楊 豐,沈思遠(yuǎn),黃海源,陳露珠,施文正,2,汪之和,2,3

(1 上海海洋大學(xué)食品學(xué)院;2 國(guó)家淡水水產(chǎn)品加工技術(shù)研發(fā)分中心(上海);3上海水產(chǎn)品加工及貯藏工程技術(shù)研究中心,上海201306)

羅氏沼蝦(Macrobyachium rosenberqii)又稱馬來(lái)西亞大蝦、淡水長(zhǎng)臂大蝦,廣泛分布于印度洋、太平洋區(qū)域之熱帶和亞熱帶地區(qū)。近年來(lái),隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)的不斷提高,我國(guó)羅氏沼蝦養(yǎng)殖總產(chǎn)量快速上升[1],2017年中國(guó)羅氏沼蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量為1.374 ×105t,比2016年增長(zhǎng)8.51%[2]。羅氏沼蝦殼薄體肥、肉質(zhì)鮮嫩、味道鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富,因此備受廣大消費(fèi)者青睞。但是由于羅氏沼蝦季節(jié)性較強(qiáng)且產(chǎn)量大,需要在集中收獲期對(duì)其進(jìn)行保鮮,延長(zhǎng)貨架期,滿足各地消費(fèi)者的需求。

ε-聚賴氨酸(ε-poly-L-lysine,ε-PL)是一種天然生物抑菌劑,具有安全性高、熱穩(wěn)定性強(qiáng)以及抑菌譜廣等優(yōu)點(diǎn)[3],在水產(chǎn)品保鮮中廣泛運(yùn)用。侯偉峰等[4]在3—5 ℃條件下用0.1%ε-PL 處理南美白對(duì)蝦可以延長(zhǎng)2—3 d 的貨架期。茶多酚(Tea Polyphenols,TP)是一種天然抗氧化劑,主要表現(xiàn)在螯合金屬離子、清除活性氧自由基、抑制氧化酶以及促進(jìn)抗氧化酶活性等方面[5]。熊青等[6]研究表明,茶多酚及其復(fù)配生物保鮮劑能有效提高南美白對(duì)蝦品質(zhì)。殼聚糖(Chitosan,CS)是由自然界普遍分布的幾丁質(zhì)脫乙酰化處理后制得的天然高分子聚合物,具有良好成膜性,可阻隔細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)傳遞[7]。Soyoung 等[8]將2%殼聚糖與聚賴氨酸涂膜用于太平洋白蝦,可有效延長(zhǎng)保質(zhì)期至12 d。

目前,對(duì)于羅氏沼蝦保鮮技術(shù)的報(bào)道主要是采用凍藏保鮮和氣調(diào)保鮮等,而保鮮劑的開(kāi)發(fā)應(yīng)用鮮有報(bào)道。本研究考察不同保鮮功能的復(fù)合保鮮劑對(duì)羅氏沼蝦在冷藏(4 ±1)℃的保鮮效果,以期揭示該復(fù)合保鮮劑對(duì)水產(chǎn)品品質(zhì)的影響,并通過(guò)響應(yīng)面法優(yōu)化出高效、低成本、安全的復(fù)合保鮮劑配方。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

試驗(yàn)時(shí)間為2019年6—8月份。鮮活羅氏沼蝦:購(gòu)于上海市浦東新區(qū)果園鎮(zhèn)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng),平均體質(zhì)量(25.00 ±5.00)g,體長(zhǎng)(10.00 ±2.00)cm,充氧活運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室。三氯乙酸、2-硫代巴比妥酸、氯化鈉、硼酸、甲基紅、溴甲酚綠、輕質(zhì)氧化鎂、氫氧化鈉、高氯酸、氫氧化鉀、冰醋酸:分析純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。平板計(jì)數(shù)瓊脂:生化試劑,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。溶菌酶、茶多酚、植酸、殼聚糖、海藻酸鈉、普魯蘭多糖:食品級(jí),浙江一諾生物科技有限公司。乳酸鏈球菌素、ε-聚賴氨酸:食品級(jí),浙江新銀象生物工程有限公司。4-己基間苯二酚:食品級(jí),上海瑞祥生物科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

