葉琦 徐增洪 倪嘉誠 劉國鋒 朱光艷

摘要?用2種配合飼料和大豆作為營養(yǎng)來源投喂克氏原螯蝦，研究在不同營養(yǎng)條件下繁育期克氏原螯蝦肌肉營養(yǎng)指標(biāo)的變化，從而為克氏原螯蝦養(yǎng)殖飼料的選擇提供理論依據(jù)。結(jié)果表明，在投喂3種不同蛋白質(zhì)含量的飼料對克氏原螯蝦體內(nèi)蛋白質(zhì)含量有明顯影響，而對其脂肪含量的影響并不明顯，蛋白質(zhì)含量與脂肪含量呈正相關(guān)。月份與蛋白質(zhì)含量存在極顯著相關(guān)，飼料中蛋白質(zhì)含量對克氏原螯蝦肌肉內(nèi)的蛋白質(zhì)含量有顯著影響（P<0.05）。

關(guān)鍵詞?克氏原螯蝦;蛋白質(zhì)含量;營養(yǎng)指標(biāo);配合飼料

中圖分類號?S963?文獻(xiàn)標(biāo)識碼?A?文章編號?0517-6611（2021）03-0084-04

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.03.023

Abstract?In?this?experiment，?we?used?two?kinds?of?compound?feed?and?soybean?as?the?nutrient?sources?to?feed?Procambarus?clarkii，?and?studied?the?changes?of?various?nutrient?indices?in?the?muscles?of?P.?clarkii?under?different?nutrient?conditions，?so?as?to?provide?theoretical?basis?for?the?selection?of?culture?feed?of?P.?clarkii.?The?results?showed?that?three?kinds?of?feed?with?different?nutrient?protein?content?had?a?significant?effect?on?the?protein?content?in?P.?clarkii，?but?its?effect?on?fat?content?was?not?obvious，?and?the?protein?content?was?positively?correlated?with?fat?content.?There?was?an?extremely?significant?correlation?between?month?and?protein?content，?and?protein?content?in?the?feed?had?a?significant?effect?on?the?protein?content?in?the?muscles?of?P.?clarkii（P<0.05）.

Key?words?Procambarus?clarkii;Protein?content;Nutritional?indices;Compound?feed

克氏原螯蝦（Procambarus?clarkii）俗稱小龍蝦，隸屬甲殼綱十足目螯蝦科原螯蝦屬（Procambarus）[1]。1918年，克氏原螯蝦由美國引進(jìn)日本，20世紀(jì)30年代又由日本傳入我國[2]。近幾年，克氏原螯蝦產(chǎn)業(yè)在我國迅猛發(fā)展，2003—2018年養(yǎng)殖產(chǎn)量由?5.16萬t增至163.87萬t，2018年增幅歷年最高（45.1%）。據(jù)測算，2018年我國克氏原螯蝦產(chǎn)業(yè)總產(chǎn)值達(dá)3?690?億元，同比2017年增長?37.5%（未包括香港特別行政區(qū)、澳門特別行政區(qū)、臺灣地區(qū)的統(tǒng)計數(shù)據(jù)）[3]。在“一帶一路”倡議[4]的指引下，克氏原螯蝦作為水產(chǎn)“明星”品種，利用沿線國家豐富的自然資源和龐大的國內(nèi)外市場，將會在更多的國家和地區(qū)安家落戶，成為更多不同文化背景、風(fēng)俗習(xí)慣的人們餐桌上的寵兒。面對國內(nèi)外對克氏原螯蝦需求量的不斷擴大和對品質(zhì)的不斷追求，形成的龐大需求市場將導(dǎo)致對克氏原螯蝦增產(chǎn)增量與品質(zhì)提升的進(jìn)一步研究和探索。

雖然克氏原螯蝦在我國的分布范圍很廣，但受地理環(huán)境、營養(yǎng)來源及組成等條件的影響，其肌肉率等在不同地區(qū)之間存在一定的差異。田娟等[5]對洞庭湖克氏原螯蝦肌肉成分及品質(zhì)特性進(jìn)行了分析。結(jié)果顯示，克氏原螯蝦含肉率20.21%，水分含量79.46%，灰分含量1.17%，粗蛋白含量16.67%，粗脂肪含量0.77%。宋光同等[6]與朱杰等[7]研究發(fā)現(xiàn)必需氨基酸指數(shù)為80.02%，氨基酸總含量為16.06%，鮮味氨基酸含量為5.98%。唐黎等[8]對貴州稻田養(yǎng)殖克氏原螯蝦肌肉營養(yǎng)成分進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)克氏原螯蝦含肉率約18.40%，水分含量82.07%，灰分含量1.25%，粗蛋白含量17.80%，粗脂肪含量2.06%。費志良等[9]研究發(fā)現(xiàn)克氏原螯蝦鈣含量為0.53%，磷含量為1.30%，氨基酸總量為16.59%，必需氨基酸含量為7.21%。這些研究極大地促進(jìn)了對克氏原螯蝦營養(yǎng)含量的認(rèn)知。

