王 洲，王 權(quán)，王建國(guó)，林阿朋，劉美劍，齊富剛

（江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇泰州 225300）

鱈魚是一種冷水魚，由于肉質(zhì)鮮美深受消費(fèi)者的喜愛，因此，了解其生命階段的營(yíng)養(yǎng)需求對(duì)發(fā)展和改進(jìn)養(yǎng)殖技術(shù)至關(guān)重要。迄今為止，大多數(shù)關(guān)于鱈魚的營(yíng)養(yǎng)研究都集中在早期飼養(yǎng)階段，如通過早期使用干微顆粒飼料進(jìn)行人工飼養(yǎng)，減少了勞動(dòng)強(qiáng)度（Jensen等，2011）。然而，早期階段飼料過于昂貴，成本效益不高，因此，了解飼料利用率對(duì)衡量生產(chǎn)成本至關(guān)重要（葉文紅，2019）。該階段飼喂以海洋類高蛋白為主的飼料可以改善鱈魚幼魚的生長(zhǎng)，但在后續(xù)階段對(duì)生長(zhǎng)性能無顯著改善作用。因此，隨著鱈魚飼養(yǎng)制度的優(yōu)化，有必要評(píng)估日糧配方中的新成分，以促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育，減少魚粉使用。魚類營(yíng)養(yǎng)學(xué)家對(duì)大豆蛋白質(zhì)來源飼料非常有興趣，因?yàn)樗鼈兒懈咚降牡鞍踪|(zhì)，并能提供相對(duì)平衡的氨基酸，同時(shí)大豆蛋白也是許多魚類的一種魚粉替代蛋白原料，但未經(jīng)加工的大豆含有大量的抗?fàn)I養(yǎng)因子，會(huì)對(duì)某些物種的營(yíng)養(yǎng)、解剖和生理產(chǎn)生負(fù)面影響（吳玉波，2014）。因此，大豆加工精制物和生物加工混合物在作為魚粉替代品加入到魚飼料中時(shí)顯示了良好的生長(zhǎng)性能（段晶等，2019）。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，加工大豆蛋白成分可刺激固有免疫系統(tǒng)，改變遠(yuǎn)端腸道微生物群的組成來影響?zhàn)B殖魚類生長(zhǎng)（李杰，2017）。但目前有關(guān)不同的大豆蛋白對(duì)鱈魚的研究信息有限，因此，本研究旨在評(píng)估日糧添加不同處理方式的大豆替代魚粉對(duì)鱈魚生長(zhǎng)性能、體成分及免疫學(xué)指標(biāo)的影響。

1 材料與方法

1.1 日糧配方及動(dòng)物分組試驗(yàn)將體重一致的576條鱈魚隨機(jī)分配到4組，每組144條，分別飼養(yǎng)在4個(gè)水族箱中（36條/個(gè)）。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧（25%魚粉），處理組分別用20%的豆粕、大豆?jié)饪s蛋白和發(fā)酵豆粕替代魚粉。

表1 不同處理方式大豆替代魚粉日糧組成 及營(yíng)養(yǎng)水平

1.2 飼養(yǎng)管理在為期13周的試驗(yàn)中，水族箱的水溫維持在（23±1.5）℃，溶解氧維持在（7.0±0.8）mg/L。每天記錄飼料投喂量，試驗(yàn)結(jié)束后稱量體重。參考方衛(wèi)東等（2016）的方法計(jì)算生長(zhǎng)性能指標(biāo)和體成分。每個(gè)重復(fù)選擇5條魚進(jìn)行屠宰，分離肝臟、脾臟、內(nèi)臟脂肪和內(nèi)臟，稱重，計(jì)算器官重量與活體重的百分比，用于表示器官指數(shù)。

1.3 樣品采集及分析采集血液用于血液生化指標(biāo)分析，同時(shí)將分離的腎臟用于提取mRNA，樣品用于測(cè)定白細(xì)胞介素-8（IL-8）和TLR-22受體基因表達(dá)（Bakkemo等，2011）。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析使用SPSS軟件對(duì)試驗(yàn)分組進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理方式的大豆替代魚粉對(duì)鱈魚生長(zhǎng)性能及器官指數(shù)的影響由表2可知，日糧用20%不同加工方式的大豆替代魚粉對(duì)鱈魚相對(duì)生長(zhǎng)率、外型指數(shù)、存活率和脾臟指數(shù)的影響無顯著差異（P＞0.05）。豆粕組鱈魚的末重顯著高于對(duì)照組和發(fā)酵豆粕組（P＜0.05），同時(shí)，豆粕組和發(fā)酵豆粕組采食量顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），而對(duì)照組和豆粕組特定生長(zhǎng)率和蛋白質(zhì)效率顯著高于發(fā)酵豆粕組（P＜0.05）。豆粕組鱈魚臟指數(shù)顯著高于其他組（P＜0.05），而豆粕組和大豆?jié)饪s蛋白組內(nèi)臟指數(shù)及內(nèi)臟脂肪指數(shù)均顯著高于對(duì)照組和發(fā)酵豆粕組（P＜0.05）。