艾美特SZ3002 真空保鮮機(jī):深圳艾美特科技股份有限公司。SHP-2500 型低溫生化培養(yǎng)箱:上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司。FOSS Kjeltec 8400 型全自動(dòng)凱氏定氮儀:丹麥FOSS 公司。H2050R 型高速冷凍離心機(jī):長(zhǎng)沙湘儀有限公司。UV-1800PC 型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì):上海美譜達(dá)儀器有限公司。FE20 型pH計(jì):梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司。DSX-280KB24 型手提式壓力蒸汽滅菌器:上海申安醫(yī)療器械廠。BCM 型垂直雙人標(biāo)準(zhǔn)凈化工作臺(tái):蘇凈集團(tuán)安泰公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 原料預(yù)處理

將鮮活羅氏沼蝦浸沒(méi)在冰水中致其昏死,挑選個(gè)體大小一致,蝦體完整的羅氏沼蝦分別浸漬在保鮮劑溶液中10 min,取出瀝干后快速分裝聚乙烯保鮮袋,并用封口機(jī)封口,放置在(4 ±1)℃生化培養(yǎng)箱中進(jìn)行保鮮試驗(yàn),每2 d 取樣測(cè)定總揮發(fā)性鹽基氮(TVB-N)、硫代巴比妥酸(TBA)值、菌落總數(shù)以及感官評(píng)定等指標(biāo)。

1.3.2 單一保鮮劑的篩選

分別選取抑菌型保鮮劑(乳酸鏈球菌素、溶菌酶、ε-聚賴氨酸),抗氧化型保鮮劑(茶多酚、4-己基間苯二酚、植酸),涂膜型保鮮劑(殼聚糖、海藻酸鈉、普魯蘭多糖)等9 種不同保鮮劑,分別設(shè)置抑菌型保鮮劑濃度為0.1%,抗氧化型保鮮劑濃度為0.1%,涂膜型保鮮劑為1%,除殼聚糖用含1%冰醋酸,其余為無(wú)菌蒸餾水配制,對(duì)照組(為無(wú)菌蒸餾水)。通過(guò)TVB-N、TBA 值、菌落總數(shù)以及感官評(píng)定等指標(biāo)分別篩選出相對(duì)較好的抑菌型、抗氧化型、涂膜型保鮮劑各一種。

1.3.3 單一保鮮劑濃度的篩選

分別設(shè)置抑菌型保鮮劑(ε-聚賴氨酸)、抗氧化型保鮮劑(茶多酚)的濃度為0.1%、0.3%、0.5%;涂膜型保鮮劑(殼聚糖)的濃度為1%、2%、3%,其中設(shè)置對(duì)照組(以無(wú)菌蒸餾水處理)。通過(guò)TVB-N、TBA 值、菌落總數(shù)以及感官評(píng)定等指標(biāo)分別篩選出相對(duì)較好的3 種保鮮劑濃度范圍。

1.3.4 復(fù)合保鮮劑濃度的響應(yīng)面優(yōu)化

根據(jù)單因素試驗(yàn)的結(jié)果,分別選擇ε-聚賴氨酸、茶多酚、殼聚糖不同的質(zhì)量分?jǐn)?shù)濃度,采用三因素三水平的響應(yīng)面分析法(表1)。以TVB-N 作為響應(yīng)值,篩選出最佳配比的復(fù)合保鮮劑并進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)。

表1 響應(yīng)面試驗(yàn)因素水平編碼Table 1 Factors and levels in response surface experiment

1.3.5 響應(yīng)面優(yōu)化復(fù)合保鮮劑驗(yàn)證試驗(yàn)

將預(yù)處理后的羅氏沼蝦經(jīng)過(guò)不同處理后隨機(jī)分為5 組進(jìn)行分裝:1)試驗(yàn)組:響應(yīng)面試驗(yàn)的復(fù)合保鮮劑組合;2)0.3% ε-聚賴氨酸保鮮對(duì)照組;3)0.3%茶多酚保鮮對(duì)照組;4)2.3%殼聚糖保鮮對(duì)照組;5)對(duì)照組:未經(jīng)任何處理的樣品。分別置于(4 ±1)℃生化培養(yǎng)箱中貯藏,貨架期內(nèi)測(cè)定其TVB-N、TBA、菌落總數(shù)、肌肉pH 并進(jìn)行感官評(píng)定,從而研究復(fù)合保鮮劑對(duì)羅氏沼蝦的保鮮效果。

