沐超，胡新榮

廣東醫(yī)科大學(xué)腫瘤研究所，廣東 東莞 523000

宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤，高發(fā)病率和死亡率嚴(yán)重威脅著世界婦女的健康，其主要危險(xiǎn)原因是高危型人乳頭瘤病毒HPV-16 和HPV-18 的感染。半乳糖凝集素-3(Galectin-3)是β-半乳糖苷凝集素家族中的嵌合型[1]，主要定位在細(xì)胞質(zhì)，能夠通過與相應(yīng)配體結(jié)合而參與細(xì)胞的生長(zhǎng)、黏附、新生血管的形成以及凋亡等過程，而在腫瘤中，Galectin-3的表達(dá)與腫瘤的發(fā)生、侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[2-3]。

目前，已有多項(xiàng)研究報(bào)道了Galectin-3 在宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)中的表達(dá)情況，但是尚未見其在宮頸組織病變中表達(dá)差異的系統(tǒng)評(píng)價(jià)。本文通過檢索和篩選相關(guān)文獻(xiàn)，系統(tǒng)評(píng)價(jià)了宮頸組織癌變過程中Galectin-3的表達(dá)情況，從而進(jìn)一步闡明Galectin-3與正常宮頸組織向?qū)m頸癌發(fā)展之間的關(guān)系，為輔助評(píng)估宮頸癌的預(yù)后提供相關(guān)分子標(biāo)志。

1 資料與方法

1.1 檢索策略 分別檢索CBMdisc、CNKI、萬方、維普、PubMed、Web of Science、Medline 七個(gè)數(shù)據(jù)庫，檢索時(shí)間從建庫至2020年7月。同時(shí)手工檢索補(bǔ)充文獻(xiàn)。中文檢索詞包括：半乳糖凝集素-3、宮頸上皮內(nèi)瘤變、宮頸癌。英文檢索詞包括：Galectin-3、Cervical Intraepithelial Neoplasias、Cervical Cancer。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) 研究類型為病例-對(duì)照研究。檢測(cè)Galectin-3表達(dá)的方法為免疫組化法。研究對(duì)象符合以下條件：(1)所有病例均由病理診斷明確，既往無惡性腫瘤病史；(2)全部受試者取材前均未經(jīng)放療、化療或生物治療；(3)全部受試者不區(qū)分民族、種族和國籍等。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) (1)文種非中、英文；(2)重復(fù)的文獻(xiàn)；(3)無相應(yīng)對(duì)照組的文獻(xiàn)；(4)綜述、動(dòng)物研究及會(huì)議摘要等。

1.3 文獻(xiàn)篩選與資料提取 由兩位研究人員按照納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，獨(dú)立進(jìn)行文獻(xiàn)的篩選和資料的提取，有異議的地方通過協(xié)商或由第三方裁定。提取的資料包括以下信息：作者、發(fā)表時(shí)間、納入病例年齡范圍、研究總例數(shù)以及Galectin-3表達(dá)陽性例數(shù)等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用Stata12.0軟件對(duì)納入的研究進(jìn)行Meta 分析。通過查找相關(guān)資料，選定比值比(odds ratio，OR)作為合并統(tǒng)計(jì)量，95%為其可信區(qū)間(95%CI)。首先，對(duì)納入的研究進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)(檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05)，采用森林圖和I2統(tǒng)計(jì)量來判斷研究間是否存在異質(zhì)性。根據(jù)《Cochrane系統(tǒng)評(píng)價(jià)手冊(cè)》(以下簡(jiǎn)稱“手冊(cè)”)：I2＞50%即可認(rèn)為研究間存在異質(zhì)性。經(jīng)異質(zhì)性檢驗(yàn)，若各獨(dú)立研究的結(jié)果同質(zhì)，則選用固定效應(yīng)模型計(jì)算OR值；若各獨(dú)立研究的結(jié)果異質(zhì)，先繪制Begg漏斗圖，并進(jìn)行不對(duì)稱檢驗(yàn)，從而識(shí)別是否存在發(fā)表偏倚。如果存在發(fā)表偏倚，則對(duì)偏倚的來源加以控制；如果不存在，則進(jìn)一步使用敏感性分析和亞組分析，使研究達(dá)到同質(zhì)后，再使用固定效應(yīng)模型計(jì)算OR值。若假如經(jīng)過異質(zhì)性分析以及處理后，研究之間仍不具有同質(zhì)性，則選用隨機(jī)效應(yīng)模型，并分析異質(zhì)性的來源。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)檢索結(jié)果 通過計(jì)算機(jī)檢索，初步獲得168篇文獻(xiàn)，其中CBMdisc 22篇、CNKI 48篇、萬方28篇、維普28 篇、Pubmed 17 篇、Web of science 5 篇、Medline 20篇，另外補(bǔ)充文獻(xiàn)0篇。去除重復(fù)文獻(xiàn)90篇，經(jīng)閱讀題目和摘要后初步篩除不相關(guān)的文獻(xiàn)54篇，然后嚴(yán)格按照納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，再次閱讀全文復(fù)篩。最終，納入17篇[4-20]文獻(xiàn)，共2 262例受試者，包括正常宮頸組織293例、CIN 802例，宮頸癌1 167例。

