朱峻逸，黃元河

（1.百色市食品藥品檢驗(yàn)所，廣西百色 533000；2.右江民族醫(yī)學(xué)院，廣西百色 533000）

排毒茶主要產(chǎn)于云南、貴州、廣東等地，具有良好的食用、藥用和農(nóng)業(yè)價(jià)值[1]。以其莖入藥，微苦性平，具有祛風(fēng)活血、清熱利尿的功效，主治水腫、泄瀉、小便不利、黃疸、半身不遂、風(fēng)濕骨痛和跌打損傷等[2]。在廣西壯族民間，常用治療肝炎、尿道炎、急性腎炎、痛風(fēng)等疾病，都具有較好的療效。赤蒼藤降低體內(nèi)尿酸的含量，對(duì)治療和預(yù)防高尿酸血癥有較好的作用[3]，患者服用赤蒼藤水煎液后，其排泄的尿味極臭，故人們稱(chēng)為稱(chēng)為“排毒茶”[4]。目前大量的研究表明，中草藥微量元素的含量與中藥材的藥性、藥效乃至安全性密切相關(guān)[5]。電感耦合等離子體質(zhì)譜法（Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry ICP-MS）是一種無(wú)機(jī)元素測(cè)試分析的技術(shù)，具有線性范圍寬、精密度高的特點(diǎn)，可同時(shí)檢測(cè)多種元素，廣泛應(yīng)用于中草藥的檢測(cè)[6-7]。目前，隆衛(wèi)革等[8]根據(jù)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，采用原子吸收光譜法，檢測(cè)了赤蒼藤嫩芽葉中的Cu、Zn、Ca、Fe、Mg含量。本文采用ICPMS法同時(shí)檢測(cè)赤蒼藤莖中K（鉀）、Ca（鈣）、Mg（鎂）、Na（鈉）、Fe（鐵）、Sr（鍶）、Mn（錳）、Al（鋁）、Cr（鉻）、B（硼）、Ni（鎳）及Ba（鋇）12種微量元素的含量，旨在為其質(zhì)量控制提供參考，為進(jìn)一步開(kāi)展其作為保健茶的開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器

iCAPQ ICP-MS光譜儀電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司）；AL104型電子天平（瑞士Mettler Toledo公司）；MARS 6微波消解儀（美國(guó)CEM公司）；EHD20-iTouch趕酸儀（美國(guó)Lab Tech萊伯泰科有限公司）；超純水機(jī)（明澈Dirext-Q3，艾威儀器科技有限公司）；分析天平（CPA225D，賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司）。

1.2 材料與試劑

排毒茶購(gòu)于廣西赤蒼藤生物科技有限責(zé)任公司，經(jīng)過(guò)右江民族醫(yī)學(xué)院黃元河教授鑒定為赤蒼藤（Erythropalum scandensBl.）的莖。排毒茶粉碎成細(xì)粉，過(guò)200目篩，烘干備用。

K、Ca、Mg、Na、Fe、Sr、Mn、Al、Cr、B、Ni及 Ba等12種元素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液10 mg/L，美國(guó)ThermoFisher公司混標(biāo) CLMS系列；45Sc、74Ge、103Rh、115In、185Rh、209Bi等多元素標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)標(biāo)溶液（10 mg/L，美國(guó)ThermoFisher公司混標(biāo)CLMS系列）；超純水（電阻率18.2 MΩ/cm），超純水機(jī)生產(chǎn)廠家（艾威儀器科技有限公司）；硝酸（優(yōu)級(jí)純，含量：65.0%～68.0%，密度ρ=1.42 g/mL，沈陽(yáng)西隴化工股份有限公司）；氫氟酸（優(yōu)級(jí)純，濃度≥40%，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；氫氧化鈉（優(yōu)純級(jí)，濃度30%，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。本實(shí)驗(yàn)所用各種酸均經(jīng)亞沸騰二次蒸餾后使用。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 樣品處理

先將所有樣品混合均勻，然后采用四分法縮放樣品，再隨機(jī)取樣粉碎成粉末，準(zhǔn)確稱(chēng)取0.3 g樣品于消解管中，依次加入5 mL硝酸和2 mL過(guò)氧化氫，于110 ℃預(yù)消解至無(wú)黃色煙霧為止。將消解管放入微波消解儀中，將程序調(diào)至最佳狀態(tài)。消解結(jié)束后待消解管溫度降至55 ℃以下，將消解管置于100 ℃趕酸儀中，趕酸至液體呈無(wú)色或淡黃色，將溶液轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中用1%硝酸溶液沖洗消解管3次并入容量瓶中，用1%硝酸溶液定容至刻度，搖勻冷卻至室溫后直接進(jìn)樣分析檢測(cè)。同時(shí)采用同樣的方法處理加入相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品的樣品和試劑空白。