1.3.6 保鮮指標(biāo)的測(cè)定

1.3.6.1 揮發(fā)性鹽基氮(TVB-N)

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.228—2016《食品中揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定》[9]。

1.3.6.2 硫代巴比妥酸(TBA)值

參考楊陽(yáng)[10]和馬海建等[11]的方法,準(zhǔn)確稱取蝦肉樣品5.00 g,加入25 mL 的20%三氯乙酸溶液和20 mL蒸餾水,勻漿并靜置1 h 后冷凍離心10 min(4 ℃,8000 r∕min),取上清液過(guò)濾后定容至50 mL,取5 mL的濾液加入0.02 mol∕L 硫代巴比妥酸溶液5 mL,沸水浴中反應(yīng)20 min,取出后流水冷卻5 min,于532 nm 處測(cè)吸光度A。以蒸餾水為空白樣,平行測(cè)定3 次,取平均值。TBA 值=A×7.8 mg∕(100 g)。

1.3.6.3 菌落總數(shù)

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.2—2016《食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測(cè)定》[12]。

1.3.6.4 肌肉pH

取蝦肉2 g,加入18 mL 蒸餾水,勻漿2 min,靜置30 min 后取上清液,采用pH 計(jì)測(cè)定。

1.3.6.5 感官評(píng)價(jià)

感官評(píng)定由10 名有感官評(píng)定經(jīng)驗(yàn)的人員組成,總分6 分以下表示蝦已不可食用。羅氏沼蝦感官評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表2。

表2 羅氏沼蝦綜合感官評(píng)分Table 2 Sensory evaluation of Macrobrachium rosenbergii

1.4 數(shù)據(jù)處理

使用SPSS 24.0 軟件對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析,在單因素方差分析(ANOVA)的基礎(chǔ)上采用最小極差法(LSD)進(jìn)行組間比較,取P＜0.05 為差異顯著,利用Origin 9.1 軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 單一保鮮劑篩選

2.1.1 3 種抑菌型保鮮劑篩選

如圖1 所示,TVB-N、菌落總數(shù)隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)總體上升,感官評(píng)分逐漸下降,抑菌組明顯好于對(duì)照組。在保鮮第4 天時(shí),對(duì)照組的TVB-N 值已超過(guò)20 mg∕(100 g),0.1%乳酸鏈球菌素和0.1%溶菌酶組在保鮮第6 天時(shí)已腐敗,而0.1%ε-聚賴氨酸組在第8 天的TVB-N 值為19.83 mg∕(100 g);0.1%乳酸鏈球菌素和0.1%溶菌酶組的菌落總數(shù)在貯藏8 d 內(nèi)均高于0.1%ε-聚賴氨酸組,三種保鮮劑的菌落總數(shù)均呈先下降后上升趨勢(shì),可能是蝦體本身所攜帶的細(xì)菌受低溫和抑菌保鮮劑雙重抑制,生長(zhǎng)出現(xiàn)延滯期,而后隨著貯藏時(shí)間延長(zhǎng),細(xì)菌逐漸適應(yīng)了環(huán)境,蝦體表面的保鮮劑逐漸滲透細(xì)胞內(nèi),導(dǎo)致蝦體表剩余保鮮劑的量越來(lái)越少,使耐冷微生物不斷繁殖,以致菌落總數(shù)逐漸上升[13-14];當(dāng)感官評(píng)分低于6 分時(shí)表示消費(fèi)者已無(wú)法接受,在保鮮6 d 時(shí),只有0.1%ε-聚賴氨酸組依然高于6 分。通過(guò)TVB-N、菌落總數(shù)、感官評(píng)價(jià)綜合表明抑菌型保鮮劑中的ε-聚賴氨酸處理羅氏沼蝦的保鮮效果較好。

