陳金虎 ，余萬鑫，耿福能，張成桂，何 苗?，巫秀美

（1.大理大學(xué)，云南省昆蟲生物醫(yī)藥研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，藥用特種昆蟲開發(fā)國家地方聯(lián)合工程研究中心，中國西南藥用昆蟲及蛛形類資源開發(fā)利用協(xié)同創(chuàng)新中心，云南大理 671000；2.藥用美洲大蠊四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川成都 610000）

潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）是一種以結(jié)腸和直腸黏膜彌漫性炎癥為特征的慢性炎癥性疾病。UC 的病因機(jī)制尚不清楚，多數(shù)研究認(rèn)為其主要是由遺傳易感性、外界環(huán)境刺激、自身免疫性疾病、腸道菌群失調(diào)和腸黏膜屏障損傷共同作用的結(jié)果［1］。目前治療UC 的一線藥物為氨基水楊酸類，其治療周期長、有效性低，長期服用不良反應(yīng)大、疾病易復(fù)發(fā)，嚴(yán)重增加了患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和生活困擾，并有可能提高結(jié)腸癌的風(fēng)險(xiǎn)［2］。

美洲大蠊Periplaneta americana L.作為一味中藥材，入藥始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，其主要化學(xué)成分為氨基酸、凝集素、活性肽類及硫酸黏糖多糖類［3］。現(xiàn)代藥理學(xué)證明，美洲大蠊提取物具有加速病損組織修復(fù)、改善病灶部位微循環(huán)、消除炎癥水腫、抗病毒、鞏固機(jī)體防御機(jī)制、調(diào)節(jié)機(jī)體T淋巴細(xì)胞與B 淋巴細(xì)胞比例等功能［4］。本課題組前期研究證實(shí)了美洲大蠊提取物對噁唑酮（Oxazolone，OXZ）［5］、2，4-二硝基氯苯（1-chloro-2，4-dini-trochlorobenzene，DNCB）［6］誘導(dǎo)UC 大鼠均有顯著地促黏膜修復(fù)作用，但是治療前期抑制炎癥的作用卻不明顯。蒲公英作為一種藥食兩用的菊科植物，主要成分為酚酸類、黃酮類和多糖類［7］?，F(xiàn)代藥理研究證明，蒲公英具有抗炎、抗氧化和免疫調(diào)節(jié)等功效［7］。在臨床和實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎中均已證明蒲公英提取物對UC 具有治療作用［8-9］。因此，課題組依據(jù)中醫(yī)治療UC 的特點(diǎn)將美洲大蠊與具有抗炎功效的蒲公英進(jìn)行配伍，組成抗炎和促修復(fù)作用更為顯著的動植物藥復(fù)方Ento-PB。其中美洲大蠊入心、肝、脾、腎，健脾、散瘀消腫、斂瘡生肌促修復(fù)，加強(qiáng)收斂止瀉；蒲公英苦寒，清熱燥濕，瀉火解毒，善治腸胃濕熱所致泄瀉、痢疾；兩藥合用以共同調(diào)補(bǔ)臟腑，益氣健脾、去腐生肌、消除炎癥水腫之功效。本研究通過噁唑酮誘導(dǎo)的大鼠UC 模型，評價(jià)復(fù)方Ento-PB 對活動期UC 的作用，以期為其中藥配方制劑的研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 動物 60 只SD 大鼠，SPF 級，雌雄各半，體質(zhì)量180～220 g，購于湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動物有限公司 ［許可證號SCXK（湘）-2016-0004］。在大理大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心飼養(yǎng)［許可證號SYXK（滇）2011-0004］。