克氏原螯蝦繁育期的生長離不開蛋白質(zhì)、脂肪及其他營養(yǎng)的補充[10]，克氏原螯蝦對蛋白質(zhì)的需求是利用氨基酸對體內(nèi)含氮化合物的前體參與物質(zhì)循環(huán)和能量代謝的過程[11]。脂肪等其他營養(yǎng)成分則會促進(jìn)蝦類的生長以及對蛋白質(zhì)的補充[12]?？耸显r在生長過程中，尤其是在懷卵、抱卵等繁育階段，營養(yǎng)的攝取將會對種蝦、稚蝦的順利繁殖、出苗速度及稚苗規(guī)格和質(zhì)量等產(chǎn)生重要影響。在克氏原螯蝦養(yǎng)殖過程中，經(jīng)濟條件、養(yǎng)殖習(xí)慣及飼料來源種類繁多等因素都會影響克氏原螯蝦的肌肉率、蛋白質(zhì)含量等。吳東等[13]研究了3種蛋白水平飼料對克氏原螯蝦生長和蝦肉品質(zhì)等的影響，使用27%、33%、40%蛋白水平的配合飼料和純菜粕投喂克氏原螯蝦，采用凱氏定氮法[14]測定蛋白質(zhì)含量。結(jié)果表明，蝦的體重增長以蛋白質(zhì)水平27%的配合飼料最高，體長增長以蛋白質(zhì)水平27%的配合飼料最高，飼料系數(shù)以純菜粕最高，蛋白質(zhì)水平33%的配合飼料最低。王傳慧等[15]發(fā)現(xiàn)不同蛋白水平組間的蝦肉中水分含量、肉樣pH、熟肉率、嫩度、蛋白質(zhì)含量差異不顯著。Xiao等[16]研究了飼料蛋白質(zhì)含量對不同體型克氏原螯蝦的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)幼苗期克氏原螯蝦在蛋白質(zhì)含量為40%時進(jìn)食率最低，而成熟期克氏原螯蝦在蛋白質(zhì)含量25%時最低。幼苗比生長速率和蛻殼率在40%蛋白質(zhì)含量時最高，成熟期在蛋白質(zhì)含量35%時最高。幼苗飼料利用率在蛋白質(zhì)含量40%時最高，成熟期在蛋白質(zhì)含量45%時最高[17]。幼苗蛋白效率比在蛋白質(zhì)含量25%時最高，而成熟期在蛋白質(zhì)含量30%時最高。同時，在幼苗期間蛋白質(zhì)的補充和維生素A的添加對其成熟有著重要作用[18]。程玉冰等[19]探討了克氏原螯蝦飼料的配制和營養(yǎng)需求，結(jié)果發(fā)現(xiàn)克氏原螯蝦飼料中蛋白質(zhì)需求量呈大幅度波動，可能受限于克氏原螯蝦品種、大小、生長階段和養(yǎng)殖模式，一般為30%～60%。氨基酸由于存在短板效應(yīng)，任一種缺乏都會影響蛋白質(zhì)合成[20]。因此，在克氏原螯蝦的養(yǎng)殖過程中，不同蛋白氨基酸的補充是蝦能飽滿成熟的必要條件。于寧等[21]研究了克氏原螯蝦飼料最適能量蛋白質(zhì)比（E/P），研究發(fā)現(xiàn)成活率、相對增重率、相對增長率均隨著E/P值的上升呈現(xiàn)先升高后下降的變化趨勢，均在E/P值為36?MJ/kg時最高，而此時飼料系數(shù)最低。通過采用常壓干燥法測定水分含量，采用凱氏定氮法[14]測定蛋白質(zhì)含量，利用索氏抽提法[22]測定脂肪含量，來研究E/P的動態(tài)變化[23]。然后，將蝦養(yǎng)殖一段時間后饑餓24?h再進(jìn)行試驗[24]。結(jié)果顯示，不同飼料E/P值對克氏原螯蝦肌肉中水分含量、蛋白質(zhì)含量以及粗灰分含量的影響不顯著，但隨著E/P值的上升，粗脂肪含量呈逐漸上升的趨勢。

