肖松甲

（松滋市人民醫(yī)院感染科 湖北松滋 434200）

當(dāng)前臨床上多通過病理學(xué)、微生物檢查、臨床特征及影像學(xué)等多種方式對(duì)結(jié)核病實(shí)施診斷，但上述方式在早期確診是否為活動(dòng)性結(jié)核時(shí)仍舊存在較大的困難。因此臨床上需要盡快選擇一種高效的輔助檢測(cè)手段。本研究探討外周血結(jié)核感染T 細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)對(duì)活動(dòng)性結(jié)核的診斷價(jià)值，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年3 月～2021 年3 月以來我院收治的121 例活動(dòng)性結(jié)核患者及98 例肺部其他疾病患者作為研究對(duì)象，其中活動(dòng)性結(jié)核患者男69 例，女52 例，年齡61～82 歲，平均（70.3±1.2）歲；肺部其他疾病患者男51 例，女47 例，年齡62～81 歲，平均（70.2±1.3）歲。

1.2 方法

T-SPOT.TB 試劑盒生產(chǎn)廠家為英國(guó)OxordImmunotec公司，提供廠家為上海復(fù)星公司。采集患者10ml 靜脈血將其置入肝素抗凝管內(nèi)，并將Ficoll 淋巴細(xì)胞分離液加入，通過密度梯度離心法將計(jì)數(shù)活淋巴細(xì)胞、單個(gè)核淋巴細(xì)胞（PBMC）完全分離出來，培養(yǎng)板條每孔分別加入抗原CFP-10、50LLl AIM-V、抗原ESAT-6 及陽(yáng)性對(duì)照后，再于每個(gè)孔內(nèi)加入100μlPMBC。通過濃度為5%的CO2在37℃的培養(yǎng)箱孵育16-20h，之后去培養(yǎng)液并進(jìn)行洗滌處理，并加入堿性磷酸酶標(biāo)記的鼠抗人γ-干擾素抗體，在2℃～8℃的條件下孵育lh，之后將其洗滌，并加入50μl 顯色液，在室溫下避光反應(yīng)7min 并終止反應(yīng)，然后在室溫下干燥2h 對(duì)斑點(diǎn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）觀察分析活動(dòng)性肺結(jié)核患者T-SPOT.TB 檢測(cè)的靈敏度及特異度。

（2） 觀察分析活動(dòng)性肺結(jié)核患者菌陽(yáng)性及菌陰性T-SPOT.TB 檢測(cè)情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

用SPSS22.0 進(jìn)行分析，所有數(shù)據(jù)當(dāng)中，（%）類計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)，行X2檢驗(yàn)檢測(cè)；（）類計(jì)量數(shù)據(jù)，行T 檢驗(yàn)檢測(cè)；P＜0.05時(shí)，提示差異顯著。

2 結(jié)果

經(jīng)T-SPOT.TB 檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，121 例活動(dòng)性結(jié)核患者中檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的有102 例，98 例肺部其他疾病患者中檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的有23 例，兩組比較其差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），且T-SPOT.TB 在活動(dòng)性肺結(jié)核患者診斷中的敏感度為84.3%，特異度為76.5%，見表1。

表1 活動(dòng)性肺結(jié)核患者T-SPOT.TB 檢測(cè)的靈敏度及特異度（n，%）

痰涂菌陽(yáng)性組、痰涂菌陰性組患者T-SPOT.TB 檢測(cè)陽(yáng)性率依次為96.2%及66.2%，兩組陽(yáng)性率對(duì)比存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 活動(dòng)性肺結(jié)核患者菌陽(yáng)性及菌陰性T-SPOT.TB 檢測(cè)對(duì)比（n，%）

3 討論

活動(dòng)性肺結(jié)核屬于臨床上比較多見的呼吸系統(tǒng)疾病類型，其主要臨床癥狀為咳嗽、低熱、盜汗以及咳血等，而且部分老年患者因自身免疫功能減退，經(jīng)常會(huì)伴隨有肺惡性腫瘤、COPD 等其他肺部疾病。因而在疾病早期會(huì)掩蓋活動(dòng)性肺結(jié)核癥狀，并會(huì)對(duì)早期診斷造成不利影響。因而為了能對(duì)活動(dòng)性肺結(jié)核患者進(jìn)行早期確診，需要通過多種不同檢測(cè)方式來提高臨床診斷的敏感性。

結(jié)核感染T 細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)（T-SPOT.TB）屬于一類比較新型的臨床診斷方式，其敏感性及特異度均相對(duì)較高。γ-干擾素釋放試驗(yàn)（IGRAs）在結(jié)核分枝桿菌潛伏感染診斷中的應(yīng)用愈發(fā)普遍，其應(yīng)用的抗原主要為結(jié)核分枝桿菌RDl 區(qū)的特異抗原CFP-10 及ESAT-6，因此實(shí)驗(yàn)可以對(duì)所有卡介苗接種的回憶反應(yīng)及大部分環(huán)境分枝桿菌感染進(jìn)行準(zhǔn)確分辨。結(jié)核感染后機(jī)體內(nèi)會(huì)長(zhǎng)期存在抗原特異性T 細(xì)胞，當(dāng)再一次遭受抗原刺激后，會(huì)迅速活化增殖并分泌出大量的γ- 干擾素，因此通過對(duì)γ-干擾素的釋放水平進(jìn)行檢測(cè)可以對(duì)機(jī)體是否感染結(jié)合桿菌進(jìn)行判斷。

研究發(fā)現(xiàn)，T-SPOT.TB 在活動(dòng)性肺結(jié)核患者診斷中的敏感度為84.3%，特異度為76.5%，且痰涂菌陽(yáng)性組、痰涂菌陰性組患者T-SPOT.TB 檢測(cè)陽(yáng)性率依次為96.2%及66.2%，兩組陽(yáng)性率對(duì)比存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，T-SPOT.TB 的敏感度較高，將其應(yīng)用于活動(dòng)性肺結(jié)核篩查中，可以使肺結(jié)核漏診率進(jìn)一步降低，但因其特異度較低，所以需要對(duì)其在疾病鑒別診斷中的價(jià)值做深入性分析。