紀(jì)新紅,于俊蘭

（濟南市歷城區(qū)中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，山東濟南 250100）

小兒肺炎支原體感染屬于兒童好發(fā)疾病，其中支原體為常見病原體。秋、冬季為小兒肺炎支原體感染的高發(fā)季節(jié)，臨床表現(xiàn)因病程的不同具有一定的差異性，如延誤治療，并發(fā)癥的發(fā)生風(fēng)險較高，早期明確病原體類型對于促進(jìn)患兒健康恢復(fù)具有重要意義[1]。臨床檢測支原體的方法較多，常用的方法包括：支原體分離培養(yǎng)、冷凝集試驗、生物學(xué)的聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）、免疫球蛋白M（IgM）檢測等。在實踐應(yīng)用過程中發(fā)現(xiàn)，支原體分離培養(yǎng)檢驗周期較長，因此臨床推廣難度較大；PCR技術(shù)檢測支原體雖然縮短了檢測周期，檢出率較高，但檢驗費用昂貴，也不利于檢測的普及[2]；冷凝集試驗操作簡單，但該檢測方法檢測支原體的敏感性、特異性均不佳，存在較高的漏診風(fēng)險；IgM檢測支原體以其操作簡單、出具結(jié)果快速、無需特殊儀器等優(yōu)勢在臨床得以普遍應(yīng)用，敏感性、特異性均較為滿意[3-4]?；诖耍敬窝芯窟M(jìn)一步探究了微生物快速培養(yǎng)和血清學(xué)檢驗兩種方式對疾病診斷的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年12月至2020年5月濟南市歷城區(qū)中醫(yī)醫(yī)院收治的134例肺炎支原體感染患兒為研究對象進(jìn)行回顧性分析，其中男72例，女62例，年齡8個月～11歲，平均年齡（4.65±1.73）歲，病程5～20 d，平均病程（12.84±2.47）d?；純壕虬l(fā)熱、氣喘、咳嗽、咳痰等呼吸系統(tǒng)癥狀就診，予以胸部X線檢查，均顯示單側(cè)絮狀陰影，其中13例患兒同時合并不同程度的肺外疾病體征。研究經(jīng)濟南市歷城區(qū)中醫(yī)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)后執(zhí)行。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患兒均予以明確診斷，符合《諸福棠實用兒科學(xué)》[5]中關(guān)于肺炎支原體感染的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，包括以發(fā)熱、咳嗽為主要臨床表現(xiàn)，并可伴有氣促或高熱癥狀。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并先天性肺部缺陷的患兒；②合并心、腎等重要臟器功能不全的患兒。

1.2 檢測方法 所有納入研究的患兒均分別進(jìn)行微生物快速培養(yǎng)和血清學(xué)檢驗，微生物快速培養(yǎng)檢驗方法：囑患兒張口發(fā)“啊”音，以充分暴露咽喉部位，用咽拭子培養(yǎng)管內(nèi)的消毒長棉簽，輕柔擦拭采集患兒兩側(cè)腭弓和咽、扁桃體上的分泌物，標(biāo)本采集完畢將棉簽插入咽拭子培養(yǎng)管內(nèi)，將其置入培養(yǎng)液，肺炎支原體鑒定培養(yǎng)基由陜西百盛園生物科技有限公司生產(chǎn)[陜食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2009第2400159號]，于37 ℃恒溫箱內(nèi)連續(xù)培養(yǎng)24 h，培養(yǎng)結(jié)束后觀察培養(yǎng)基的顏色變化，顏色自紅色變?yōu)辄S色則判定為支原體感染陽性，無變化為陰性。血清學(xué)檢驗：患兒于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下采集2 mL靜脈血，離心分離血清，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法檢測肺炎支原體IgM抗體即MP-IgM抗體，所使用MP-IgM抗體試劑盒的生產(chǎn)廠家為日本富士瑞比歐株式會社[賽樂迪亞 - 麥可Ⅱ，注冊證編號：國食藥監(jiān)械（進(jìn)）字2009第3402832號]，操作流程依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范執(zhí)行，MP-IgM＞1∶160判定患兒為支原體感染陽性，MP-IgM≤1∶160判定患兒為支原體感染陰性，結(jié)果為陰性者于1周后再次復(fù)查。金標(biāo)準(zhǔn)為支原體培養(yǎng)陽性。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察對比微生物快速培養(yǎng)和血清學(xué)檢驗的檢查結(jié)果、診斷效能（準(zhǔn)確率、靈敏度、特異度）以及不同年齡段血清學(xué)檢驗結(jié)果。準(zhǔn)確率=（真陽性數(shù)+真陰性數(shù)）/總例數(shù)×100%；靈敏度=真陽性數(shù)/（真陽性數(shù)+假陰性數(shù)）×100%；特異度=真陰性數(shù)/（真陰性數(shù)+假陽性數(shù)）×100%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 24.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計數(shù)資料用[ 例(%)]表示，行χ2檢驗，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種診斷方式檢查結(jié)果比較 血清學(xué)檢驗檢出陽性115例，陰性19例，參照金標(biāo)準(zhǔn)，其中真陽性115例，真陰性0例；微生物快速培養(yǎng)檢出陽性47例，陰性87例，其中真陽性47例，真陰性0例。見表1。