近年來，克氏原螯蝦的人工養(yǎng)殖發(fā)展迅速，其營養(yǎng)成為當(dāng)前研究熱點[25]，但關(guān)于克氏原螯蝦繁育期間投喂不同蛋白質(zhì)含量的飼料對其營養(yǎng)變化影響的研究則少有報道。筆者利用3種不同蛋白質(zhì)含量的飼料喂養(yǎng)處于繁育期的克氏原螯蝦，研究飼料中蛋白質(zhì)含量對克氏原螯蝦肌肉中營養(yǎng)含量的影響，旨在為規(guī)?；庇耸显r種苗及克氏原螯蝦高效養(yǎng)殖提供數(shù)據(jù)支持和參考。

1?材料與方法

1.1?試驗材料

試驗用克氏原螯蝦為2018年8月從中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心養(yǎng)殖基地挑選的100只健康蝦（規(guī)格約40?g/只）。將挑選出來的克氏原螯蝦帶回淡水漁業(yè)研究中心于養(yǎng)殖桶內(nèi)培養(yǎng)。

1.2?試驗設(shè)計

設(shè)置9個試驗桶（規(guī)格為半徑40?cm，高80?cm的圓筒，水深保持在35?cm左右[26]。每個桶中放入10只蝦，雌雄比例按3∶1放置，剩余龍蝦作為備用。3個桶作為一個試驗組，分A、B、C?3組，每組分別投喂一種飼料，A組投喂的飼料是克氏原螯蝦用合成飼料1（蛋白質(zhì)含量標(biāo)注為32%的商品飼料，蛋白質(zhì)實測含量29.4%，下同），B組投喂的飼料是小龍蝦用合成飼料2（自行配制生產(chǎn)，蛋白質(zhì)含量20.1%），C組投喂的飼料是用水泡過的黃豆（蛋白質(zhì)含量30.2%）。每天定時傍晚17：00前后喂食。定時開關(guān)增氧機，保證溶氧量[27]。放入人工蝦巢，為其提供生活場所，并投放水葫蘆和伊樂藻等水生植物[28]。每天在投喂飼料前測量水質(zhì)指標(biāo)，模擬自然光下養(yǎng)殖[27]，每星期換水1/3[29]，避免水質(zhì)惡化，保持水質(zhì)清爽。

1.3?樣品測定

從2018年11月初開始，每月從每個桶中選取1只健康蝦進(jìn)行蛋白質(zhì)含量和脂肪含量的測定，每組3個重復(fù)，共記錄9份數(shù)據(jù)。測量11月、12月和1月繁育期克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)及脂肪的含量，其中蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法測定，脂肪含量采用索氏標(biāo)準(zhǔn)法萃取測定。

1.4?測定指標(biāo)及方法

1.4.1?蛋白質(zhì)含量的測定。

將完整的蝦解剖，剪開外殼后取出肌肉，將肌肉剪裁成4個塊狀的個體，取2塊進(jìn)行蛋白質(zhì)含量測定，剩余2塊用于脂肪含量測定。將肌肉放在千分之一電子天平上進(jìn)行稱量并記錄。放入石墨消解儀的消化管中，加入催化劑（硫酸鉀與硫酸銅10∶1混合研磨）5?g和濃硫酸10?mL進(jìn)行消解。4?h后消解完成后使用凱氏定氮儀測定，輸入樣品重量和標(biāo)準(zhǔn)酸濃度等數(shù)值，等待蒸餾滴定，5?min后記錄數(shù)據(jù)，進(jìn)行下一個數(shù)據(jù)的測定[30]。具體試劑與操作流程參考凱氏定氮法（GB/T?5009.5）。

1.4.2?脂肪含量的測定。

將解剖好的肌肉放入烘箱，在105?℃下烘烤2.5～3.0?h，直到肌肉呈現(xiàn)干脆僵硬狀取出，研磨稱重獲得樣品重W1，用脫脂棉包裹樣品放入濾紙桶中，將濾紙桶放入[31]。此前，先將溶劑杯烘干稱重獲得W2，將石油醚倒入萃取室，采用索氏標(biāo)準(zhǔn)法[22]進(jìn)行抽提。2?h后回收濾液放入烘箱，105?℃下烘烤1?h左右，直至溶劑杯中無液體狀油脂，取出稱重，記為W3，按照以下公式計算脂肪含量：脂肪含量=（W3-W2）/W1。具體試劑與流程參考索氏抽提法（GB/T?5009.6）。