圖1 不同抑菌型保鮮劑對(duì)羅氏沼蝦菌落總數(shù)、TVB-N 和感官評(píng)分的變化Fig.1 Changes of total bacteria counts,TVB-N and sensory evaluation of Macrobyachium rosenberqii by different bacteriostatic preservative

2.1.2 3 種抗氧化型保鮮劑篩選

如圖2 所示,三種抗氧化型保鮮劑的TBA 值均明顯低于對(duì)照組,說(shuō)明它們均能有效抑制蝦肉的脂肪氧化,其中茶多酚組抗氧化效果相對(duì)較好,且其第6 天時(shí)的TVB-N 值仍然低于20 mg∕(100 g);根據(jù)感官評(píng)分顯示茶多酚組對(duì)于消費(fèi)者的可接受程度更高。因此選擇茶多酚進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

圖2 不同抗氧化型保鮮劑對(duì)羅氏沼蝦TBA、TVB-N 和感官評(píng)分的變化Fig.2 Changes of TBA,TVB-N and sensory evaluation of Macrobyachium rosenberqii by different antioxidant preservative

2.1.3 3種涂膜型保鮮劑的篩選

圖3 不同涂膜型保鮮劑對(duì)羅氏沼蝦TVB-N、菌落總數(shù)和感官評(píng)分的變化Fig.3 Changes of TVB-N,total bacteria counts and sensory evaluation of Macrobyachium rosenberqii by different coating preservative

如圖3 顯示,殼聚糖組的TVB-N 值和菌落總數(shù)均低于其他兩種涂膜型保鮮劑組,但是在保鮮初期(0—4 d),殼聚糖組的感官評(píng)分低于其他兩組,主要原因是配制殼聚糖保鮮劑時(shí)加入了1%冰醋酸,在保鮮中后期,殼聚糖組較優(yōu)。

2.2 單一保鮮劑濃度的篩選

2.2.1 ε-聚賴氨酸濃度的篩選

圖4 分別顯示不同濃度的ε-聚賴氨酸的保鮮效果,0.3%ε-聚賴氨酸的TVB-N 值最優(yōu);當(dāng)質(zhì)量濃度達(dá)到0.5%時(shí)新鮮度下降及菌落總數(shù)上升,可能是由于ε-PL 分解產(chǎn)生的L-賴氨酸為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),促進(jìn)了細(xì)菌的生長(zhǎng),所以細(xì)菌總數(shù)反而有所增加[15];0.1%ε-聚賴氨酸因?yàn)闈舛容^低,感官評(píng)分在保鮮2—4 d 時(shí)相比0.5%ε-聚賴氨酸明顯下降,而后兩個(gè)濃度之間差異不大,0.3%ε-聚賴氨酸的感官評(píng)分在貯藏8 d 內(nèi)均最高。因此選擇0.2%—0.4%作為ε-聚賴氨酸的適宜保鮮濃度范圍。

圖4 不同濃度的ε-聚賴氨酸對(duì)羅氏沼蝦菌落總數(shù)、TVB-N 和感官評(píng)分的變化Fig.4 Changes of total bacteria counts,TVB-N and sensory evaluation of Macrobyachium rosenberqii by different concentrations of ε-PL

2.2.2 茶多酚濃度的篩選

由圖5 可知,0.3%質(zhì)量濃度的茶多酚處理羅氏沼蝦的抗氧化性和保鮮效果最優(yōu),TBA 值隨著保鮮時(shí)間總體呈上升趨勢(shì),并且均顯著低于其他濃度組;TVB-N 值表明0.3%茶多酚組的貨架期可達(dá)8 d;另外高濃度的茶多酚會(huì)使蝦體的表面色澤變黃,影響消費(fèi)者的可接受程度。因此選擇0.2%—0.4%作為茶多酚的適宜保鮮濃度范圍。

圖5 不同濃度的茶多酚對(duì)羅氏沼蝦TBA、TVB-N 和感官評(píng)分的變化Fig.5 Changes of TBA,TVB-N and sensory evaluation of Macrobyachium rosenberqii by different concentrations of TP