1.3.2 微波消解程序

消解功率：3 600 W；15 min升溫到190 ℃，保持15 min，15 min降到室溫。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)品溶液、內(nèi)標(biāo)溶液和空白溶液的制備

（1）標(biāo)準(zhǔn)品溶液制備 用3%HNO3溶液逐級(jí)稀釋?zhuān)渲玫玫劫|(zhì)量濃度為 1 μg/L、5 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、30 μg/L、50 μg/L、100 μg/L 的 K、Ca、Mg、Na、Fe、Sr、Mn、Al、Cr、B、Ni及Ba元素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

（2）內(nèi)標(biāo)溶液采制備：用45Sc、74Ge、103Rh、115In、185Rh、209Bi作為內(nèi)標(biāo)，用3%的HNO3溶液配制成濃度為1 μg/L混合內(nèi)標(biāo)溶液。

（3）空白對(duì)照溶液制備：3%的HNO3作為空白對(duì)照溶液。

1.3.4 ICP-MS條件

具體儀器參數(shù)如下：等離子體模式為高靈敏模式；He模式分析；RF入射功率1 350 W；載氣（氬氣）流速13.4 L/min；碰撞池氦氣流量1.2 L/min；采樣深度3.0 cm；霧化室溫度25 ℃；蠕動(dòng)泵泵速0.4 rps；分析時(shí)間5 s；重復(fù)采樣3次；使用內(nèi)標(biāo)溶液在線加入法。

在上述ICP-MS工作參數(shù)條件下，依次對(duì)試劑空白、混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液、樣品溶液分別進(jìn)行檢測(cè)，由ICP-MS工作站軟件分析數(shù)據(jù)，儀器自動(dòng)繪制出各個(gè)元素的標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算出樣品及標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品中各對(duì)應(yīng)元素的含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性關(guān)系考察

ICP-MS的動(dòng)態(tài)線性范圍寬，可達(dá)到7個(gè)數(shù)量級(jí)。實(shí)驗(yàn)中在優(yōu)化的儀器條件下采集系列待測(cè)元素標(biāo)準(zhǔn)溶液，由儀器自動(dòng)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并給出線性關(guān)系。結(jié)果表明12種元素的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r均≥0.999 2，見(jiàn)表1。

2.2 定量限與檢測(cè)限考察

分別精密量取“1.3.3”項(xiàng)下空白對(duì)照溶液適量，并按“1.3.4”下條件進(jìn)樣檢測(cè)，以連續(xù)檢測(cè)空白對(duì)照溶液信號(hào)響應(yīng)值的10倍標(biāo)準(zhǔn)偏差（10SD）對(duì)應(yīng)的元素質(zhì)量濃度值作為定量限，以連續(xù)檢測(cè)空白溶液信號(hào)響應(yīng)值的3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差（3SD）對(duì)應(yīng)的元素質(zhì)量濃度值作為檢測(cè)限，詳見(jiàn)下表1。

2.3 精密度

取“1.3.3”項(xiàng)下配制的質(zhì)量濃度為50 μg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)品，連續(xù)進(jìn)樣檢測(cè)6次，計(jì)算各元素6次測(cè)得的質(zhì)量濃度的RSD。結(jié)果顯示12種元素相對(duì)強(qiáng)度的RSD分別在0.31～3.45%（n=6），表明儀器精密度良好，見(jiàn)表1。

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線方程、線性范圍、定量限與檢測(cè)限

2.4 穩(wěn)定性

精密吸取待測(cè)樣品溶液，分別于0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h，進(jìn)樣檢測(cè)計(jì)算各元素6次質(zhì)量濃度的RSD分別在0.75～2.78%（n=6），表明待測(cè)樣品溶液在室溫下放置24 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.5 重復(fù)性

精密稱(chēng)取“排毒茶”樣品粉末（編號(hào)X1），共6份，按“1.3.1”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，進(jìn)樣檢測(cè)計(jì)算各元素6份中含有的12種元素，12種元素質(zhì)量濃度的RSD分別在0.37～3.16%（n＝6），表明本實(shí)驗(yàn)方法重復(fù)性好。