1.5?數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)使用Excel軟件和SPSS?19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計與分析，結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。先對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，若影響達(dá)到顯著水平再采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。

2?結(jié)果與分析

2.1?3種不同蛋白質(zhì)含量飼料對繁育期克氏原螯蝦肌肉中營養(yǎng)指標(biāo)的影響

2.1.1?3種不同蛋白質(zhì)含量飼料對繁育期克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量的影響。

由表1可知，11月和1月A組與B、C組繁育期克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量差異顯著，而12月份肌肉中蛋白質(zhì)含量差異不顯著。11月和12月，克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量明顯較高。A組和B組繁育期克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量僅在12月比C組有所提高。總體上，A組繁育期克氏原螯蝦肌肉中的蛋白質(zhì)含量相對最低，C組蛋白質(zhì)含量相對最高。同時，3種飼料喂養(yǎng)下12月克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量增長最為明顯，1月最低，存在明顯的線性關(guān)系，表明有明顯的時間變化。此外，12月各組繁育期克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量沒有明顯差異（P>0.05）。

2.1.2?3種不同蛋白質(zhì)含量飼料對繁育期克氏原螯蝦脂肪含量的影響。

由表2可知，11月A、B、C組繁育期克氏原螯蝦肌肉中的脂肪含量差異顯著。12月和1月各組脂肪含量差異不顯著。C組克氏原螯蝦的脂肪含量與A、B組相比明顯增加，A組相對最低?？傮w上，B、C組克氏原螯蝦的脂肪含量明顯較低，且11、12月各組脂肪含量遠(yuǎn)高于1月。各組在不同時間的脂肪含量均隨時間的變化而出現(xiàn)明顯的下降趨勢，其中C組下降趨勢最為明顯，而A、B組下降趨勢較為平緩。

2.2?繁育期不同月份克氏原螯蝦肌肉營養(yǎng)指標(biāo)的比較

通過3個月的數(shù)據(jù)采集，對繁育期不同月份克氏原螯蝦的營養(yǎng)指標(biāo)進(jìn)行比較，旨在為克氏原螯蝦的營養(yǎng)指標(biāo)研究提供數(shù)據(jù)支持。

2.2.1?繁育期不同月份克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量的比較。

由表3可知，A組克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量1月最低，11月次之，12月最高，1月與11月顯著低于12月（P<0.05）。B組克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量1月最低，11月次之，12月最高，1月顯著低于11月和12月。C組克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量1月最低，12月次之，11月最高?？傮w上，12月克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量最高，11月次之，1月最低。

2.2.2?繁育期不同月份克氏原螯蝦肌肉中脂肪含量的比較。

由表4可知，A組克氏原螯蝦肌肉中脂肪含量1月最低，11月次之，12月最高;11月和12月間差異不顯著，但二者與1月差異顯著（P<0.05）。B組克氏原螯蝦肌肉中脂肪含量1月最低，12月次之，11月最高，三者間差異并不顯著。C組克氏原螯蝦肌肉中脂肪含量1月最低，12月次之，11月最高，三者間差異不顯著。總體上，克氏原螯蝦肌肉中脂肪含量11月最高，12月其次，1月最低。

2.3?繁育期克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量和脂肪含量的相關(guān)性分析

將每種飼料投喂的克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量和脂肪含量每個月的數(shù)據(jù)進(jìn)行整理，并進(jìn)行相關(guān)性分析。雖然飼料各不相同，但克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量與脂肪含量存在一定的正相關(guān)，但相關(guān)性未達(dá)到顯著水平。其中，C組克氏原螯蝦蛋白質(zhì)含量與脂肪含量的相關(guān)性最強，B組其次，A組最低。克氏原螯蝦繁育期肌肉中蛋白質(zhì)含量與月份呈極顯著相關(guān)，不同飼料對克氏原螯蝦肌肉中的蛋白質(zhì)含量有極顯著影響，而脂肪含量的增長與月份的相關(guān)性較低。

3?討論

3.1?克氏原螯蝦肌肉營養(yǎng)成分分析

經(jīng)過對克氏原螯蝦肌肉中營養(yǎng)成分的分析發(fā)現(xiàn)，其肌肉營養(yǎng)成分包括水分85.60%、蛋白質(zhì)含量14.18%、脂肪含量0.20%及其他。由于試驗的主要目的并非克氏原螯蝦個體成分含量分析，并且克氏原螯蝦材料采用活體解剖，所以水分含量較高。中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心揚中基地克氏原螯蝦肌肉營養(yǎng)成分與唐黎等[8]對貴州稻田養(yǎng)殖克氏原螯蝦肌肉中營養(yǎng)成分測定結(jié)果相一致，符合克氏原螯蝦正常肌肉營養(yǎng)成分水平。

