李華坤

（徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 徐州 221006）

杠板歸是蓼科蓼屬植物，又名蛇倒退、刺犁頭、刺蓼。杠板歸性微寒、味酸，歸肺、膀胱經(jīng)，具有抗炎、抗病毒、止咳祛痰、保肝、抗腫瘤、抗氧化和抑制α-葡萄糖苷酶活性、抑制乙酰膽堿酯酶活性等藥理作用，常用于瀉痢、疔瘡腫痛、蛇蟲咬傷等癥[1]。近年來，中藥藥源性肝損傷事件引起醫(yī)藥界、制藥業(yè)、管理部門及公眾的高度關(guān)注[2]。本試驗(yàn)以小白鼠為研究對(duì)象，通過研究杠板歸對(duì)小白鼠的生長(zhǎng)性能、血液生化指標(biāo)、臟器病變等的影響，旨在為臨床合理使用杠板歸提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)動(dòng)物為昆明小白鼠。杠板歸全草來自廣東揭陽。藥敏試紙購(gòu)自杭州濱和微生物試劑有限公司。

1.2 儀器與試劑

普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂購(gòu)自天津市英博生化試劑有限公司、SX-500高壓滅菌鍋購(gòu)自日本TOMY公司、DRI-CHEM NX500iVC全自動(dòng)干式生化分析儀購(gòu)自北京安普生化科技有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 小白鼠飲水給藥

將杠板歸水浸液濃縮至1 g/mL藥液。 根據(jù)半數(shù)致死量（LD50）分級(jí)法，無毒中藥LD50＞50 g/kg，把小白鼠最大給藥量定為50 g/kg, 按照組間劑量比值為 1∶0.7設(shè)計(jì)3個(gè)劑量組，分別0.75、0.50、0.35 g。等濃度灌胃給藥，給藥容積分別為 0.75、0.50、0.35 mL。取雌、雄性小鼠6只，體重（15.0±0.1) g，隨機(jī)分成3組，每組2只，雌、雄各1只。給藥前小鼠禁食12 h，自由飲水。按劑量設(shè)計(jì)分別單次灌胃給予小鼠杠板歸藥液，給藥后立即觀察小白鼠活動(dòng)狀態(tài)變化。

健康清潔級(jí)小白鼠，選擇雌、雄鼠各6只，體重在19～21 g，分為3組，雌5只為1組、雄5只為1組，其余2只為空白對(duì)照組。空白對(duì)照組小白鼠正常飲水喂料7周，其余2組停止飲水、正常喂料，每天用10%杠板歸200 mL給小白鼠飲用，第2 d更換新的藥物并計(jì)算出藥物消耗劑量。大約每只老鼠飲用4mL/d，連續(xù)7周，觀察小白鼠活動(dòng)狀態(tài)變化。對(duì)死亡的小鼠剖檢觀察臟器病變，對(duì)未死亡的小白鼠心臟采血，測(cè)定生化數(shù)值，未死亡小白鼠糞便采集做藥敏試驗(yàn)，后將小白鼠致死觀察臟器病變。

1.3.2 小白鼠血液生化指標(biāo)定

灌胃杠板歸7周的小白鼠稱量體重，仰臥保定后用注射器進(jìn)行心臟采血0.6 mL，將血液放入指型管中，10 000 r/min離心2 min，取上清液至另一指型管內(nèi)在生化分析儀上測(cè)定。

1.3.3 藥敏試驗(yàn)

采集灌胃杠板歸7周的小鼠鮮糞0.4 g放入試管中，加入1 mL生理鹽水浸泡，用玻璃棒搗碎，3 000 r/min離心3 min，取上清液作為藥敏試驗(yàn)用菌液。用滅菌棉拭子蘸取制備好的菌液，涂布到培養(yǎng)基表面。用鑷子將藥敏片分別貼在各組培養(yǎng)基的表面，37 ℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)24 h測(cè)定抑菌圈的大小。

2 結(jié)果與分析

2.1 半數(shù)致死量（LD50）

灌胃給藥0.75 g的小鼠30 s左右全身抽搐死亡，灌胃給藥0.50 g和0.35 g的小鼠無死亡。說明杠板歸LD50在16～50 g/kg之間是小毒中藥。

2.2 杠板歸對(duì)小白鼠生長(zhǎng)性能的影響（見表1）

表1 杠板歸對(duì)小白鼠生長(zhǎng)性能的影響Tab.1 The effect of Gangbangui on the growth performance of mice 單位：g