1.2 藥物與試劑 蒲公英全草（批號170306）購于云南大理中藥材市場，由大理大學(xué)生藥學(xué)專業(yè)何苗助理研究員鑒定為蒙古蒲公英Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.；蜚蠊成蟲干燥全體（批號YF1807014）購于四川好醫(yī)生攀西藥業(yè)責(zé)任有限公司，經(jīng)大理大學(xué)動物學(xué)專業(yè)楊自忠教授鑒定為美洲大蠊Periplaneta americana L.。柳氮磺吡啶（SASP，批號09160503，上海信誼天平藥業(yè)有限公司）；咖啡酸（批號110885-200102）、丙氨酸對照品（批號140676-201706）均購于中國食品藥品檢定研究院；三氟乙酸（TFA，Lot 17040277，美國天地有限公司）；噁唑酮（OXZ，Lot 11432-035，深圳市麗晶生化科技有限公司）；大鼠白介素4（IL-4，批號R171229-002a）、大鼠白介素10（IL-10，批號R170112004a）、大鼠腫瘤壞死因子-α（TNF-α，批號R170103-002a）、表皮生長因子（EGF，批號R71105-099a）試劑盒均購于欣博盛生物科技有限公司；隱血試劑盒（批號20170424）、大鼠白介素13（IL-13，批號 20171215）、髓過氧化物酶（MPO，批號20170112）、一氧化氮合酶（NOS，批號20171022）試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。

1.3 儀器 SpectraMax M2 多功能酶標(biāo)儀（美國Molecular Devices）；HC3018R 型高速離心機(jī)（安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司）；UV-6000PC 型紫外-可見分光光度計(jì)（上海元析儀器有限公司）；Agilent 1260 高效液相色譜儀（美國安捷倫科技有限公司）。

1.4 復(fù)方Ento-PB 制備 按7 ∶3 的比例稱取蜚蠊和蒲公英，加水煮沸，濾過，濾液濃縮后加入適量的乙醇，攪拌均勻，靜置過夜，離心，取上清液，濃縮至干燥即得復(fù)方Ento-PB 提取物，密封保存在-20 ℃。

1.5 復(fù)方Ento-PB 中總氨基酸和咖啡酸含量測定根據(jù)《四川省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》 和2020 年版《中國藥典》 對美洲大蠊和蒲公英的質(zhì)量控制要求，采用茚三酮顯色法測定復(fù)方Ento-PB 中的總氨基酸含量，同時(shí)HPLC 法測定復(fù)方Ento-PB 中咖啡酸的含量。用超純水配制1.0 mg／mL 的復(fù)方Ento-PB 供試液，按文獻(xiàn)［10-11］方法對復(fù)方Ento-PB 中的總氨基酸和咖啡酸含量進(jìn)行檢測，并建立丙氨酸線性曲線（Y＝0.028 7X+0.003 9，r ＝0.999 8），計(jì)算得復(fù)方Ento-PB 中總氨基酸含量為9.85%；用0.22 μm微孔濾膜過濾復(fù)方Ento-PB 供試液，HPLC色譜條件為Sepax HP-C18（4.6 mm × 250 mm，5 μm）；流動相0.1% TFA 水溶液（A）-0.1%TFA 甲醇（B），梯度洗脫（0 min，11% B；15 min，11%B；21 min，70%B；30 min，11%B）；體積流量1.0 mL／min；進(jìn)樣量10 μL；檢測波長323 nm；室溫。測定得復(fù)方Ento-PB 中的咖啡酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.08%。

2 方法

2.1 模型建立 本研究參考并改進(jìn)了文獻(xiàn)報(bào)道的噁唑酮誘導(dǎo)結(jié)腸炎的方法［12］。造模前1 d，對所有大鼠背部2 cm × 2 cm 的區(qū)域進(jìn)行剃毛，同時(shí)，隨機(jī)選取10 只大鼠作為正常組，雌雄各半。其余大鼠以0.2 mL 噁唑酮（30 mg／mL，無水乙醇）涂抹在暴露的皮膚處，連續(xù)7 d。第7 天禁食不禁水24 h 后，用異氟醚麻醉大鼠，將聚乙烯軟導(dǎo)管（外徑2.00 mm，長度10 cm）通過直腸小心地插入結(jié)腸，其尖端位于肛門近端約8 cm 處，將0.4 mL噁唑酮（10 mg／mL，50% 乙醇溶液）使用1 mL 注射器通過軟導(dǎo)管緩慢注入結(jié)腸，緩緩拔出導(dǎo)管，使大鼠保持頭部朝下姿勢60 s。正常組大鼠用生理鹽水代替造模劑按上述方法平行操作。