3.2?3種飼料對繁育期克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量的影響

蛋白質(zhì)是克氏原螯蝦肌肉的主要組成成分，飼料蛋白質(zhì)含量的不同對克氏原螯蝦生長生活有不同的影響。克氏原螯蝦繁育期的成長需要飼喂充足和較高含量的營養(yǎng)蛋白。該試驗中3種飼料中大豆飼料對克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量的增長較其他2種飼料有更明顯的促進(jìn)作用，但在1月與11月、12月間存在差異，由此可判斷無錫地區(qū)冬季的來臨及溫度的下降促使克氏原螯蝦體質(zhì)下降，攝食量降低，同時也存在著蝦不同個體差異顯著（P<0.05）。

3.3?3種飼料對繁育期克氏原螯蝦肌肉中脂肪含量的影響

與蛋白質(zhì)一樣，脂肪也是克氏原螯蝦肌肉的主要組成部分，吳東等[13]的試驗結(jié)果與該試驗結(jié)果相一致，不同蛋白質(zhì)含量的飼料對克氏原螯蝦肌肉中脂肪含量的影響不顯著，進(jìn)一步證實了上述觀點。這表明不同含量蛋白質(zhì)飼料的投喂對克氏原螯蝦肌肉中脂肪含量的增長不存在明顯影響。因此，飼喂克氏原螯蝦在其肌肉脂肪含量的增長上仍需進(jìn)一步探究。

3.4?繁育階段對繁育期克氏原螯蝦肌肉中營養(yǎng)成分的影響

該試驗中繁育期克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量12月最高，11月其次，1月最低，1月與其他月份間差異較大。從脂肪含量來看，11月最高，12月其次，1月最低。克氏原螯蝦在3種不同蛋白含量飼料的投喂下肌肉中蛋白質(zhì)含量與月份存在極顯著的相關(guān)性，考慮到季節(jié)動態(tài)變化的因素，推測一方面是因為性腺發(fā)育影響蛋白質(zhì)與脂肪含量，另一方面是因為克氏原螯蝦進(jìn)入冬眠期前在11月與12月囤積能量，而在1月份會有一定的生理消耗。

3.5?繁育期克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量與脂肪含量的相關(guān)性分析

鄧慧芳等[27]研究了不同光照和飼料對克氏原螯蝦生長、非特異性免疫酶及體成分的影響，于寧等[21]研究了克氏原螯蝦飼料最適能量蛋白質(zhì)比，他們的試驗結(jié)論與該試驗結(jié)論（繁育期克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量與脂肪含量存在正相關(guān)）相符。?該試驗結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，在不同含量蛋白質(zhì)飼料的飼喂下，繁育期克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量有所增長，這是否表明該研究中含有不同含量蛋白質(zhì)的混合飼料對克氏原螯蝦繁育期存在促進(jìn)作用，這需要進(jìn)一步研究證實。

4?結(jié)論

該試驗利用3種不同飼料喂養(yǎng)克氏原螯蝦，結(jié)果發(fā)現(xiàn)繁育期不同月份對克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)和脂肪含量的影響顯著，其肌肉中蛋白質(zhì)含量12月最高，11月其次，1月最低。脂肪含量11月最高，12月其次，1月最低。由此判斷出克氏原螯蝦養(yǎng)殖的最適時間及其對環(huán)境的要求。同時，分析了不同飼料對繁育期克氏原螯蝦肌肉中營養(yǎng)指標(biāo)的影響，繁育期克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)含量與脂肪含量存在正相關(guān)，但差異不顯著，確定了大豆混合飼料中的蛋白比對繁育期克氏原螯蝦肌肉中蛋白質(zhì)的增長有明顯促進(jìn)，為進(jìn)一步確定克氏原螯蝦飼料的蛋白比提供理論支持，但對繁育期克氏原螯蝦肌肉中脂肪含量的增長未發(fā)現(xiàn)明顯的促進(jìn)作用。同時，此次人工飼料的選擇對環(huán)境無污染，同時制作簡單，成本低廉，適合于現(xiàn)今對克氏原螯蝦大規(guī)模的養(yǎng)殖需求，對規(guī)模化克氏原螯蝦養(yǎng)殖及種苗的繁育期間因飼料投入帶來的成本降低具有較好的效果和借鑒意義。

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