2.2.3 殼聚糖濃度的篩選

如圖6 所示,隨著殼聚糖質(zhì)量濃度的增加,保鮮和抑菌效果越好,而感官評(píng)分中3%殼聚糖保鮮組低于2%殼聚糖保鮮組,可能是高濃度的殼聚糖不易溶解,并且非常黏稠,不易形成干燥的薄膜,且因加入了冰醋酸,有較強(qiáng)的酸味,因此選擇1.5%—2.5%作為殼聚糖的適宜保鮮濃度。

2.3 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)結(jié)果

利用Design-Expert 10.0 軟件對(duì)表3 的數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸擬合,得到TVB-N 值對(duì)ε-聚賴氨酸濃度、茶多酚濃度、殼聚糖濃度三個(gè)因素的二次多項(xiàng)回歸方程模型為:

式中:Y為TVB-N值;A為ε-聚賴氨酸濃度;B為茶多酚濃度;C為殼聚糖濃度。

圖6 不同濃度的殼聚糖對(duì)羅氏沼蝦TVB-N、菌落總數(shù)和感官評(píng)分的變化Fig.6 Changes of TVB-N,total bacteria counts and sensory evaluation of Macrobyachium rosenberqii by different concentrations of CS

表3 響應(yīng)面試驗(yàn)方案及結(jié)果Table 3 Program and test result of response surface experiment

表4 回歸模型的方差分析Table 4 The variance analysis of regression model

回歸模型的方差分析見(jiàn)表4。表4 顯示該模型的F值為357.52,P＜0.0001,說(shuō)明該模型是極顯著的;失擬項(xiàng)的P值為0.5224(P＞0.05),表示不顯著,R2=0.9978,說(shuō)明該模型是可靠的,擬合程度較好;另外一次項(xiàng)A、B、C 的回歸系數(shù)均極顯著,說(shuō)明ε-聚賴氨酸濃度、茶多酚濃度、殼聚糖濃度三個(gè)因素對(duì)羅氏沼蝦TVB-N 值有很強(qiáng)的影響作用;交互項(xiàng)中AB、AC、BC 達(dá)到極顯著水平(P＜0.01);根據(jù)一次項(xiàng)的F值,可知各試驗(yàn)因素對(duì)響應(yīng)值TVB-N 值的影響強(qiáng)弱順序?yàn)?ε-聚賴氨酸濃度＞殼聚糖濃度＞茶多酚濃度。綜上說(shuō)明,該試驗(yàn)設(shè)計(jì)是可靠的并且可以用來(lái)預(yù)測(cè)各種因素對(duì)TVB-N 的影響。

圖7 是各因素交互作用對(duì)TVB-N 值的影響的響應(yīng)面3D 圖,響應(yīng)面圖的等高線為橢圓形表示兩因素交互作用顯著,而圓形則表示不顯著[16-17]。響應(yīng)面圖的等高線均為橢圓形,各因素相互作用顯著。

圖7 ε-聚賴氨酸、茶多酚和殼聚糖濃度的交互作用影響TVB-N 的響應(yīng)面3D 示意Fig.7 Interaction of ε-PL,TP and CS concentrations effect TVB-N of response surface 3D diagram

2.4 最優(yōu)工藝參數(shù)及驗(yàn)證試驗(yàn)

根據(jù)Design-Expert 10.0 軟件分析和數(shù)據(jù)優(yōu)化,得到最優(yōu)工藝條件:ε-聚賴氨酸濃度為0.32%、茶多酚濃度為0.33%、殼聚糖濃度為2.26%;根據(jù)實(shí)際可操作性,將其修正為:ε-聚賴氨酸濃度為0.3%、茶多酚濃度為0.3%、殼聚糖濃度為2.3%;通過(guò)3 次驗(yàn)證試驗(yàn),保鮮第8 天的TVB-N 值達(dá)到18.06 mg∕(100 g),接近預(yù)測(cè)值,表明響應(yīng)面法優(yōu)化羅氏沼蝦復(fù)合保鮮工藝是穩(wěn)定可行的。

2.5 復(fù)合保鮮劑對(duì)羅氏沼蝦保鮮效果的影響

圖8 不同保鮮處理對(duì)羅氏沼蝦pH、TVB-N、菌落總數(shù)、TBA 和感官評(píng)分變化Fig.8 Changes of pH,TVB-N,total bacteria counts,TBA and sensory evaluation of Macrobyachium rosenberqii by different preservation groups