2.2 納入研究的基本特征與質(zhì)量評(píng)價(jià) 其中15份研究報(bào)道了正常宮頸組織Galectin-3 的表達(dá)情況；17 份研究中報(bào)道了CIN Galectin-3 的表達(dá)情況；16 份研究報(bào)道了宮頸癌Galectin-3的表達(dá)情況。納入研究的基本特征和質(zhì)量評(píng)價(jià)如下(見表1和表2)。

表1 納入研究的基本特征

2.3 異質(zhì)性檢驗(yàn)

2.3.1 宮頸癌組與正常宮頸組 共14 份研究報(bào)道了宮頸癌組(1 018 例)與正常宮頸組(273 例)中Galectin-3 的表達(dá)情況。森林圖顯示：I2=84.5%，P=0.000，提示各項(xiàng)研究間存在異質(zhì)性，可采用隨機(jī)效應(yīng)模型分析，得OR=7.31，95%CI(2.71，19.71)，P=0.000。結(jié)果表明：在宮頸癌與正常宮頸組之間，Galectin-3 的表達(dá)可能存在差異。

2.3.2 宮頸癌組與CIN 組 共16 份研究報(bào)道了宮頸癌組(1167 例)與CIN 組(742 例)中Galectin-3的表達(dá)情況。森林圖顯示：I2=79.4%，P=0.000，提示各項(xiàng)研究間存在異質(zhì)性，可采用隨機(jī)效應(yīng)模型，得OR=3.30，95%CI (2.02，5.39)，P=0.000。結(jié)果表明：在宮頸癌組與CIN 組之間，Galectin-3 的表達(dá)可能存在差異。

2.3.3 CIN 組與正常宮頸組 共15 份研究報(bào)道了CIN 組(747 例)與正常宮頸組(293 例)中Galectin-3表達(dá)的情況。森林圖顯示：I2=78.7%，P=0.000，提示各項(xiàng)研究間存在異質(zhì)性，同樣采用隨機(jī)效應(yīng)模型，得OR=2.42，95%CI(1.04，5.61)，P=0.039。結(jié)果表明：Galectin-3 在宮頸癌組與正常宮頸組之間的表達(dá)可能存在差異。

2.3.4 繪制漏斗圖與發(fā)表偏倚的檢測(cè) 對(duì)宮頸癌組、CIN 組、正常宮頸組兩兩進(jìn)行對(duì)比，分別繪制Begg 漏斗圖(圖1A～1C)，并通過秩相關(guān)檢驗(yàn)可知：宮頸癌組與正常宮頸組的Pr＞0.956，宮頸癌組與CIN組的Pr＞0.224，CIN 組與正常宮頸組的Pr＞0.428。結(jié)果提示：三個(gè)比較組均無明顯發(fā)表偏倚。

2.4 敏感性分析 對(duì)宮頸癌組、CIN 組、正常宮頸組兩兩比較，并進(jìn)行敏感性分析(圖2)，結(jié)果提示：聶磊[6]和劉嶸等[13]兩項(xiàng)研究對(duì)宮頸癌組與正常宮頸組的合并效應(yīng)量影響較大；劉嶸等[13]的研究對(duì)宮頸癌組與CIN組的合并效應(yīng)量影響較大；聶磊[6]的研究對(duì)CIN組與正常宮頸組的合并效應(yīng)量影響較大。

2.5 亞組分析 將敏感性分析中所涉及的對(duì)合并效應(yīng)量影響較大的兩項(xiàng)研究進(jìn)行了剔除，隨后按照以下亞組對(duì)宮頸癌組與正常宮頸組、宮頸癌組與CIN組、CIN組與正常宮頸組再次進(jìn)行分析，進(jìn)一步探索異質(zhì)性的主要來源。

2.5.1 亞組Ⅰ 根據(jù)研究選取的宮頸癌組織學(xué)類型分為：有鱗癌、腺癌等多種類型(a)與只有鱗癌一種類型(b)兩個(gè)亞組。森林圖顯示：在宮頸癌組與正常宮頸組(圖3)中，I2=33.5%，P=0.122，根據(jù)“手冊(cè)”可知研究間同質(zhì)，符合固定效應(yīng)模型；OR=13.54，95%CI(9.14，20.06)，P=0.000?？傮w表明：宮頸癌組Galectin-3 的表達(dá)高于正常宮頸組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，并且各研究中選取的宮頸癌組織學(xué)類型的差異是宮頸癌組與正常宮頸組異質(zhì)性的主要來源。

