李丹，吳海紅，岳玲，馮秀麗

（遼寧省農業(yè)科學院花卉研究所，遼寧沈陽 110161）

玉簪，又名白萼、白鶴仙，百合科玉簪屬多年生宿根植物。原產于我國及日本。耐寒冷，在我國大部分地區(qū)都能露地越冬，喜陰濕環(huán)境，不耐強光直射。可用于林下地被植物，或公園、小區(qū)樹蔭下作為綠化植物使用，具有較高的觀賞效果，花和根可做藥用。多采用分株方式繁殖?！澍B’玉簪是美國育種專家在2005年培育出的藍葉系列品種之一，由于葉片分布有蠟質，影響葉片對光線的吸收和反射，致使葉片正面呈深藍綠色，葉色是影響玉簪觀賞價值的重要因素，具有極高觀賞價值。近些年，隨著經濟的快速發(fā)展，玉簪作為綠化苗木被廣泛應用，采用傳統(tǒng)的繁殖方法已不能滿足需求，該試驗意在建立一套完整的‘翠鳥’玉簪組培快繁體系，為其大量快速繁殖提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗材料取自沈陽農業(yè)大學科研基地的‘翠鳥’玉簪幼苗，待6月份長出花葶，以花葶作為外植體。

1.2 方法

1.2.1外植體的采集與處理。選取生長健壯、無病蟲害的植株，取新長出的幼嫩的花葶作為外植體使用。將花葶從基部剪下，用洗衣粉水洗掉表面灰塵，剪成3 cm左右的小段，在流水下沖洗30～40 min。瀝干水分，放到超凈工作臺上備用。用75%乙醇擦拭表面，浸入0.1%的氯化汞溶液消毒，消毒時間設置為3、5、7 min。然后用無菌水沖洗3～5次。將花葶段兩端與氯化汞接觸部分各切掉0.5 cm，平鋪接種到愈傷誘導培養(yǎng)基中。

1.2.2愈傷組織誘導培養(yǎng)基。以MS為基本培養(yǎng)基，添加不同濃度的6-BA與NAA，6-BA濃度為0.5、1.0、2.0 mL/L，NAA濃度為0.1、0.5、1.0 mL/L，共9個組合，添加蔗糖30 g/L，瓊脂5 g/L。將處理好的外植體接種到愈傷誘導培養(yǎng)基中，每瓶接種1段，每個組合接種30瓶。

1.2.3芽增殖培養(yǎng)基。將帶有小芽的愈傷組織切成小塊接種到增殖培養(yǎng)基中，以MS為基本培養(yǎng)基，添加6-BA濃度為0.5、1.0、2.0 mL/L，NAA濃度為0.01、0.1 mL/L，共計6個組合。每瓶接種1塊愈傷組織，每個組合接種10瓶。

1.2.4生根培養(yǎng)基。當叢生苗長到3～5 cm，切下接種到生根培養(yǎng)基中?；九囵B(yǎng)基采用1/2MS，添加NAA濃度為0.01、0.05、0.10 mL/L，蔗糖20 g/L，瓊脂5 g/L。14 d后統(tǒng)計生根率。

2 結果與分析

2.1 外植體滅菌時間的選擇

從表1可以看出，3 min的滅菌時間污染率較高，由于花葶比較幼嫩，7 min的滅菌時間導致組織被殺死，成活率不高，所以‘翠鳥’玉簪的花葶段最佳的滅菌時間為5 min。

表1 外植體滅菌時間的選擇

2.2 誘導培養(yǎng)基的選擇

從表2可以看出，當6-BA濃度達到2.0 mL/L，NAA的濃度為0.1～0.5 mL/L時，誘導率最高，且誘導的愈傷組織質地較密，呈深綠色，有芽點可見；當NAA的濃度達到1.0 mL/L時，也有較高的誘導率，但愈傷組織顏色較淺，質地疏松，芽點也較少。由此可見，高濃度的6-BA與低濃度的NAA組合有利于花葶愈傷組織的誘導。

表2 不同濃度6-BA、NAA對花葶愈傷誘導的影響

2.3 增殖培養(yǎng)基的選擇

從表3可以看出，將長有叢生芽的愈傷組織切塊，切掉芽的葉片部分，只保留生長點，接種到增殖培養(yǎng)基中，各個激素組合的培養(yǎng)基中芽都會產生增殖，6-BA濃度過高或過低，芽的增殖系數(shù)都比較小，6-BA濃度為1.0 mL/L，NAA為0.01～0.1 mL/L時，增殖系數(shù)較高，為適合叢生芽增殖的激素組合。

表3 不同濃度6-BA、NAA對芽增殖的影響

2.4 生根培養(yǎng)基的選擇

從表4可以看出，將長到5 cm左右的不定芽從基部在愈傷組織上切下，接種到NAA不同濃度組合的生根培養(yǎng)基中，2周以后觀察生根情況。當NAA濃度為0.1 mL/L時，只有少量的苗生根，且根數(shù)較少，比較瘦弱；當NAA濃度為0.01～0.05 mL/L時，生根率可達到90%以上，根質量較好，適合移栽。

表4 不同濃度NAA對生根的影響

3 結論

在建立‘翠鳥’玉簪組培快繁體系的過程中，幼嫩的花葶可以作為適合的外植體，既可以不破壞植株，又能保證材料充足。外植體達到最佳效果的滅菌方法是采用氯化汞5 min。誘導花葶產生愈傷組織的最佳培養(yǎng)基與激素組合為MS基本培養(yǎng)基，添加6-BA 2.0 mL/L，NAA 0.1～0.5 mL/L。最適合叢生芽增殖的組合為MS添加6-BA 1.0 mL/L，NAA 0.01～0.1 mL/L。1/2 MS添加NAA0.01～0.05 mL/L，最適宜生根。研究發(fā)現(xiàn)，生根苗的移栽對環(huán)境條件要求比較嚴格，如何選擇適合的栽培基質，控制好溫度與濕度，提高生根苗的成活率，還有待進一步研究。