寧陽陽

（遼寧省農(nóng)產(chǎn)品及獸藥飼料產(chǎn)品檢驗檢測院，遼寧沈陽 110032）

1 材料和方法

1.1 材料與試劑

本次研究采用的試劑中，除去一些特別的標注外，大部分為分析純，而試驗用水則是超純水；甲醇（色譜純）；乙腈（色譜純）；甲酸（優(yōu)級純）。

農(nóng)藥種類為噻蟲胺（99.25%），乙氧氟草醚（99.40%），抑霉唑（99.00%），異稻瘟凈（97.50%），撲草凈（99.00%），氯磺?。?9.00%），氯嘧磺?。?8.00%），茚蟲威（99.50%），殺蟲脒（99.50%），野麥畏（99.00%），異丙?。?9.00%），生物芐呋菊酯（100 mg/L），甲草胺（100 mg/L），氧樂果（100 mg/L），乙草胺（100 mg/L），丙草胺（100 mg/L），異丙甲草胺（100 mg/L），三唑磷（100 mg/L）。

1.2 儀器與設備

超高效液相色譜串聯(lián)四級桿質(zhì)譜聯(lián)用儀（ACQUITY UPLC，Quattro Premier XE），冷凍高速離心機（Avanti J-E），Milli-Q超純水純化系統(tǒng)，中性氧化鋁柱（500 mg/3 mL），12管固相萃取裝置，分析天平[1]。

1.3 試驗方法

1.3.1 溶液的配制

（1）標準儲備液配制。分別準確稱取固體標準品適量，加入乙腈溶解，定容到100 mL，配成質(zhì)量濃度約為500 mg/L的標準儲備溶液。

（2）標準中間液配制。取標準儲備溶液1.00 mL，用乙腈定容至10 mL，配成質(zhì)量濃度約為10 mg/L的標準中間液，放置于4 ℃冰箱中保存。

1.3.2 基質(zhì)加標標準溶液

取粉碎的糧谷樣品10 g，放置于50 mL離心管中，加入10 mL水，靜置10 min后再添加10 mL乙腈并混勻，經(jīng)超聲波振蕩提取30 min，之后添加5 g氯化鈉，混勻，在10 000 r/min離心條件下離心5 min；取上清液5 mL于中性氧化鋁柱中進行凈化，然后采集流出液，用乙腈（1 mL）淋洗小柱，吹干后收集，在40 ℃氮氣下吹至近干，60%乙腈定容至1.0 mL，混勻，在離心機上離心3 min（轉(zhuǎn)速為16 000 r/min），經(jīng)0.2 μm濾膜過濾，再添加適量的標準溶液于過濾后的提取液，制成基質(zhì)加標的標準溶液，要求現(xiàn)配現(xiàn)用[2]。

1.3.3 甲酸（0.1%）、乙腈（60%）的配制

（1）甲酸配制。水（500 mL）+ 甲酸（0.5 mL）。

（2）乙腈配制。水（400 mL）+ 乙腈（600 mL）。

1.3.4 樣品處理

取粉碎的糧谷樣品10 g，放置于50 mL離心管中，加入10 mL水，靜置10 min后再添加10 mL乙腈并混勻，經(jīng)超聲波振蕩提取30 min，之后添加5 g氯化鈉，混勻，在10 000 r/min離心條件下離心5 min[3]；取上清液5 mL于中性氧化鋁柱中進行凈化，然后采集流出液，用乙腈（1 mL）淋洗小柱，吹干后收集，在40 ℃氮氣下吹至近干，60%乙腈定容至1.0 mL，混勻，在離心機上離心3 min（轉(zhuǎn)速=16 000 r/min），經(jīng)0.2 μm濾膜過濾，待測。

1.3.5 測定條件

（1）色譜條件。色譜柱：ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）；柱溫：35 ℃；檢測儀器：串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀；流動相：0.1%甲酸-乙腈梯度洗脫；進樣量：10 μL。

（2）質(zhì)譜條件。電離源：電噴霧質(zhì)譜正離子模式；毛細管電壓：3.5 kV；離子源溫度：120 ℃；脫溶劑氣的溫度及流量：400 ℃、700 L/h；碰撞室壓力：2.7×10-3mbar。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性關系

由表1可知，在各自的線性范圍，其中氧樂果、殺蟲脒、野麥畏、抑霉唑、氯嘧磺隆、乙氧氟草醚、生物芐呋菊酯的線性相關系數(shù)顯示R2＞0.99，而三唑磷、噻蟲胺、異丙隆、異丙甲草胺、撲草凈、氯磺隆、甲草胺、乙草胺、丙草胺、茚蟲威、異稻瘟凈的線性相關系數(shù)顯示R2＞0.999。

表1 18種農(nóng)藥的線性方程與相關系數(shù)

2.2 檢出限和定量限

依據(jù)線性范圍最低的質(zhì)量濃度進行進樣[4]，然后在信噪比3∶1及10∶1的條件下得出各農(nóng)藥的檢測限及定量限，結(jié)果如表2所示。

表2 18種農(nóng)藥的檢測限和定量限結(jié)果

2.3 回收率和精密度

利用空白樣品的基質(zhì)溶液進行標準工作溶液的配制，空白樣品即是未檢出的樣品。每種農(nóng)藥殘留進行3個梯度的加標試驗，每個梯次加標質(zhì)量分數(shù)平行測定2份，最后取數(shù)據(jù)的平均值[5]。

由表3可知，研究的18種農(nóng)藥中，13種農(nóng)藥的（噻蟲胺、乙氧氟草醚、抑霉唑、異稻瘟凈、撲草凈、氯磺隆、氯嘧磺隆、茚蟲威、野麥畏、異丙隆、生物芐呋菊酯、氧樂果、三唑磷）平均回收率在80.8%～104.0%，其RSD在0.2%～7.1%。另外5種農(nóng)藥的（丙草胺、甲草胺、乙草胺、殺蟲脒、異丙甲草胺）平均回收率62.1%～89.4%，RSD為0.2%～11.1%。

表3 加標回收試驗結(jié)果

續(xù)表3

3 結(jié)論

本方法可以同時對糧谷中的18種農(nóng)藥殘留進行檢測，并且在各自的檢測質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，其線性關系表現(xiàn)較為良好，有11種農(nóng)藥的R2＞0.999，7種R2＞0.99；并且檢測限及定量限全部符合相關的標準，并且檢測效率高；13種農(nóng)藥的（噻蟲胺、乙氧氟草醚、抑霉唑、異稻瘟凈、撲草凈、氯磺隆、氯嘧磺隆、茚蟲威、野麥畏、異丙隆、生物芐呋菊酯、氧樂果、三唑磷）平均加標回收率80.8%～104.0%，5種農(nóng)藥的（丙草胺、甲草胺、乙草胺、殺蟲脒、異丙甲草胺）平均回收率62.1%～89.4%。與國標方法相比，本方法在對樣品的前期處理中，進一步簡化了樣品凈化和提取的復雜工序，提升了工作效率；試驗中未選擇使用GPC凝膠凈化儀，是因為其成本高，由此可以減少檢驗的成本投入。