莫貞鈺 向 欣 潘健寧 黃金昌 高 月 武 麗

（廣西中醫(yī)藥大學(xué) 廣西南寧 530200）

肝癌是嚴(yán)重危害人類健康的惡性腫瘤之一，其死亡率高。近年來(lái)，我國(guó)肝癌發(fā)病率呈逐年遞增趨勢(shì)。因廣西地區(qū)長(zhǎng)期處于潮濕、高溫這種特殊氣候條件，黃曲霉菌在多種農(nóng)作物中肆意生長(zhǎng)，并產(chǎn)生大量致癌物質(zhì)——AFB1，進(jìn)而引發(fā)甚至加重肝癌發(fā)病，因而，我省肝癌發(fā)病率及死亡率已居全國(guó)之首[1]。目前，臨床治療肝癌的手術(shù)、放、化療等方法都存在一定的弊端，加之我國(guó)經(jīng)濟(jì)發(fā)展不平衡，醫(yī)療衛(wèi)生水平同樣受到影響，尋求更加經(jīng)濟(jì)、毒副反應(yīng)小的治療勢(shì)在必行。中醫(yī)中藥作為我國(guó)特色抗癌手段，中藥是臨床治療肝癌的重要方法之一。其恰巧可以彌補(bǔ)手術(shù)治療、放射治療、化學(xué)治療等治療方法的不足。據(jù)浙江省中醫(yī)院癌癥治療專家介紹，中醫(yī)中藥治癌有四大特點(diǎn)，其一是具有較強(qiáng)的整體觀念。腫瘤雖然生長(zhǎng)在身體的某一局部，但實(shí)際上是一種全身性疾病。對(duì)于多數(shù)的腫瘤病人來(lái)說(shuō)，局部治療是不能解決根治問(wèn)題的，而中醫(yī)由于從整體觀念出發(fā)，實(shí)施辨證論治，既考慮了局部的治療，又采取扶正培本的方法，對(duì)于改善患者的局部癥狀和全身狀況都具有重要的作用。我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)及多種民族藥抗炎、增強(qiáng)免疫等作用明顯，其多歸根于我國(guó)民族藥材中的多成分組成[2,3]。本文綜述了中藥成分對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2增殖變化影響的研究進(jìn)展，著重分析中藥成分中的多糖、黃酮類、皂苷和生物堿成分對(duì)HepG2增殖變化的影響，以期能對(duì)由HepG2引起的肝癌治療方法的發(fā)展提供理論依據(jù)。

一、中藥中多糖、黃酮類、皂苷和生物堿成分對(duì)HepG2增殖變化的影響

（一）多糖

我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)及多種民族藥抗炎、增強(qiáng)免疫等作用明顯，其多歸根于我國(guó)民族藥材中的多成分組成。其中，廣泛存在于各類植物中的多糖成分，因其寬泛的生物活性，且具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、強(qiáng)心降壓、降糖、抗應(yīng)激、抗腫瘤及抗氧化等功效[4]（如表1所示）。因此，其在臨床治療及科研實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用及研究頗多。

1.山茱萸多糖。山茱萸多糖是山茱萸Cornus officinalis Sieb.et Zucc.干燥果肉中成分，其在抗肺癌、乳腺癌功效顯著，可抑制肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移，調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、凋亡相關(guān)基因表達(dá)，提高腫瘤抗原表達(dá)。李媛等人通過(guò)流式、免疫印跡、熒

光染色等方法得出山茱萸多糖可能通過(guò)表達(dá)抑制PI3K/AKT通路活化來(lái)抑制HepG2增殖，并促進(jìn)其凋亡的結(jié)論[5]。

2.黃芪多糖。黃芪多糖（astragalus polysaccharide,AP）是黃芪中最重要的天然有效成分，由葡聚糖和雜多糖組成，具有增強(qiáng)免疫、調(diào)控炎癥反應(yīng)等作用[10,11,12]，是黃芪中最重要的天然有效成分。程玥等人通過(guò)CCK-8檢測(cè)和RT-PCR法檢測(cè)所得結(jié)果表明，AP可提高胰島素抵抗模型中HepG2細(xì)胞存活率[6]。

3.金針菇多糖。金針菇營(yíng)養(yǎng)豐富，含有多糖、粗纖維、萜類等多種活性物質(zhì)。已有報(bào)道，金針菇多糖具有抗腫瘤、抗衰老、保肝作用等生物活性。其抗腫瘤活性的報(bào)道多著眼于免疫調(diào)節(jié)作用，吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)功能性蘑菇多糖研究室前期優(yōu)化研究得到金針菇多糖。張愛(ài)龍等人通過(guò)MTT法、Annexin V-FITC/PI雙染檢測(cè)及細(xì)胞凋亡染色法本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，金針菇多糖誘導(dǎo)肝癌HepG2細(xì)胞凋亡作用機(jī)制涉及線粒體凋亡途徑與死亡受體途徑[7]。

