呂丹

血常規(guī)是一種通過觀察血細胞形態(tài)分布、數(shù)量變化等判定疾病的方法,是實驗室檢驗的重要項目。以往血常規(guī)多通過血涂片顯微鏡細胞形態(tài)學檢查,但對檢驗人員的要求較高,如操作不當或血涂片制備不合格均會導致誤差,影響疾病的診斷結(jié)果［1,2］。隨著檢驗儀器的快速發(fā)展,全自動血細胞分析儀因精確度高、檢測速度快、操作簡單的優(yōu)勢被廣泛用于血常規(guī)檢查中［3］。但全自動血細胞分析儀檢測血常規(guī)也存在誤差現(xiàn)象。為進一步探究其應用價值,本研究對復檢血常規(guī)標本分別進行全自動血細胞分析儀檢驗、涂片鏡檢檢測,以便探究全自動血細胞分析儀在血常規(guī)檢驗中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2018年8月～2019年7月本院檢驗科1712 份患者的血常規(guī)標本資料,均經(jīng)血細胞全自動血細胞分析儀檢測,符合血細胞形態(tài)學復檢標準的共878 份,其中男488 份,女390 份；年齡7～82 歲,平均年齡(58.57±20.46)歲。以上患者均符合此次研究標準?；颊呔鶎Ρ敬窝芯磕康闹?且自愿參加,并簽署相關知情同意書。此次研究已通過本院倫理委員會審核批準。

1.2 方法 878 份患者的血常規(guī)標本均行全自動血細胞分析儀和涂片鏡檢檢測。

1.2.1 儀器與設備 全自動血細胞分析儀(sysmex型)；雙目顯微鏡(O 淋巴細胞mpusCX22)；瑞士染色液購自杭州濱河微生物試劑有限公司；乙二胺四乙酸二鉀真空抗凝管(貝斯特,EDTA-K2型)。

1.2.2 檢測方法 抽取患者靜脈血2 ml,均勻搖晃且靜置1 h 后,在室溫下由同一位經(jīng)驗豐富的檢驗醫(yī)師完成全自動血細胞分析儀檢測,并進行瑞氏染色液染色。染色方法如下：將厚薄均勻、頭體尾明顯的干燥血涂片標本用蠟筆在兩頭劃線,滴瑞氏染液4～5 滴,固定1 min 后以1：(1～2)的比份加緩沖液,吹均勻后染色5 min,沖洗、晾干。在顯微鏡下觀察細胞的形態(tài)、數(shù)量、大小、分類等。為減少結(jié)果變異的發(fā)生,所有標本檢測和復查均在5 d 內(nèi)完成。

1.3 檢測標準

1.3.1 標本復檢標準［4］白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血小板(PLT)至少存在一項減少,或RBC 增加但全自動血細胞分析儀無報警提示,PLT＜50×109/L或＞350×109/L,WBC＜2.5×109/L 或＞15×109/L；或WBC分類存在異常者；或血紅蛋白(Hb)濃度＞160 g/L 或＜60 g/L,平均RBC 體積＞100 fl 或＜70 fl；中性粒細胞＞0.85；嗜酸粒細胞＞0.10；嗜堿粒細胞＞0.10；淋巴細胞＞0.60；單核細胞＞0.15。

1.3.2 鏡檢陽性標準 RBC 形態(tài)學、PLT、有核紅細胞改變幅度為重度以上,WBC 檢驗和分類結(jié)果一致,可見未成熟粒細胞、異型淋巴細胞、血小板聚集、細胞核左移、原始細胞,可見血液寄生蟲、中毒顆粒等異常。

1.4 觀察指標 比較全自動血細胞分析儀和涂片鏡檢檢測的血常規(guī)結(jié)果,包括中性粒細胞、嗜酸粒細胞、嗜堿粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、幼稚細胞/核左移、原始細胞/異型淋巴細胞檢出率及血常規(guī)異常標本總檢出率。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS22.0 統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

復查878 份血常規(guī)異常標本中,其中中性粒細胞427 份,全自動血細胞分析儀檢出率為100.00%,涂片鏡檢檢出率為99.30%；嗜酸粒細胞84 份,全自動血細胞分析儀檢出率為83 份(98.81%),涂片鏡檢檢出率為92.86%；嗜堿粒細胞56 份,全自動血細胞分析儀檢出率為96.43%,涂片鏡檢檢出率為87.50%；淋巴細胞167 份,全自動血細胞分析儀檢出率為95.81%,涂片鏡檢檢出率96.41%；單核細胞56 份,全自動血細胞分析儀檢出率為89.29%,涂片鏡檢檢出率為100.00%；原始細胞/異型淋巴細胞42 份,全自動血細胞分析儀檢出率為80.95%,涂片鏡檢檢出率為97.62%；幼稚細胞/核左移46 份,全自動血細胞分析儀檢出率為82.61%,涂片鏡檢檢出率為95.65%；全自動血細胞分析儀對中性粒細胞、嗜酸粒細胞、嗜堿粒細胞、淋巴細胞的檢出率與涂片鏡檢比較,差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；全自動血細胞分析儀對單核細胞、原始細胞/異型淋巴細胞、幼稚細胞/核左移檢出率低于涂片鏡檢,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。全自動血細胞分析儀血常規(guī)異常標本總檢出率為96.36%(846/878),涂片鏡檢總檢出率為96.81%(850/878),比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 兩種檢測方法的血常規(guī)結(jié)果比較［n(%)］