2.2 分組 造模結(jié)束24 h 后，將造模大鼠按文獻(xiàn)［13］標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行疾病活動指數(shù)（disease activity index，DAI）評分，并剔除DAI 評分為0～6 分的大鼠，剩余大鼠隨機(jī)分為模型組，SASP 組（0.3 g／kg），復(fù)方Ento-PB 低、中、高劑量組（0.05、0.1、0.2 g／kg），每組10 只，雌雄各半。分組當(dāng)天給藥，每天1 次，持續(xù)7 d。

2.3 指標(biāo)檢測 給藥期間，每天觀察大鼠的一般狀態(tài)，并在給藥的第1、4、7 d 對大鼠進(jìn)行DAI 評分。末次給藥24 h 后，水合氯醛麻醉大鼠，腹主動脈取血，3 500 r／min 離心10 min，取血清，用試劑盒檢測tNOS、iNOS 活性及 IL-4、IL-10、IL-13、EGF 表達(dá)。解剖大鼠取出肝臟、脾臟和胸腺，稱重，計(jì)算臟器指數(shù)。取出結(jié)腸，剔除腸系膜周圍脂肪組織，沿腸系膜剪開，冷生理鹽水洗凈糞便，參照文獻(xiàn)［14］方法進(jìn)行結(jié)腸黏膜損傷指數(shù)（colon mucosal damage index，CMDI）評分。將結(jié)腸縱向剪取一半稱定質(zhì)量，按1 ∶9 用冰生理鹽水勻漿，3 500 r／min 離心10 min，取上清液，試劑盒檢測勻漿液中MPO 活性及炎性標(biāo)志物TNF-α 表達(dá)。剩余結(jié)腸組織用4%多聚甲醛固定，包埋后制成5 μm 切片，蘇木精-伊紅（H＆E）染色，參照文獻(xiàn)［15］方法進(jìn)行組織病理學(xué)（histopathological score，HS）評分。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 通過SPSS 24.0 軟件進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)以（）表示，多組間比較采用One-way ANOVA 分析，兩兩比較采用LSD 檢驗(yàn)方法或Tamhane’s T 檢驗(yàn)。以P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 復(fù)方Ento-PB 對UC 大鼠一般狀態(tài)的影響給藥期間，正常組大鼠活潑好動，被毛光滑發(fā)亮，體質(zhì)量增加，大便成形。模型組大鼠毛色無光澤、枯亂，體質(zhì)量明顯減輕，精神萎靡，出現(xiàn)拱背、扎堆等現(xiàn)象，大便多為黏液便和膿血便。UC 大鼠經(jīng)SASP 治療后精神狀態(tài)明顯好轉(zhuǎn)，活動增多，糞便基本成形；復(fù)方Ento-PB 各劑量組也能不同程度的改善大鼠稀便、血便等癥狀，糞便基本成形，體質(zhì)量逐漸回升。

3.2 復(fù)方Ento-PB 對UC 大鼠DAI 的影響 如表1所示，給藥第1 天，與正常組比較，經(jīng)噁唑酮處理的各組大鼠DAI 評分升高（P＜0.01），提示建模成功，經(jīng)SASP 和復(fù)方Ento-PB 處理后，DAI 評分呈現(xiàn)下降趨勢。給藥第7 天，與正常組比較，模型組大鼠DAI 評分升高（P＜0.01）；與模型組比較，SASP 組大鼠DAI 評分降低（P＜0.01）；復(fù)方Ento-PB 組大鼠DAI 評分呈劑量依賴性降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，P＜0.01）。