如圖8(a)表示不同保鮮處理組對(duì)羅氏沼蝦pH 的變化,pH 是評(píng)判蝦體肉質(zhì)優(yōu)劣與其新鮮度的關(guān)鍵指標(biāo)之一[15,18]。在冷藏保鮮過(guò)程中,蝦體在自身酶和微生物的作用下,產(chǎn)生大量氨、三甲胺、吲哚、組胺等堿性物質(zhì)[19]。有研究表明,pH 在7.6 以上則認(rèn)為是消費(fèi)者不可接受的值[19-21]。最優(yōu)試驗(yàn)組在保鮮過(guò)程中pH 明顯低于單一保鮮劑組和空白對(duì)照組,表明復(fù)合保鮮劑處理羅氏沼蝦可有效防止蝦體自溶腐敗。

圖8(b,c)中幾種不同處理的TVB-N 值和細(xì)菌總數(shù)均呈持續(xù)上升趨勢(shì),最優(yōu)試驗(yàn)組明顯上升幅度更平緩,保鮮第10 d 時(shí)的TVB-N 值僅為20.57 mg∕(100 g)。通常根據(jù)淡水魚、蝦中揮發(fā)性鹽基氮的可接受值低于20 mg∕(100 g)[22]。最優(yōu)試驗(yàn)組能有效減緩細(xì)菌的繁殖速度,說(shuō)明復(fù)合保鮮劑組具有一定的抑菌作用,有效降低細(xì)菌對(duì)蛋白質(zhì)的分解,從而達(dá)到延緩TVB-N 上升的作用[21]。

圖8(d)可以看出在保鮮過(guò)程中,復(fù)合保鮮劑組＜0.3%茶多酚＜2.3%殼聚糖＜0.3%ε-聚賴氨酸,茶多酚具有較強(qiáng)抗氧化性,而殼聚糖由于在蝦體表面形成一層薄膜,一定程度上隔絕蝦體與外界的氧氣,因此復(fù)合保鮮均協(xié)同發(fā)揮作用,延緩脂肪氧化,延長(zhǎng)蝦體貨架期。

圖8(e)中的感官評(píng)分也反映蝦體相同的新鮮程度,雖然復(fù)合保鮮劑組的評(píng)分并未達(dá)到預(yù)期,主要因?yàn)闅ぞ厶峭磕ぴ斐傻奈r體表面粘連感以及茶多酚作用后導(dǎo)致的色澤黃暗,嗅覺(jué)上仍殘留少許醋酸和殼聚糖的混合固有氣味,在一定程度上影響消費(fèi)者的可接受程度,需要后續(xù)進(jìn)一步對(duì)保鮮機(jī)制的探究,從而達(dá)到更好的保鮮效果。

3 結(jié)論

采用Box-Behnken 的中心組合設(shè)計(jì)響應(yīng)面法建立ε-聚賴氨酸濃度、茶多酚濃度、殼聚糖濃度與TVB-N值之間的響應(yīng)面數(shù)學(xué)模型,確定了羅氏沼蝦利用ε-聚賴氨酸、茶多酚、殼聚糖復(fù)配保鮮劑冷藏(4 ±1)℃保鮮的工藝參數(shù)為:ε-聚賴氨酸濃度為0.3%、茶多酚濃度為0.3%、殼聚糖濃度為2.3%;羅氏保鮮8 d 后TVB-N 值為18.06 mg∕(100 g),回歸分析和驗(yàn)證試驗(yàn)表明了該響應(yīng)面法具有可行性。在此條件下,羅氏沼蝦冷藏10 d 期間,TVB-N 值、TBA 值、菌落總數(shù)、pH 以及感官評(píng)分的最優(yōu)保鮮試驗(yàn)組均顯著優(yōu)于單一保鮮劑組以及空白對(duì)照組,變化趨勢(shì)保持一致。這表明ε-聚賴氨酸、茶多酚與殼聚糖復(fù)配保鮮劑可減緩羅氏沼蝦的腐敗變質(zhì),延長(zhǎng)貨架期至9—10 d。