3 討論

不同疾病對應的血細胞形態(tài)變化也不一致。涂片鏡檢是血常規(guī)檢查的金標準,具有較高的準確度,適合用于各種血液病的初篩［5］。但涂片鏡檢的干擾因素較多,如血涂片制備厚薄不均、細胞分布不均、兩側(cè)未留有間隙；染色過酸或過堿；染色時間不適；檢驗人員技術(shù)不合格等均可能影響涂片鏡檢的準確度。此外,不同的檢驗人員對細胞的判斷存在誤差,也會在一定程度上影響疾病的判斷。早些年,中華醫(yī)學會檢驗分會根據(jù)國際血液學復查專家組成立的針對自動血細胞計數(shù)和白細胞計數(shù)的復檢標準,發(fā)布了41 條篩查規(guī)則。即使這樣,國內(nèi)醫(yī)療機構(gòu)仍然重視度不足。因此,應在常規(guī)臨床血液檢查中提高復檢率,以確認儀器檢查結(jié)果是否正確。應該針對有問題的標本進行描述性分析,以免對血液系統(tǒng)疾病造成漏診。血細胞形態(tài)分析是常規(guī)血液檢查的金標準。

隨著檢驗設備的快速發(fā)展,全自動血細胞分析儀被廣泛用于臨床血常規(guī)檢查中。該儀器用于血常規(guī)檢查中主要具備三種功能：白細胞計數(shù)及分類、紅細胞計數(shù)以及分類功能的拓展,包括造血干細胞計數(shù)、有核紅細胞觀察及計數(shù)、未成熟及幼稚粒細胞計數(shù)等。本研究結(jié)果顯示,全自動血細胞分析儀對中性粒細胞、嗜酸粒細胞、嗜堿粒細胞、淋巴細胞的檢出率與涂片鏡檢比較,差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；全自動血細胞分析儀對單核細胞、原始細胞/異型淋巴細胞、幼稚細胞/核左移檢出率低于涂片鏡檢,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。全自動血細胞分析儀血常規(guī)異常標本總檢出率為96.36%(846/878),涂片鏡檢總檢出率為96.81%(850/878),比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。由此說明全自動血細胞分析儀在血常規(guī)中具有較高的應用價值,對中性粒細胞、嗜酸粒細胞、嗜堿粒細胞、淋巴細胞等檢出率較高,對單核細胞、原始細胞/異型淋巴細胞、幼稚細胞/核左移等分類效果較差,但必要時也可聯(lián)合涂片鏡檢,以便提高檢測準確率。分析原因在于,與以往的涂片鏡檢相比,全自動血細胞分析儀具有操作簡單、速度快、準確度高、重復性好的優(yōu)勢。但全自動血細胞分析儀較難識別血細胞的形態(tài),對血細胞形態(tài)、比例分析和觀察具有局限性,容易出現(xiàn)假陽、假陰情況,誤導疾病診斷。為了提高診斷的準確性,檢查人員在檢驗血樣前應預先校準儀器,以確保檢驗質(zhì)量,并確保檢驗結(jié)果更可靠、更準確。同時還必須注意自動血細胞全自動血細胞分析儀和試劑的保存,以確保保存環(huán)境干燥,通風良好,以防止儀器受到無線電干擾或陽光直射的影響,并嚴格按照標準操作程序進行各種檢查操作［6］。

當患者發(fā)生細菌感染時中性粒細胞發(fā)生毒性、核象變化,胞質(zhì)粗大、增多或有空泡、變性,但其他因素也可能引發(fā)白細胞假性增高。病毒感染以淋巴細胞增高為主,血紅蛋白含量、紅細胞形態(tài)、大小均可改變。全自動血細胞分析儀在正常血細胞形態(tài)的檢查中可計數(shù)成熟的白細胞、紅細胞、血小板。在相關研究中得知,儀器對于大紅細胞和小紅細胞的判讀較為準確,從直方圖中能夠直觀讀取。楊玉勤［7］的研究中得知,血液標本白細胞分類鏡檢中嗜酸性細胞、中性粒細胞、單核細胞、淋巴細胞具有較高符合率,嗜堿性細胞符合率較低。而有報警提示鏡檢陽性符合率為69.88%。因此,血細胞全自動血細胞分析儀對異常細胞報警提示靈敏度極高,具有較強的針對性,與鏡檢的符合度較高。邢瑩等［6］研究中,對外周血血細胞中白細胞復檢結(jié)果進行分析,發(fā)現(xiàn)全自動血細胞形態(tài)學數(shù)字圖像全自動血細胞分析儀對各種白細胞的分類、計數(shù)特異性較高,尤其是中性粒細胞中毒形態(tài)異常檢測敏感度可達100.00%,對原始細胞可達91.7%,對中性粒細胞分類計數(shù)異常敏感性達91.8%,淋巴細胞達88.5%,嗜酸粒細胞達78.9%,證明全自動血細胞分析儀在血常規(guī)中應用價值較高。但對于嚴重感染、白血病或其他病變者,血細胞形態(tài)會出現(xiàn)病理變化導致血異常,此時全自動血細胞分析儀無法準確對異變細胞計數(shù)、分類。而涂片鏡檢對此類細胞分類有明顯優(yōu)勢,因此,臨床常將其與涂片鏡檢結(jié)合,從而降低誤診、漏診的發(fā)生。

綜上所述,全自動血細胞分析儀在血常規(guī)檢驗中具有較高的應用價值,但必要時也可聯(lián)合涂片鏡檢,以便提高檢測準確率。