飼喂7周后，空白組2只和飲用杠板歸10只小白鼠均未死亡，小鼠活動(dòng)狀態(tài)無差異、排糞尿、飲水吃料等均正常，每周體重平均增加2.7g左右。飼喂7周試驗(yàn)小白鼠期間小鼠活動(dòng)狀態(tài)無差異、運(yùn)動(dòng)靈活、排糞尿、飲水吃料等均正常。由表1可知，試驗(yàn)小白鼠平均每天增重0.4 g左右，對(duì)照組小白鼠增長(zhǎng)重量比飲用杠板歸小白鼠增長(zhǎng)重量多，杠板歸可能影響動(dòng)物機(jī)體生長(zhǎng)。

2.3 杠板歸對(duì)小白鼠血液生化指標(biāo)的影響（見表2）

由表2可知，使用杠板歸的小白鼠血液中總蛋白、白蛋白、肌酐、堿性磷酸酶、總膽固醇、鈣水平降低。

2.4 杠板歸對(duì)小白鼠糞便藥敏試驗(yàn)結(jié)果（見表3）

由表3可知，腸道菌對(duì)杠板歸中介，對(duì)四環(huán)素、頭孢噻肟、卡那霉素、氯霉素敏感，對(duì)苯唑西林耐藥，說明杠板歸不易產(chǎn)生耐藥性。

表2 杠板歸對(duì)小白鼠血液生化指標(biāo)的影響Tab.2 The effect of Gangbangui on the blood biochemical indexes of mice

表3 杠板歸對(duì)小白鼠糞便藥敏試驗(yàn)結(jié)果Tab.3 Results of drug sensitivity test of Gangbangui to mice fecess

2.5 杠板歸對(duì)小白鼠臟器病變的影響（見圖1、表4）

由表4、圖1可知，對(duì)照組小鼠剖檢心臟、腎臟、肺等均無異常，飲用杠板歸的小白鼠肝臟上有結(jié)節(jié)，其余臟器均正常。

表4 杠板歸對(duì)小白鼠臟器病變的影響Tab.4 The effect of Gangbangui on the lesions of organs in mice

3 討論

小鼠生長(zhǎng)發(fā)育受飼料影響較大[3]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，杠板歸對(duì)小白鼠生長(zhǎng)性能性能產(chǎn)生影響。景志忠等[4]采用4個(gè)不同營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)的飼料配方，飼養(yǎng)繁殖昆明仔鼠，其增重規(guī)律為：在1～20、40～60日齡間仔鼠生長(zhǎng)發(fā)育較慢，增生幅度較??；120～140日齡間生長(zhǎng)發(fā)育較快，增重幅度較大；雄鼠增重速度快于雌鼠；營(yíng)養(yǎng)與小鼠生長(zhǎng)呈正相關(guān)，且在20～40日齡間，不同營(yíng)養(yǎng)組間差異顯著或極顯著。

本研究結(jié)果顯示，使用杠板歸的小白鼠血液中總蛋白、白蛋白、堿性磷酸酶和肌酐含量異常，說明杠板歸對(duì)肝臟有影響。中草藥成分復(fù)雜，在臨床中很少有病原菌對(duì)中草藥產(chǎn)生耐藥性，這也是臨床上經(jīng)常使用中草藥防病治病的重要原因。中草藥長(zhǎng)期不規(guī)范使用才出現(xiàn)對(duì)肝臟的損傷，所以不易被人們認(rèn)識(shí)到。中藥藥源性肝損傷的發(fā)生具有較大隱匿性，為臨床常見的藥物不良反應(yīng)之一[5]。調(diào)查顯示，中草藥肝損傷病例中多數(shù)是由于病患不去正規(guī)醫(yī)院就診而濫用中草藥所致。

中草藥飼料添加劑對(duì)動(dòng)物生產(chǎn)性能、免疫指標(biāo)及肉品質(zhì)均有影響。在飼糧中添加0.2%的中草藥,不僅能夠顯著提高北京鴨的生長(zhǎng)性能、屠宰性能以及機(jī)體免疫,還能改善鴨肉品質(zhì)[6]。正確使用中草藥使動(dòng)物飼料的利用率、動(dòng)物的繁殖性能、抗應(yīng)激能力等都顯著提高[7]。大量的中草藥在養(yǎng)殖企業(yè)中應(yīng)用，本試驗(yàn)了解到中草藥不易產(chǎn)生耐藥性的優(yōu)點(diǎn)和潛在肝損害的缺點(diǎn)，為臨床合理用藥提供建議。

4 結(jié)論

杠板歸LD50在16～50 g/kg之間是小毒中藥，對(duì)小白鼠有一定毒性。