表2 不同處理方式的大豆替代魚粉對(duì)鱈魚生長(zhǎng)性能及器官指數(shù)的影響

2.2 不同處理方式的大豆替代魚粉對(duì)鱈魚體成分的影響由表3可知，日糧用20%豆粕、大豆?jié)饪s蛋白和發(fā)酵豆粕替代魚粉對(duì)鱈魚機(jī)體總能、蛋白質(zhì)、水分和粗灰分含量無顯著影響（P＞0.05）。豆粕組鱈魚的體脂肪含量較大豆?jié)饪s蛋白組和發(fā)酵豆粕組顯著提高44.53%和41.85%（P＜0.05），但與對(duì)照組無顯著差異（P＞0.05）。

表3 不同處理方式大豆替代魚粉對(duì)鱈魚體 成分的影響

2.3 不同處理方式大豆替代魚粉對(duì)鱈魚血液學(xué)及免疫指標(biāo)的影響由表4可知，日糧添加不同處理的大豆替代魚粉對(duì)鱈魚血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板數(shù)量及血球容積的影響無顯著差異（P＞0.05）。發(fā)酵豆粕組血液溶菌酶活性最高（P＜0.05），豆粕和大豆?jié)饪s蛋白組其次，對(duì)照組最低（P＜0.05）。對(duì)照組、豆粕組和大豆?jié)饪s蛋白組腎臟IL-8基因mRNA相對(duì)表達(dá)水平顯著高于發(fā)酵豆粕組（P＜0.05），而豆粕組和大豆?jié)饪s蛋白組腎臟TLR-22基因mRNA相對(duì)表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組和發(fā)酵豆粕組（P＜0.05）。

表4 不同處理方式大豆替代魚粉對(duì)鱈魚血液生化指標(biāo)及免疫指標(biāo)的影響

3 討論

本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，以20%豆粕替代魚粉時(shí)鱈魚的飼料效率表現(xiàn)最佳，這與Hansen等（2007）報(bào)道的結(jié)果一致，其結(jié)果也顯示出鱈魚對(duì)植物蛋白的耐受性，具有良好的蛋白質(zhì)消化率。Colburn等（2012）發(fā)現(xiàn)，用不同比例的豆粕或大豆?jié)饪s蛋白替代50%的魚粉適合于幼大西洋鱈魚的生產(chǎn)。在本研究中，用20%發(fā)酵豆粕替代魚粉，鱈魚的飼料效率和特定生長(zhǎng)率均不佳。豆粕組鱈魚肝臟和內(nèi)臟脂肪指數(shù)顯著高于對(duì)照組，提示內(nèi)臟組織器官的發(fā)育得到改善。

由于與消化相關(guān)的酶在魚的整個(gè)生命階段都可能發(fā)生變化，因此，使用經(jīng)過測(cè)試的大豆成分對(duì)日糧配方進(jìn)行改進(jìn)是可能的。考慮到鱈魚由于這些因素的營(yíng)養(yǎng)吸收相對(duì)復(fù)雜，有必要進(jìn)一步評(píng)估這些大豆成分在鱈魚體內(nèi)的消化率，以更好地解釋生長(zhǎng)結(jié)果。因此，可以優(yōu)化添加水平以提高生長(zhǎng)性能（Aksnes等，2006）。盡管本研究未評(píng)估鱈魚對(duì)各種原料消化率的影響，但豆粕組鱈魚體脂肪含量顯著高于其他兩組大豆蛋白源。

血液生化指標(biāo)顯示，血球容積、血紅蛋白、紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板數(shù)量無顯著差異，這與Hansen等（2007）報(bào)道的結(jié)果一致。豆粕組和大豆?jié)饪s蛋白組溶菌酶活性無顯著差異，其中對(duì)照組最低，這可能與鱈魚本身血清溶菌酶活性很低有關(guān)。本研究還檢測(cè)了腎組織內(nèi)IL-8和TLR-22基因mRNA表達(dá)水平。IL-8是一種對(duì)白細(xì)胞具有趨化活性的促炎細(xì)胞因子，已被發(fā)現(xiàn)與大西洋鱈魚的應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)（Caipang等，2008），而TLR-22是一種先天性免疫受體，與dsRNA和細(xì)菌病原體識(shí)別有關(guān)（Paria等，2018）。基于豆粕組鱈魚腎臟中這兩種基因mRNA相對(duì)表達(dá)量提高，提示免疫和應(yīng)激反應(yīng)有所改善。

4 結(jié)論

用20%豆粕或大豆?jié)饪s蛋白替代魚粉可以改善鱈魚生長(zhǎng)性能，對(duì)體成分和血液學(xué)指標(biāo)無負(fù)面影響，同時(shí)可提高TLR-22基因mRNA相對(duì)表達(dá)水平。總的來說，用豆粕或大豆?jié)饪s蛋白替代魚粉可以降低飼料成本。