孫強(qiáng)東

(鹽城生物工程高等職業(yè)技術(shù)學(xué)校，江蘇鹽城 224051)

在養(yǎng)豬業(yè)中，抗生素生長(zhǎng)促進(jìn)劑的作用是在亞治療劑量下，通過(guò)抑制腸道中敏感的細(xì)菌群來(lái)促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，實(shí)際生產(chǎn)中斷奶仔豬受到的應(yīng)激較高，通常會(huì)導(dǎo)致生長(zhǎng)速度下降，微生物群動(dòng)態(tài)平衡受到干擾（劉軍等，2018）?？股赝ㄟ^(guò)抑制細(xì)菌生長(zhǎng)來(lái)促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)。但人們?cè)絹?lái)越關(guān)注在動(dòng)物生產(chǎn)中長(zhǎng)期使用抗生素的后果，因?yàn)槟退幓蚩梢詮姆侵虏【睫D(zhuǎn)移到致病菌，并直接將動(dòng)物耐藥菌轉(zhuǎn)移到人類，進(jìn)而對(duì)人類健康構(gòu)成威脅。我國(guó)已于2020年7月1日全面禁止在飼料中添加抗生素，因此，尋找或開(kāi)發(fā)一種生態(tài)友好的抗生素替代品具有重要價(jià)值。酸化劑一般基于載體，不與飼料中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，對(duì)斷奶仔豬的生產(chǎn)性能有積極影響。有機(jī)酸及其銨鹽似乎可以提高仔豬飼料消耗和生長(zhǎng)速度，并降低斷奶后腹瀉發(fā)病率（李潔云等，2015）。由于酸化劑協(xié)同作用及其在消化道內(nèi)不同位置的解離特性，混合酸的效果一般優(yōu)于單一酸（侯玉潔等，2012）。但目前還沒(méi)有足夠的證據(jù)來(lái)驗(yàn)證復(fù)合酸對(duì)斷奶仔豬的影響，有必要進(jìn)一步明確混合酸的作用機(jī)制。因此，本研究旨在探討日糧添加不同酸化劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、免疫性能和微生物菌群的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與日糧 試驗(yàn)將384頭平均初始體重為（6.16±0.23）kg的21 d斷奶仔豬隨機(jī)分為4組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)16頭，各組斷奶仔豬分別飼喂基礎(chǔ)日糧、基礎(chǔ)日糧+45 mg/kg抗菌肽（北京中農(nóng)穎泰生物技術(shù)有限公司）、基礎(chǔ)日糧+ 4 kg/T檸檬酸及基礎(chǔ)日糧+3 kg/T復(fù)合酸化劑（上海正正生物有限公司），試驗(yàn)共進(jìn)行4周。酸化劑在原料混合過(guò)程中添加，日糧制成顆粒料，基礎(chǔ)日糧配方見(jiàn)表1。

表1 斷奶豬基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.2 生長(zhǎng)性能 分別在試驗(yàn)第1、14和28天對(duì)各重復(fù)豬進(jìn)行稱重，每周記錄1次重復(fù)飼料用量。試驗(yàn)結(jié)束后計(jì)算平均日增重、平均日采食量和料重比。

1.3 免疫性能和糞便微生物 在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇3頭體重接近的仔豬頸靜脈采血，然后在4℃條件下3000 g離心15 min，分離血清，-20℃保存。血清免疫球蛋白A、G和M（IgG、IgM和IgA）采用試劑盒測(cè)定。分別在實(shí)驗(yàn)的第14和28天通過(guò)人工刺激肛門內(nèi)外括約肌，直接從每個(gè)重復(fù)選擇4只豬采集新鮮糞便樣本，然后用無(wú)菌生理鹽水中連續(xù)稀釋10倍，接種到瓊脂平板上，具體測(cè)定方法參考朱小翠（2012）的方法。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 采用SPSS軟件單因素方差分析對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧添加酸化劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知，與對(duì)照組相比，酸化劑對(duì)末重?zé)o顯著影響（P＞0.05），但均顯著低于抗菌肽組（P＜0.05）。與抗菌肽組相比，兩個(gè)酸化劑處理組1～14 d、15～28 d及1～28 d日采食量分別降低9.86%、13.88%，46.87%、50.88%和33.13%、37.01%（P＜0.05），而15～28 d和1～28 d日增重顯著降低49.73%、57.03%和31.38%、48.67%（P＜0.05）。日糧處理對(duì)15～28 d豬料重比的影響無(wú)顯著差異（P＞0.05），但抗菌肽組1～14 d料重比最低（P＜0.05），抗菌肽組和檸檬酸組1～28 d料重比較對(duì)照組顯著降低了11.44%和13.43%（P＜0.05）。