表1 不同種屬植物多糖類的抗腫瘤作用

（二）黃酮類

1.漢黃芩素。《本草經(jīng)集注》記載黃芩性寒味苦，主治溫?zé)岵?、上呼吸道感染、止血、安胎等作用。由此可知，我?guó)對(duì)于黃芩的應(yīng)用已經(jīng)有許多經(jīng)驗(yàn)，科技的發(fā)展使得黃芩中的活性成分得到提取并且加以研究，已經(jīng)取得了一定的成果。從黃芩根莖部提取出來(lái)的漢黃芩素（C16H12O5），屬于黃酮類化合物[8]（結(jié)構(gòu)如圖1所示）。

圖1 漢黃芩素的基本結(jié)構(gòu)

據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，漢黃芩素屬于活性成分，具有一定的抗腫瘤效果[9]。腫瘤的治療方法之一就是通過(guò)激活體內(nèi)的免疫細(xì)胞和加強(qiáng)機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答，特異性地清除腫瘤細(xì)胞和抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。免疫應(yīng)答過(guò)程中主要有兩種細(xì)胞參與：一個(gè)是T細(xì)胞，另一個(gè)是自然殺傷細(xì)胞(natural killer cell,NK)。漢黃芩素能夠促進(jìn)免疫細(xì)胞的增殖，使得機(jī)體的免疫功能強(qiáng)化[10]。馬永波[9]、李曉楠[11]等的研究表明，漢黃芩素在適宜濃度范圍內(nèi)能夠促進(jìn)CD3AK細(xì)胞的增殖，增強(qiáng)其對(duì)肝癌細(xì)胞的殺傷活性,從而抑制肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。

2.花青素?；ㄇ嗨?anthocyanidins)是一種植物中的色素，是花色苷(anthocyains) 水解而得的有顏色的背元，并且使水果、蔬菜、花卉具有它獨(dú)有的顏色。這個(gè)呈色就是花青素的作用結(jié)果?；ㄇ嗨貙儆陬慄S酮，它的基本結(jié)構(gòu)為2-苯基苯并吡喃陽(yáng)離子(如圖2所示)。

圖2 花青素的基本結(jié)構(gòu)

研究表明，花青素可以抑制組織和某些腫瘤細(xì)胞的活性[12]。通過(guò)體外細(xì)胞研究，發(fā)現(xiàn)花青素可以化學(xué)預(yù)防腫瘤細(xì)胞的活性。這個(gè)過(guò)程為激活體內(nèi)的免疫細(xì)胞和增強(qiáng)機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答，從而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。多個(gè)基因的活化和表達(dá)功能可以被花青素所調(diào)節(jié)[12]。Bishayee A等[13]通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)花青素是可以預(yù)防肝癌的。

3.水飛薊素。根據(jù)《中藥大辭典》記載水飛薊可以清熱利濕、疏肝行氣、化瘀消積；可以用于治療肝、膽管疾病。由此可知，水飛薊在治療肝臟疾病具有悠久的歷史。水飛薊素 (Silymarin) 屬于黃酮木質(zhì)素類混合物，可從水飛薊的種子中提取。Lah JJ等[15]利用肝癌細(xì)胞系Hep3B、PLC/PRF/5、Hu H7、Hep G2研究水飛薊賓的作用機(jī)制，均表明水飛薊可對(duì)肝癌細(xì)胞有增殖抑制和細(xì)胞凋亡的作用。

（三）皂苷類

1.麥冬皂苷B。周志紅的研究中表明麥冬皂苷B可以通過(guò)誘導(dǎo)人肝癌HepG2細(xì)胞發(fā)生自噬的作用機(jī)制來(lái)抑制細(xì)胞增殖。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示，其對(duì)HepG2細(xì)胞周期及凋亡皆無(wú)影響；吖啶橙染色和Lyso-Tracker Red染色均提示細(xì)胞內(nèi)自噬囊泡數(shù)量增加；Western blot結(jié)果表明其引起B(yǎng)eclin-1（自噬標(biāo)志性蛋白）表達(dá)提高，胞漿型LC3（即LC3I）向自噬體膜型（即LC3II）轉(zhuǎn)變，自噬抑制劑3-MA幾乎完全逆轉(zhuǎn)其抗增殖作用，提示麥冬皂苷B通過(guò)誘導(dǎo)自噬產(chǎn)生作用。

