宋金秋，燕麗娜，李 暉*，李中波

（1.湘西民族職業(yè)技術學院，湖南吉首 416000；2.中國科學院植物園，湖北武漢 430000；3.懷化職業(yè)技術學院，湖南懷化 418000）

杜仲是我國的傳統(tǒng)中藥材，富含的活性物質(zhì)具有抗菌、消炎、提高免疫力的作用，且對種植環(huán)境要求不高，湘西地區(qū)的氣候較適合種植杜仲，因此，杜仲也可用于畜禽養(yǎng)殖中。杜仲皮是傳統(tǒng)中草藥中最為常見的藥材，而杜仲植株的其他部分往往被丟棄，但有研究表明，杜仲葉含有與杜仲樹皮非常相似的活性物質(zhì)（吳紅艷和彭呈軍，2019），杜仲葉中含有的綠原酸比杜仲樹皮更為豐富，綠原酸對提高動物體抗老化能力和免疫力具有積極促進作用，將杜仲葉提取物作為畜禽飼料添加劑具有綠色、安全、環(huán)保、低成本等優(yōu)點（左昕怡等，2019）。但目前關于杜仲葉提取物的研究多集中在對其功能性的探索方面，將其作為畜禽飼料添加劑的研究較少。因此，本試驗選取湘西地區(qū)常見的土雜雞為研究對象，研究杜仲葉提取物在提高生產(chǎn)性能方面的作用，并探討其在湘西土雞日常飼料中的最適添加比例，以期為推進杜仲葉提取物的廣泛應用，發(fā)展湘西地區(qū)土雞養(yǎng)殖業(yè)提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料與試劑從湘西自治州雞苗孵化場購買一批1日齡湘西土雞苗（300只）；EDTA抗凝劑；免疫球蛋白測定試劑盒。

1.2 主要設備高速冷凍離心機（型號：5810R）；普通離心機（型號：5430型）；日立生化分析儀（型號：7600）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（型號：RE-52AARE）

1.3 試驗設計

1.3.1 杜仲葉提取物的制備 將新鮮的杜仲葉研磨成泥，用超純水按1∶20倍體積稀釋，0.45 μm 微膜過濾，反復1次，得濃度為0.2 g/mL的濾液2000 mL；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀內(nèi)干燥濃縮，最終得到400 g杜仲葉水提物粉末，4℃保存。

1.3.2 試驗動物分組 選取1日齡土雜雞苗300只，隨機分為5組，每組5個重復，每個重復12只雞，組I～IV為處理組，V組為對照組，分別按0.05%、0.1%、0.15%、0.2%的比例向處理組土雜雞日糧中添加杜仲葉提取物粉末，對照組只喂飼基礎日糧。

1.4 測定指標及方法

1.4.1 生長性能 在飼養(yǎng)過程中，生長性能在試驗開始和試驗結束時稱量各個重復湘西土雜雞體重，統(tǒng)計采食量，計算平均日采食量、平均日增重和料重比。

1.4.2 免疫器官指數(shù) 在第21和42時別從每組隨機挑選3只雞，取其胸腺、法氏囊、脾臟等免疫器官，清洗干凈后進行稱重、記錄，從而得到相應的免疫器官指標，根據(jù)免疫器官的重量與雞的體重計算出免疫器官指數(shù)。

1.4.3 血清中抗體 在飼養(yǎng)試驗第21、42天早晨每組隨機挑選3只體征良好、體重相當?shù)耐岭s雞，空腹狀態(tài)下進行翅靜脈采血。室溫環(huán)境靜置1～2h，然后在3000 r/min離心10 min，分離血清，采用免疫比濁法對血清中的IgA、IgM、IgG進行測定，記錄結果。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析試驗數(shù)據(jù)“平均數(shù)±標準誤差”表示，用EXCEL和SPSS（20.0）軟件對試驗數(shù)據(jù)進行方差分析。

2 結果與分析

2.1 杜仲葉水提取物對湘西土雞生長性能的影響由表1可知，處理組的初始體重、終末體重、平均日采食量與對照組相比均差異不顯著（P＞0.05），但與對照組相比，0.15%處理組土雜雞平均日增重顯著提高13.14%（P＜0.05），料重比顯著降低2.97%（P＜0.05）。結果說明，飼料中添加杜仲葉水提物可提高湘西土雜雞的日增重，降低料重比，提高飼料轉(zhuǎn)化率。