3.3 復(fù)方Ento-PB 對UC 大鼠結(jié)腸相關(guān)指標(biāo)的影響 如表2 所示，與正常組比較，模型組大鼠結(jié)腸出現(xiàn)縮短變寬，黏膜表面有顆粒狀改變，質(zhì)脆易斷并形成炎癥性息肉及潰瘍，結(jié)腸長寬比顯著下降、CMDI 評分和結(jié)腸指數(shù)升高（P＜0.01）；與模型組比較，SASP 組大鼠結(jié)腸長寬比升高、CMDI 評分和結(jié)腸指數(shù)降低（P＜0.05，P＜0.01）；復(fù)方Ento-PB 各劑量組大鼠結(jié)腸長寬比升高、CMDI 評分降低，結(jié)腸指數(shù)呈劑量依賴性降低（P＜0.01）。

表1 復(fù)方Ento-PB 對噁唑酮誘導(dǎo)UC 大鼠DAI 評分的影響（，n＝10）Tab.1 Effects of compound Ento-PB on DAI scores in oxazolone-induced UC rats（，n＝10）

表1 復(fù)方Ento-PB 對噁唑酮誘導(dǎo)UC 大鼠DAI 評分的影響（，n＝10）Tab.1 Effects of compound Ento-PB on DAI scores in oxazolone-induced UC rats（，n＝10）

注：與正常組比較，??P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

表2 復(fù)方Ento-PB 對噁唑酮誘導(dǎo)UC 大鼠結(jié)腸相關(guān)指數(shù)的影響（，n＝10）Tab.2 Effects of compound Ento-PB on colon-related indices in oxazolone-induced UC rats（，n＝10）

表2 復(fù)方Ento-PB 對噁唑酮誘導(dǎo)UC 大鼠結(jié)腸相關(guān)指數(shù)的影響（，n＝10）Tab.2 Effects of compound Ento-PB on colon-related indices in oxazolone-induced UC rats（，n＝10）

注：與正常組比較，?P＜0.05，??P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

3.4 復(fù)方Ento-PB 對UC 大鼠臟器指數(shù)的影響如表3 所示，與正常組比較，模型組大鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)降低（P＜0.05），肝臟指數(shù)無明顯影響；與模型組比較，SASP 組大鼠肝臟指數(shù)和脾臟指數(shù)升高（P＜0.05，P＜0.01），復(fù)方Ento-PB 組大鼠脾臟指數(shù)升高（P＜0.05，P＜0.01）。

表3 復(fù)方Ento-PB 對噁唑酮誘導(dǎo)UC 大鼠臟器指數(shù)的影響（，n＝10）Tab.3 Effects of compound Ento-PB on visceral indices in oxazolone-induced UC rats（，n＝10）

表3 復(fù)方Ento-PB 對噁唑酮誘導(dǎo)UC 大鼠臟器指數(shù)的影響（，n＝10）Tab.3 Effects of compound Ento-PB on visceral indices in oxazolone-induced UC rats（，n＝10）

注：與正常組比較，?P＜0.05，??P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

3.5 復(fù)方Ento-PB 對UC 大鼠血清生化指標(biāo)的影響 如表4 所示，與正常組比較，模型組大鼠血清tNOS、iNOS、IL-13 水平升高（P ＜0.01），IL-4、IL-10、EGF 表達(dá)降低（P＜0.01）；與模型組比較，SASP 組大鼠血清tNOS、iNOS、IL-13 水平降低（P＜0.05，P＜0.01），IL-4、IL-10、EGF 表達(dá)升高（P ＜0.01）；復(fù)方Ento-PB 高劑量組大鼠血清tNOS、iNOS、IL-13 水平降低（P ＜0.05，P ＜0.01），IL-4、IL-10 和EGF 的表達(dá)升高（P＜0.05，P＜0.01）。

3.6 復(fù)方Ento-PB 對UC 大鼠結(jié)腸組織TNF-α 及MPO 的影響 如表5 所示，與正常組比較，模型組大鼠結(jié)腸TNF-α 水平、MPO 活性升高（P ＜0.05，P＜0.01）；與模型組比較，SASP 組大鼠結(jié)腸TNF-α 水平、MPO 活性降低（P ＜0.05，P ＜0.01）；復(fù)方Ento-PB 組可呈劑量依賴性降低大鼠結(jié)腸TNF-α 水平（P＜0.01），并且高劑量組大鼠結(jié)腸MPO 活性降低（P＜0.05）。