2.桔梗皂苷-D。桔梗皂苷-D (platycodin-D)是桔?？傇碥盏幕钚猿煞?，有鎮(zhèn)痛、抗炎、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等作用。MTT法和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果均顯示其對(duì)HepG2細(xì)胞增殖有抑制作用；熒光定量PCR結(jié)果和Western blot試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)桔梗皂苷D可使Beclin-1、LC3II和BNIP3（促凋亡蛋白）表達(dá)水平均有顯著提高，從而誘導(dǎo)細(xì)胞自噬和凋亡。

3.柴胡皂苷D。柴胡皂苷D是柴胡的主要活性成分之一，具有抗菌、抗炎、抗癌、抗病毒等作用。免疫組化檢測(cè)腫瘤組織增殖蛋白Ki67表達(dá)顯著減弱、凋亡標(biāo)記蛋白cleaved caspase-3表達(dá)顯著增強(qiáng)，表示柴胡皂苷可抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡[19]。

（三）生物堿類物質(zhì)對(duì)人肝癌細(xì)胞損傷的影響

1.吳茱萸堿。吳茱萸堿為吳茱萸主要活性成分之一，國(guó)內(nèi)外研究都有表示其藥理作用多樣。吳茱萸堿可濃度依賴性抑制細(xì)胞存活，吳茱萸堿影響HepG2細(xì)胞后，細(xì)胞內(nèi)MMP-9、PCNA蛋白表達(dá)相對(duì)下降，而凋亡蛋白Bax、p53表達(dá)水平上升，細(xì)胞的核固縮、核邊集等形態(tài)改變明顯，表示吳茱萸堿可誘導(dǎo)人肝癌HepG2細(xì)胞的凋亡。

2.小檗堿 (berberine)。小檗堿來(lái)源于傳統(tǒng)中藥黃連和黃柏，是一種異喹啉類生物堿，在我國(guó)藥用歷史悠久，有抗菌、抗炎、抗癌、降血糖、降血脂及免疫抑制等多種藥理作用。研究發(fā)現(xiàn)，小檗堿可以誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞自噬性死亡, 通過(guò)去除自噬相關(guān)基因或活化AMPK后, 細(xì)胞存活率顯著上升, 而使用激活劑AMPK后細(xì)胞死亡率上升。

四、小結(jié)

肝癌嚴(yán)重危害著人類健康，其死亡率高，近年我國(guó)肝癌發(fā)病逐年遞增，廣西肝癌發(fā)病率及死亡率居全國(guó)之首[1]。目前，臨床治療肝癌的手術(shù)、放、化療等方法都存在一定的弊端，加之我國(guó)經(jīng)濟(jì)發(fā)展不平衡，醫(yī)療衛(wèi)生水平同樣受到影響，因此，尋找一種相對(duì)安全、可靠的治療方案已迫在眉睫。我國(guó)自古以來(lái)關(guān)于中藥的應(yīng)用記載就非常多，我們現(xiàn)在中藥的應(yīng)用也基本建立在古人的記載之上，且中藥資源豐富。這就意味著我們需要不斷創(chuàng)新、不斷發(fā)掘中藥在人類機(jī)體內(nèi)的作用機(jī)理，從而擴(kuò)大中藥的利用價(jià)值。隨著科研技術(shù)的不斷發(fā)展，我們更是研究出多種中藥有效成分對(duì)于治療腫瘤的作用，也發(fā)現(xiàn)了許多中藥有效成分對(duì)腫瘤細(xì)胞作用的機(jī)制。其具有共同點(diǎn)，就是通過(guò)影響腫瘤細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡，從而達(dá)到抑制腫瘤生長(zhǎng)的目的，而且還可以降低化療藥物產(chǎn)生的副作用，減輕治療過(guò)程中給身體帶來(lái)的傷害。中藥作為我國(guó)特色抗癌手段，恰巧可以彌補(bǔ)手術(shù)治療、放射治療、化學(xué)治療等治療方法的不足。研究中藥有效成分對(duì)于抗腫瘤的作用機(jī)制，不僅讓我們了解機(jī)體免疫細(xì)胞在抗腫瘤時(shí)發(fā)揮的巨大作用，也為人類未來(lái)在戰(zhàn)勝腫瘤方面提供至關(guān)重要的指導(dǎo)，中藥有效成分治療腫瘤的研究和開(kāi)發(fā)將會(huì)為人類抗腫瘤事業(yè)做出貢獻(xiàn)，具有很大的研究?jī)r(jià)值。