2.5.2 亞組Ⅱ 根據(jù)研究者有無提供具體CIN級(jí)別及相應(yīng)Galectin-3 表達(dá)陽性例數(shù)分為：沒有提供者(a)和有提供者(b)兩個(gè)亞組。森林圖顯示：在宮頸癌組與CIN組(圖4)中，I2=61.1%，P=0.001，提示研究間異質(zhì)性較前降低，采取隨機(jī)效應(yīng)模型；OR=3.86，95%CI(2.65，5.61)，P=0.000。而在CIN組與正常宮頸組(圖5)中，I2=65.9%，P=0.000，提示研究間異質(zhì)性也較前降低，采取隨機(jī)效應(yīng)模型；OR=3.06，95%CI(1.50，6.22)，P=0.002。盡管結(jié)果表明研究者有無提供具體CIN 級(jí)別及相應(yīng)Galectin-3 表達(dá)陽性例數(shù)是宮頸癌組與CIN組、CIN組與正常宮頸組異質(zhì)性的主要來源，但由于研究間仍存在較高的異質(zhì)性，對(duì)于Galectin-3的表達(dá)，僅得知：宮頸癌組可能高于CIN組，CIN組可能高于正常宮頸組。

圖4 宮頸癌組(CC)與CIN組

圖5 CIN組與正常宮頸組(NC)

3 討論

宮頸組織的癌變大多出現(xiàn)在子宮頸鱗狀上皮和柱狀上皮的交界處，小部分來自宮頸內(nèi)膜化生的鱗狀上皮，其最常見的腫瘤組織學(xué)類型是鱗癌和腺癌。盡管目前接種HPV疫苗可以有效地預(yù)防宮頸癌，但是由于疫苗供量少和接種成本高，使得接種的普遍率不盡人意，并且宮頸癌的發(fā)病年齡正呈年輕化趨勢(shì)[21]。因此，深入探究宮頸癌相關(guān)分子對(duì)宮頸癌的篩查、診斷、治療和預(yù)后都有重大的意義。Galectin-3是腫瘤相關(guān)性蛋白，與腫瘤細(xì)胞黏附轉(zhuǎn)移、血管生成、抗凋亡、免疫耐受等有關(guān)[22]。并且許多研究發(fā)現(xiàn)，Galectin-3與宮頸癌關(guān)系密切，故其可以作為評(píng)估宮頸癌預(yù)后的分子標(biāo)志。

此次系統(tǒng)評(píng)價(jià)顯示：對(duì)于納入的17 項(xiàng)研究，宮頸癌組與正常宮頸組、宮頸癌組與CIN組、CIN組與正常宮頸組均出現(xiàn)了較高的異質(zhì)性，但是不存在明顯的發(fā)表偏倚。通過敏感性分析發(fā)現(xiàn)聶磊[6]和劉嶸等[13]兩項(xiàng)研究對(duì)合并效應(yīng)量有較大的影響，原因可能與聶磊偏向選擇高載量HPV的感染病例，以及劉嶸使用精確度高的圖像分析系統(tǒng)放大了正常宮頸組織Galectin-3陽性表達(dá)率有關(guān)。在將這兩項(xiàng)研究剔除并進(jìn)一步行亞組分析后發(fā)現(xiàn)，各研究選取的宮頸癌組織學(xué)類型的差異是宮頸癌組與正常宮頸組異質(zhì)性的主要來源，說明Galectin-3在宮頸鱗癌和非鱗癌之間可能存在表達(dá)差異；而宮頸癌組與CIN組、CIN組與正常宮頸組異質(zhì)性的主要來源是研究者有無提供具體CIN 級(jí)別及相應(yīng)Galectin-3 表達(dá)陽性例數(shù)。最終結(jié)果顯示：與正常宮頸組相比，宮頸癌組Galectin-3的表達(dá)上調(diào)，這與多數(shù)學(xué)者[4，5，9-12，14-18，20]報(bào)道的結(jié)果相一致，提示Galectin-3與正常宮頸組織癌變關(guān)系密切。然而也有學(xué)者報(bào)道，在宮頸癌中Galectin-3的表達(dá)是降低的。例如，LEE等[23]報(bào)道了Galectin-3 在宮頸癌組織中的表達(dá)下調(diào)，并表明其表達(dá)降低與宮頸腫瘤的進(jìn)展相關(guān)，原因可能是Galectin-3在各種類型的細(xì)胞中具有不同的功能。此次分析的結(jié)果在較大數(shù)據(jù)層面上支持了Galectin-3在宮頸癌中的表達(dá)高于正常宮頸組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并且宮頸癌與CIN之間、CIN與正常宮頸組織之間Galectin-3 表達(dá)也存在差異，但考慮到研究間仍存在部分異質(zhì)性，因此不能做出明確結(jié)論。

綜上所述，Galectin-3 表達(dá)上調(diào)會(huì)促進(jìn)正常宮頸組織向?qū)m頸癌的發(fā)展，檢測(cè)Galectin-3 的表達(dá)有助于宮頸癌的預(yù)后評(píng)估。

此次分析不排除有一定的局限性：①在公開發(fā)表的文獻(xiàn)中，以中文文獻(xiàn)占主要部分，國外研究偏少；②各個(gè)研究中組織標(biāo)本的處理方法、免疫組化陽性結(jié)果判斷的主觀性等可能會(huì)對(duì)研究的一致性產(chǎn)生影響。