表1 兩種診斷方式檢查結(jié)果比較[ 例(%)]

2.2 兩種診斷方式的診斷效能比較 參照金標(biāo)準(zhǔn)檢測結(jié)果，血清學(xué)檢驗相較于微生物快速培養(yǎng)，其準(zhǔn)確率、敏感度分別為85.82%、85.82%，均顯著提高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩種診斷方式的診斷效能比較

2.3 各年齡段血清學(xué)檢驗結(jié)果對比分析 4～7歲患兒的陽性檢出率為92.86%，顯著高于其他年齡段患兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 各年齡段血清學(xué)檢驗結(jié)果對比分析[ 例(%)]

3 討論

肺炎支原體感染屬于輕微自限性疾病，但病情進(jìn)展至重癥階段，患兒可并發(fā)肺不張、胸腔積液、壞死性肺炎、氣胸等嚴(yán)重呼吸系統(tǒng)并發(fā)癥，嚴(yán)重還可出現(xiàn)呼吸窘迫甚至呼吸衰竭等癥狀。在實際診療中發(fā)現(xiàn)，約1/4的患兒并非以典型呼吸道癥狀為首發(fā)癥狀，加之支原體感染后缺乏特異性的臨床表現(xiàn)，僅依據(jù)臨床特征往往很難區(qū)分患兒為細(xì)菌感染、支原體感染或是病毒性 感染[6]。

一般臨床運用微生物快速培養(yǎng)法和血清學(xué)檢驗來檢測肺炎支原體感染。微生物快速培養(yǎng)法指的是在培養(yǎng)基中加入快速生長因子，促進(jìn)支原體快速繁殖，培養(yǎng)基內(nèi)需要加入微生物繁殖所需的蛋白和糖類，同時對其他生物產(chǎn)生抑制作用，該方法檢測對實驗室要求不高，操作簡單，但結(jié)果容易受到其他細(xì)菌的影響。血清學(xué)檢驗兼具操作簡單、價格低廉、出具結(jié)果快速等優(yōu)勢，成為了目前國內(nèi)外應(yīng)用最廣泛的肺炎支原體感染診斷方法[7]。國際上診斷支原體感染通常以恢復(fù)期與急性期的雙份血清抗體滴度變化作為依據(jù)，但實際診療中收集恢復(fù)期患兒的血清較為困難，且支原體與某些細(xì)菌或人體組織細(xì)胞具有相同的糖脂成分，檢測時易發(fā)生非特異性的交叉反應(yīng)。此外，抗體出現(xiàn)時機易受年齡、免疫條件、感染情況等多種因素的影響，檢測中容易出現(xiàn)漏診情況，因此肺炎支原體感染患兒采用單份血清檢測時，應(yīng)考慮到結(jié)果可能受多種因素影響，不能僅依據(jù)血清學(xué)檢驗結(jié)果確診為肺炎支原體感染。本次研究中采用血清學(xué)檢驗的單份血清，準(zhǔn)確率、敏感度分別為85.82%、85.82%，與微生物快速培養(yǎng)結(jié)果35.07%、35.07%比較，均顯著提升（P＜0.05），提示血清學(xué)檢驗的準(zhǔn)確率及敏感性更高。該結(jié)論與宋秦偉等[8]研究中血清學(xué)檢驗單份血清83.97%的準(zhǔn)確率報道基本一致。肺炎支原體感染后1周，機體開始出現(xiàn) MP-IgM，該指標(biāo)水平于3～4周達(dá)高峰，隨后呈下降趨勢，因此如為病情早期檢測MP-IgM，結(jié)果可為陰性。本次研究中還顯示：4～7歲患兒的陽性檢出率為92.86%，顯著高于其他年齡段患兒（P＜0.05），分析其原因：嬰幼兒階段機體免疫機能低下，因此免疫應(yīng)答反應(yīng)能力及抗體形成能力均相對較弱，極易出現(xiàn)漏診情況，而≥ 8歲兒童免疫系統(tǒng)發(fā)育趨于成熟，肺炎支原體感染后的致病性也較其他年齡段有所降低，因此陽性檢出率 降低。

綜上所述，小兒肺炎支原體感染實驗室檢查結(jié)果顯示，微生物快速培養(yǎng)與血清學(xué)檢驗，這兩種檢測方式對于疾病的診斷均具有一定的參考價值，但血清學(xué)檢驗診斷小兒肺炎支原體感染的陽性檢出率更高。此外，4～7歲患兒的支原體陽性檢出率最高。臨床可采用血清學(xué)檢驗診斷小兒肺炎支原體感染，并重點關(guān)注4～7歲患兒，以提高檢出率，提早對患兒進(jìn)行治療。