表2 不同酸化劑對(duì)斷奶豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 日糧添加酸化劑對(duì)斷奶仔豬血清免疫指標(biāo)的影響 有表3可知，日糧添加單一或復(fù)合酸化劑替代抗菌肽對(duì)斷奶豬血清IgA和IgM濃度的影響無(wú)顯著差異（P＞0.05），但檸檬酸組血清IgG濃度較抗菌肽組顯著提高43.07%（P＜0.05），而對(duì)照組、抗菌肽組和復(fù)合酸化劑組血清IgG濃度無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

2.3 日糧添加酸化劑對(duì)斷奶仔豬糞便微生物的影響 由表4可知，與對(duì)照組相比，日糧添加單一或復(fù)合酸化劑使斷奶后14 d和28 d豬糞中乳酸桿菌數(shù)量顯著提高10.56%、8.94%和19.43%、18.17%（P＜0.05），同時(shí)酸化劑組斷奶后28 d 糞中芽孢桿菌數(shù)量分別顯著提高21.45%和20.93%（P＜0.05）。此外，酸化劑處理組斷奶后28 d豬糞中大腸桿菌數(shù)量較對(duì)照組顯著降低19.58%和26.28%（P＜0.05），而斷奶后14 d和28 d糞中沙門氏菌數(shù)據(jù)顯著降低43.68%、46.44%和44.94%、47.64%（P＜0.05）。

表3 不同酸化劑對(duì)斷奶豬血清免疫指標(biāo)的影響 mg/dL

表4 不同酸化劑對(duì)斷奶豬糞微生物含量的影響 lg CFU/mL

3 討論

3.1 酸化劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響 本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，檸檬酸處理組的飼料效率增加13.5%，這與Tsiloyiannis等（2001）的研究結(jié)果一致。Kil等（2011）綜述了檸檬酸對(duì)日增重和飼料報(bào)酬的有益作用，但采食量降低。日糧中檸檬酸可降低胃腸道pH，從而增加蛋白水解酶的活性和內(nèi)容物滯留時(shí)間，改善蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝，提高飼料效率。本研究使用的復(fù)合酸化劑對(duì)整個(gè)試驗(yàn)期間斷奶豬的日增重、采食量和料重比均有負(fù)面影響，這與Walsh等（2007）的研究結(jié)果一致。一般來(lái)說(shuō)，有機(jī)酸如甲酸和丙酸具有刺激性氣味，可能會(huì)降低飼料的適口性，從而減少采食量，對(duì)生長(zhǎng)速度產(chǎn)生負(fù)面影響。

3.2 酸化劑對(duì)斷奶仔豬血清免疫指標(biāo)的影響 細(xì)胞外液中免疫球蛋白的濃度可作為衡量體液免疫反應(yīng)的指標(biāo)。血清IgG、IgA和IgM是保護(hù)血管外腔室免受病原病毒和微生物侵害的主要血清免疫球蛋白，其中血清IgG可保護(hù)腸道表面免受細(xì)菌的破壞，維持最佳的腸道功能和胃腸道生長(zhǎng)，有利于仔豬的健康和生長(zhǎng)性能（Li等，2007）。雖然有機(jī)酸對(duì)免疫反應(yīng)的影響還沒(méi)有很好的文獻(xiàn)記載，但很明顯，許多類型的有機(jī)酸可以改變腸道菌群，這對(duì)免疫系統(tǒng)的發(fā)展十分必要（Guo等，2008）。

3.3 酸化劑對(duì)斷奶仔豬糞便微生物菌群的影響 以往研究表明，仔豬斷奶后最初幾天腸道菌群數(shù)量和種類發(fā)生了顯著變化（Wang等，2011）。在本研究中，與對(duì)照相比，抗菌肽和酸化劑組顯著減少了致病性革蘭氏陰性菌如沙門氏菌和大腸桿菌的數(shù)量，增加了有益乳酸菌和芽孢桿菌濃度。低pH和高計(jì)數(shù)乳酸菌可能通過(guò)阻斷腸道受體和分泌對(duì)酸不耐受細(xì)菌起作用的代謝物來(lái)抑制大腸桿菌和沙門氏菌的定殖和增殖。有機(jī)酸也可能為好氧菌生長(zhǎng)提供額外的能量（Chaveerach等，2004）。

4 結(jié)論

綜上所述，日糧中添加抗菌肽可顯著提高仔豬生長(zhǎng)性能，降低仔豬病原微生物負(fù)荷。檸檬酸酸對(duì)飼料轉(zhuǎn)化率有積極影響，增加有益菌數(shù)和血清IgG濃度，而復(fù)合酸化劑對(duì)生長(zhǎng)性能參數(shù)有負(fù)面影響，對(duì)腸道菌群具有積極作用。