韓亞楠，王 穎，李月勤，王 軍，彭永帥，張 曼，霍 軍，張利衛(wèi)*

（1．河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院動(dòng)物醫(yī)藥學(xué)院，河南 鄭州 450046；2．開封市畜牧工作站，河南 開封 475000）

長(zhǎng)期高密度的飼養(yǎng)會(huì)造成家禽自身免疫力降低，應(yīng)激性因素增多，可誘發(fā)或繼發(fā)多種傳染性疾病等[1]。黃曲霉素可以影響免疫因子的合成，抑制免疫器官的正常發(fā)育，引發(fā)機(jī)體免疫抑制，增加機(jī)體對(duì)疾病的敏感性[2]。隨著禽產(chǎn)品的抗生素殘留增加及病原菌的耐藥性增加等弊端的暴露，綠色安全的益生菌制劑成為研究熱點(diǎn)[3]。所以，本試驗(yàn)研究不同益生菌制劑對(duì)肉雞法氏囊發(fā)育和淋巴細(xì)胞增殖的影響，為益生菌的合理開發(fā)及應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物處理

選用雄性0日齡817肉雞75只，隨機(jī)分成5組?？瞻讓?duì)照組根據(jù)肉雞品種按照國家標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)飼喂基礎(chǔ)日糧。基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)組按照比例分別添加牧丁寶I型、牧丁寶II型、丁酸梭菌和益芪康（益生菌成分見表2。益生菌由河南金百合生物有限公司提供），試驗(yàn)周期21 d。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平Tab.1 Basic diet composition and nutritional level

表2 益生菌成分Tab.2 Probiotic ingredients

1.2 樣品采集

試驗(yàn)21 d時(shí)，禁食24 h，稱取肉雞活重，頸部放血屠宰后，取法氏囊并稱重。將取下的法氏囊用10%甲醛固定24 h。然后做石蠟切片，并進(jìn)行HE染色。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

用Image J軟件對(duì)法氏囊濾泡面積進(jìn)行測(cè)量，用SPSS軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同益生菌對(duì)肉雞平均日增重的影響（見表3）

由表3可知，與對(duì)照組相比，4種益生菌對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的效果均不顯著（P＞0.05)。

2.2 不同益生菌對(duì)肉雞法氏囊發(fā)育的影響（見表4）

由表4可知，與其他3個(gè)試驗(yàn)組相比，益芪康組的法氏囊增重效果較為明顯；與對(duì)照組相比，益芪康、牧丁寶I、牧丁寶II和丁酸梭菌組的法氏囊增重分別提高13.61%、9.07%、2.86%、7.99%（P＜0.05）。

表3 不同益生菌對(duì)肉雞平均日增重的影響Tab.3 Effects of different probiotics on average daily gain of broilers 單位：g

表4 不同益生菌對(duì)肉雞法氏囊發(fā)育的影響Tab.4 Effects of different probiotics on the development bursa of Fabricius of broilers 單位：g

2.3 不同益生菌對(duì)法氏囊小葉面積的影響（見表5、圖1）

由表5、圖1可知，牧丁寶I、牧丁寶II、丁酸梭菌和益芪康對(duì)淋巴細(xì)胞增殖的效果顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；其中，丁酸梭菌顯著高于牧丁寶II益芪康（P＜0.05）。

表5 不同益生菌對(duì)法氏囊小葉面積的影響Tab.5 The effect of different probiotics on the leaflet area of the bursa of Fabricius 單位：×10-2 mm2

3 討論

益生菌作為有益菌進(jìn)入機(jī)體，能夠在腸道多種菌群共同存在的復(fù)雜環(huán)境中形成優(yōu)勢(shì)菌，調(diào)節(jié)腸道菌群并維持菌群間的相對(duì)穩(wěn)定。法氏囊是禽類特有的中樞免疫器官[4]，法氏囊的發(fā)育是機(jī)體的免疫能力強(qiáng)弱的重要影響因素。本試驗(yàn)中使用的4種益生菌對(duì)不同日齡肉雞生長(zhǎng)性能效果均不顯著；對(duì)法氏囊的發(fā)育都有較為明顯的作用，與李可等[5]的研究效果基本一致。

中樞免疫器官是免疫細(xì)胞產(chǎn)生、發(fā)育和成熟的場(chǎng)所，并對(duì)外周免疫器官發(fā)育和全身免疫功能具有調(diào)節(jié)作用[6]。禽類的中樞免疫器官主要包括骨髓、胸腺和法氏囊；外周免疫器官主要包括脾臟、哈德氏腺和黏膜相關(guān)淋巴組織[7]。法氏囊是誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞增殖、分化、發(fā)育成熟和免疫應(yīng)答的場(chǎng)所[8]，接受抗原刺激，B細(xì)胞進(jìn)一步分化，轉(zhuǎn)化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生抗體，完成體液免疫，是機(jī)體抵抗外來病原體的重要防御屏障[9]。B淋巴細(xì)胞的增殖直接反映體液免疫功能[10]。本試驗(yàn)通過統(tǒng)計(jì)淋巴濾泡的面積，反映淋巴細(xì)胞增殖的情況，淋巴濾泡面積越大，法氏囊發(fā)育越快越完全，免疫能力增強(qiáng)。試驗(yàn)表明，4種益生菌顯著提高淋巴細(xì)胞的增殖能力，丁酸梭菌效果最為明顯。益生菌通過增強(qiáng)法氏囊淋巴細(xì)胞的增殖能力，從而增強(qiáng)法氏囊免疫功能，與賈志新[11]的研究結(jié)果基本一致。益生菌分泌的某些產(chǎn)物呈酸性，阻礙不耐酸細(xì)菌的生長(zhǎng)。產(chǎn)生的細(xì)菌素可對(duì)細(xì)菌靶細(xì)胞的抗菌物質(zhì)選擇性發(fā)揮作用，對(duì)病原菌產(chǎn)生抑制作用[12]。Yang等[13]研究表明，丁酸梭菌（2×107CFU/kg）可使肉仔雞血清中免疫球蛋白IgA、IgG和IgM的含量顯著增加。同時(shí)，丁酸梭菌對(duì)K88大腸桿菌攻毒引起的肉雞生長(zhǎng)性能下降有一定緩解作用，還可以提高機(jī)體免疫能力[14]。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，4種益生菌對(duì)肉雞法氏囊的發(fā)育和淋巴細(xì)胞增殖產(chǎn)生不同程度的影響效果，益芪康對(duì)肉雞法氏囊發(fā)育效果較為明顯，丁酸梭菌對(duì)法氏囊淋巴細(xì)胞增殖效果較為顯著，說明益生菌能通過影響法氏囊淋巴細(xì)胞的增殖提高肉雞的免疫功能。