表1 杜仲葉提取物對湘西土雞生長性能的影響

2.2 杜仲葉水提取物對湘西土雞免疫器官指標的影響由表2可知，在第21、42天，處理組土雜雞的法氏囊、胸腺指標隨杜仲葉提取物濃度的增加表現(xiàn)出先升高再降低的現(xiàn)象（P＜0.05），0.1%處理組土雞法氏囊指標與對照組相比存在顯著差異，第21天時上升比例為6.68%，第41天時上升比例為20.3%（P＜0.05），而脾臟指標無顯著差異（P＞0.05），0.15%處理組的土雜雞胸腺指標在試驗期間相比其他處理組差異性最顯著，在第21天時胸腺指標上升8.84%（P＜0.05），第42天到達峰值，上升比例高達17.55%（P＜0.05）。

表2 杜仲葉提取物對湘西土雜雞免疫器官指標的影響 g/kg

2.3 杜仲葉水提取物對湘西土雜雞血清中免疫球蛋白的影響由表3可知，不同處理組土雜雞血清中IgA和IgM含量與對照組相比無顯著差異（P＞0.05）。第21天時，與對照組相比，0.15%處理組土雜雞血清中IgG濃度上升最高，升高27.05%（P＜0.05），0.05%和0.1%處理組土雜雞IgG分別提高10.82%和15.01%（P＜0.05）；第42天時，0.05%和0.1%處理組土雜雞血清中IgG濃度相比對照組均有所升高，但無顯著差異（P＞0.05），0.15%處理組土雜雞血清中IgG第42天達到峰值，升高32.67%（P＜0.05）。添加0.20%處理組土雜雞血清中IgG濃度在第21、42天時表現(xiàn)出濃度下降情況（P＜0.05）。

表3 杜仲葉提取物對湘西土雞血清免疫球蛋白含量的影響

3 討論

3.1 杜仲葉水提取物對湘西土雞生長性能的影響研究數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，杜仲葉水提物不能明顯提高湘西土雞的平均日采食量，與陳玉敏等（2015）的研究結果相一致，也符合李燕舞等（2019）的研究。

3.2 杜仲葉水提取物對湘西土雞免疫器官指標的影響目前常以胸腺、脾臟及法氏囊的重量作為衡量動物免疫功能強弱的直接指標，從試驗數(shù)據(jù)看，不同比例杜仲葉水提物均能提高雞法氏囊和胸腺指標，但比例為0.1%和0.15%杜仲葉水提物的促生長作用更強；此外，研究還發(fā)現(xiàn)在整個試驗期，不同比例杜仲葉水提物均能提高雞脾臟指標，但各組之間幾無差異，這表明杜仲葉水提物雖能在一定程度上提高雞的免疫力，但提升效果不顯著。上述結果與呂錦芳等（2010）研究結果相吻合，卻與其復方杜仲口服液可提高肉雞脾臟指數(shù)相悖。

3.3 杜仲葉水提取物對湘西土雜雞血清中免疫球蛋白的影響 動物血清中的抗體水平直接反映動物免疫功能水平，其中IgG、IgM是機體非常重要的免疫球蛋白。本試驗結果表明，杜仲葉水提物對IgA、IgM的提升效果不顯著，但0.15%杜仲葉水提物能顯著提高IgG的含量，與丁浩軒和黃林（2020）提出的杜仲可有效改善黃羽肉雞免疫功能的研究結果相一致，也與上述不同比例杜仲葉水提物顯著提升土雞胸腺和法氏囊指數(shù)的結果相符，同樣暗示0.15%杜仲葉水提物能顯著提高湘西土雞免疫力。

4 結論

試驗結果表明，不同比例杜仲葉水提物對湘西土雞體重、免疫器官的發(fā)育及免疫力均有一定促進和提高作用，但以添加0.15%的效果最好，但杜仲水提物促進湘西土雞生長及提高其免疫功能的機制需進一步研究。