2.6 加樣回收率

精密稱(chēng)取已知含量的排毒茶6批次樣品粉末（編號(hào)X1-6）0.3 g，加入與樣品中各元素質(zhì)量相當(dāng)?shù)幕旌蠘?biāo)準(zhǔn)品，按“1.3.1”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，同法制備試劑空白溶液，檢測(cè)各元素含量，計(jì)算回收率，平均加樣回收率為95.89～101.13%，表明該檢測(cè)方法準(zhǔn)確度良好，符合元素檢測(cè)要求。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）

2.7 樣品檢測(cè)結(jié)果

分別稱(chēng)取6批次不同采集的“排毒茶”樣品細(xì)粉各適量，按照“1.3.1”項(xiàng)下方法制備“排毒茶”的供試品溶液，分別檢測(cè)12種元素的含量。結(jié)果顯示，“排毒茶”6批次樣品中含有12種元素，含量有一定的波動(dòng)，這可以與產(chǎn)地的生長(zhǎng)環(huán)境相關(guān)。常量元素有K、Ca、Mg、Na，以K（6 626.694 mg/kg）、Ca（7 033.638 mg/kg）、Mg（955.353 mg/kg）較為豐富，含有7種微量元素包括Fe（131.561 mg/kg）、Sr（30.551 mg/kg）、Mn（12.919 mg/kg）、Al（12.233 mg/kg）、Cr（11.718 mg/kg）、B（6.378 mg/kg）、Ni（3.485 mg/kg）、Ba（3.192 mg/kg）。

表3 樣品中元素的含量檢測(cè)結(jié)果（n=6，單位：mg/kg）

3 結(jié)論與討論

在使用ICP-MS電感耦合等離子體質(zhì)譜法進(jìn)行微量元素檢測(cè)時(shí)會(huì)受到多種原子的干擾，因此需要對(duì)樣品進(jìn)行的預(yù)處理。本文采用硝酸+過(guò)氧化氫體系，采用消解儀消解樣品[9]，精確控溫，密閉消解，可完全破壞樣品中的有機(jī)物[4]。采用ICP-MS電感耦合等離子體質(zhì)譜法幾乎克服了傳統(tǒng)分析方法的大多數(shù)缺點(diǎn)，檢測(cè)范圍廣、可分析多個(gè)元素、速度快、敏度高、準(zhǔn)確性好，在中藥及其制劑重金屬限量控制、元素分析以及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定中應(yīng)用十分廣泛[10]。

本次檢測(cè)“排毒茶”6批次樣品中含有12種元素，其中常量元素有K、Ca、Mg、Na，較為豐富，其含量遠(yuǎn)高于其嫩枝葉的含量[8]，是不可多得的高鈣高鉀植物。微量元素是中藥的基本成分，也是中藥藥效量化的物質(zhì)基礎(chǔ)[11-12]，“排毒茶”中含有Fe、Sr、Mn、Al、Cr、B、Ni和Ba微量元素。這些元素在機(jī)體的代謝中發(fā)揮十分重要的作用。例如Fe是血紅蛋白、肌紅蛋白、細(xì)胞色素及多種酶的主要活性部分，參與機(jī)體氣體交換和細(xì)胞呼吸；Sr參與神經(jīng)肌肉的興奮有關(guān)，可強(qiáng)壯骨骼、防治心血管病、促進(jìn)新陳代謝；Mn是人體中多種酶系統(tǒng)的輔助因子，參與造血過(guò)程和脂肪代謝過(guò)程，具有促生長(zhǎng)，強(qiáng)壯骨骼，防治心血管病的功能[13]；Al能中和胃酸，能與蛋白質(zhì)結(jié)合而具有較強(qiáng)的收斂作用，對(duì)于保護(hù)潰瘍出血、止血有一定作用[14]；B對(duì)動(dòng)物機(jī)體的礦物元素、維生素D3、氨基酸、蛋白質(zhì)、脂肪等代謝和骨骼發(fā)育、腦功能、免疫功能以及胰島素分泌有著重大的影響，對(duì)人體具有抗骨質(zhì)疏松、抗炎癥、抗腫瘤、降血脂等作用，尤其對(duì)人的生殖健康有重要影響[15]；Sr能夠減少Na的吸收，降低血壓，預(yù)防冠心病的發(fā)生[16]；Cr是維持正常的糖脂代謝所必需的微量元素[17]。

綜上所述，該方法效率高，可用于同時(shí)檢測(cè)“排毒茶”中12種元素的含量，經(jīng)過(guò)檢測(cè)“排毒茶”常量元素鈣和鉀含量較高，微量元素種類(lèi)豐富，在協(xié)同治療降尿酸中發(fā)揮重要的作用，具有極大的開(kāi)發(fā)價(jià)值。