表4 復(fù)方Ento-PB 對噁唑酮誘導(dǎo)UC 大鼠血清tNOS、iNOS、IL-13、IL-4、IL-10、EGF 水平的影響（，n＝10）Tab.4 Effects of compound Ento-PB on serum levels of tNOS，iNOS，IL-13，IL-4，IL-10 and EGF in oxazolone-induced UC rats（，n＝10）

表4 復(fù)方Ento-PB 對噁唑酮誘導(dǎo)UC 大鼠血清tNOS、iNOS、IL-13、IL-4、IL-10、EGF 水平的影響（，n＝10）Tab.4 Effects of compound Ento-PB on serum levels of tNOS，iNOS，IL-13，IL-4，IL-10 and EGF in oxazolone-induced UC rats（，n＝10）

注：與正常組比較，?P＜0.05，??P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

表5 復(fù)方Ento-PB 對噁唑酮誘導(dǎo)UC 大鼠結(jié)腸組織TNF-α、MPO 水平的影響（，n＝10）Tab.5 Effects of compound Ento-PB on TNF-α and MPO levels in colonic tissue of oxazolone-induced UC rats（，n＝10）

表5 復(fù)方Ento-PB 對噁唑酮誘導(dǎo)UC 大鼠結(jié)腸組織TNF-α、MPO 水平的影響（，n＝10）Tab.5 Effects of compound Ento-PB on TNF-α and MPO levels in colonic tissue of oxazolone-induced UC rats（，n＝10）

注：與正常組比較，?P＜0.05，??P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

3.7 復(fù)方Ento-PB 對UC 大鼠結(jié)腸HS 評分的影響 如表6、圖1 所示，與正常組比較，模型組大鼠結(jié)腸病理表現(xiàn)為隱窩消失、杯狀細(xì)胞面積丟失、黏膜層壞死，固有層出血、炎細(xì)胞浸潤到黏膜肌或黏膜肌下層。模型組大鼠結(jié)腸上皮細(xì)胞、炎細(xì)胞浸潤評分和HS 評分均高于正常組（P＜0.01）；與模型組比較，SASP 組大鼠結(jié)腸上皮細(xì)胞、炎細(xì)胞浸潤評分、HS 評分降低（P ＜0.01），復(fù)方Ento-PB高劑量組大鼠結(jié)腸上皮細(xì)胞、炎細(xì)胞浸潤評分降低（P＜0.05，P＜0.01），復(fù)方Ento-PB 各劑量組大鼠HS 評分降低（P＜0.05，P＜0.01）。

表6 復(fù)方Ento-PB 對噁唑酮誘導(dǎo)UC 大鼠HS 評分的影響（，n＝10）Tab.6 Effects of compound Ento-PB on HS scores in oxazolone-induced UC rats（，n＝10）

表6 復(fù)方Ento-PB 對噁唑酮誘導(dǎo)UC 大鼠HS 評分的影響（，n＝10）Tab.6 Effects of compound Ento-PB on HS scores in oxazolone-induced UC rats（，n＝10）

注：與正常組比較，?P＜0.05，??P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

4 討論

UC 是一種與黏膜炎癥反應(yīng)持續(xù)存在、免疫功能異常和腸屏障受損相關(guān)的結(jié)腸炎癥性疾病［16］。噁唑酮誘導(dǎo)的急性結(jié)腸炎模型，在病理學(xué)特征、免疫學(xué)特征和炎癥分布上均類似臨床活動期的UC 患者，具有建模周期短、可重復(fù)性好等特點(diǎn)，是較為理想的人類活動期UC 模型［17］。

在本研究中，在皮膚預(yù)先用噁唑酮致敏后，通過直腸內(nèi)給予低劑量的噁唑酮來誘發(fā)大鼠急性結(jié)腸炎。造模后大鼠出現(xiàn)腹瀉，黏液血便，體質(zhì)量減輕等臨床表現(xiàn)，DAI、CMDI 評分升高。鏡下檢查可見單核細(xì)胞透壁浸潤、杯狀細(xì)胞大面積丟失和隱窩結(jié)構(gòu)變形，HS 評分升高。此外，模型組大鼠結(jié)腸組織中MPO 活性和血清中tNOS、iNOS 表達(dá)上調(diào)，這是結(jié)腸黏膜中中性粒細(xì)胞浸潤致使炎癥上升的標(biāo)志。SASP 和復(fù)方Ento-PB 各劑量組顯著減輕了結(jié)腸的病理損傷，組織中MPO 活性以及血清中tNOS、iNOS 表達(dá)均不同程度的降低。提示復(fù)方Ento-PB 可以抑制炎癥細(xì)胞浸潤，改善UC 相關(guān)的臨床癥狀，對噁唑酮誘導(dǎo)的結(jié)腸炎大鼠有保護(hù)作用。

圖1 各組大鼠結(jié)腸組織的組織病理學(xué)評分（HE，×200）Fig.1 Histopathological scores of rats colon tissue in each group（HE，×200）

IL-4 作為調(diào)節(jié)細(xì)胞可激活Th0 細(xì)胞向Th2 細(xì)胞分化，具有抑制炎癥反應(yīng)和維持腸道免疫平衡作用［18］。IL-10 作為典型的抗炎細(xì)胞因子與免疫抑制性Th2 型細(xì)胞因子，能從分子水平上抑制TNF-α、IL-1β 等促炎因子的分泌，并下調(diào)Th1 細(xì)胞的分化［19］。IL-4 和IL-10 協(xié)同作用下可逆轉(zhuǎn)Th1／Th2 細(xì)胞活化過程，從而改善黏膜損傷情況。IL-13 作為Th2 細(xì)胞關(guān)鍵效應(yīng)細(xì)胞因子，其局部濃度過高不僅導(dǎo)致上皮屏障功能受損，而且還影響腸上皮細(xì)胞凋亡，緊密連接和恢復(fù)速度［18］。TNF-α 由單核巨噬細(xì)胞和活化Th1 細(xì)胞分泌，具有誘導(dǎo)iNOS、COX2（環(huán)氧化酶）等多種促炎細(xì)胞因子合成，啟動“瀑布式”炎癥聯(lián)級反應(yīng)，加劇UC 病情的發(fā)展［20］。EGF 是作用于組織、細(xì)胞、分化基因的一種多功能修復(fù)細(xì)胞因子，通過增加細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的合成，刺激組織的生長，在腸道黏膜損傷和修復(fù)中發(fā)揮著重要作用［21］。在本研究中，模型組大鼠血清中IL-13 和結(jié)腸組織TNF-α 表達(dá)量升高，而血清IL-4、IL-10、EGF 表達(dá)量降低，提示模型組大鼠腸屏障功能受損、機(jī)體抗炎能力降低。而經(jīng)復(fù)方Ento-PB治療后，TNF-α、IL-13 水平降低，而IL-4、IL-10和EGF 水平升高。其中復(fù)方Ento-PB 高劑量組治療效果接近于陽性藥SASP 組。提示復(fù)方Ento-PB可以通過調(diào)節(jié)炎性細(xì)胞因子分泌，減輕機(jī)體炎癥反應(yīng)，最終達(dá)到治療UC 的作用。

綜上所述，復(fù)方Ento-PB 高劑量組的治療作用趨近于SASP 組。且在促進(jìn)黏膜修復(fù)方面優(yōu)于SASP，這從CMDI 評分以及EGF 和MPO 的表達(dá)上可以體現(xiàn)，提示復(fù)方Ento-PB 具有促進(jìn)黏膜損傷后的快速愈合作用，若與抗炎藥物配伍使用，將會彌補(bǔ)抗炎藥物對UC 患者黏膜愈合率低的缺陷。課題組后期將深入研究復(fù)方Ento-PB 抗UC 的作用機(jī)制，以期為復(fù)方Ento-PB 的藥動學(xué)與藥效作用的關(guān)聯(lián)提供理論依據(jù)和證明。