程波

（九江市第三人民醫(yī)院病理科，江西 九江 332000）

乳腺癌是威脅人類健康的癌癥之一。乳腺癌潛伏、發(fā)展時(shí)間較長(zhǎng)，病情發(fā)展包括多個(gè)階段，并伴隨基因改變，但P57kip2、CDC25A 表達(dá)與臨床分期有無關(guān)系，現(xiàn)代臨床研究尚無定論[1]。有學(xué)者對(duì)P57kip2、CDC25A 進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)[2]，CDC25A 能調(diào)節(jié)細(xì)胞運(yùn)轉(zhuǎn)，促進(jìn) G1/S 期，P57kip2 對(duì)細(xì)胞增殖有阻礙作用，同時(shí)底物磷酸化受到抑制，細(xì)胞G1期持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)。為進(jìn)一步探析P57kip2、CDC25A與乳腺癌進(jìn)程的相關(guān)性，本研究采用免疫組化法對(duì)癌細(xì)胞進(jìn)行染色檢測(cè)，以探討蛋白表達(dá)與病理分級(jí)及臨床分期的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2016年4月至2019年5月本院收治的120例乳腺癌患者為研究對(duì)象。所有患者均為女性，年齡35～79歲，平均年齡（45.56±2.47）歲。按照UICC分期標(biāo)準(zhǔn)將患者分為Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期，各35例、40例、45例；按照WHO病理分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)將患者分為Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)，各44例、36例、40例?；颊吲R床資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批同意。

納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)CT、MRI等檢查確診為乳腺癌；患者知曉研究并簽署知情同意書；精神狀態(tài)正?？膳浜蠙z查者；近期未服用抗癌藥物進(jìn)行化療。排除標(biāo)準(zhǔn)：拒絕參與研究者；對(duì)本研究試劑過敏者；有化療史者；無法全程配合檢查者。

1.2 方法 檢測(cè)試劑主要為P57kip2、CDC25A、EliVision試劑盒，并準(zhǔn)備硝酸纖維素膜，所有試劑由福州邁新公司提供。

取患者乳腺癌組織放置在試管中（試管編號(hào)對(duì)應(yīng)患者姓名），制成石蠟標(biāo)本。將標(biāo)本置于20℃條件下存儲(chǔ)，防止癌細(xì)胞繼續(xù)生長(zhǎng)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。將標(biāo)本切片進(jìn)行染色，切片厚度為4μm，切片置于完全消毒的載玻片上，蓋上蓋玻片，在玻片一端滴入染色試劑，另一端用吸水紙吸引試劑快速染色，玻片中無氣泡表明染色成功，觀察組切片顏色，進(jìn)而判斷其陰性、陽性。若顏色呈現(xiàn)棕黃色，則說明P57kip2蛋白、CDC25A表達(dá)率高，如果表達(dá)率下降，則顏色變暗，呈棕色、褐色。

1.3 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)患者年齡、臨床分期、病理分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，記錄染色后陰性、陽性例數(shù)，分析P57kip2、CDC25A表達(dá)與上述因素的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表示，比較采用Z檢驗(yàn)，計(jì)量資料用“±s”表示，比較用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CDC25A 表達(dá)與病例分級(jí)及臨床分期的相關(guān)性分析患者年齡與CDC25A 表達(dá)無相關(guān)性；病理分級(jí)與CDC25A 表達(dá)有相關(guān)性，分級(jí)越高，CDC25A表達(dá)越低（P＜0.05）；臨床分析與CDC25A 表達(dá)存在相關(guān)性，Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期CDC25A 表達(dá)率逐漸下降（P＜0.05）；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與CDC25A 表達(dá)有相關(guān)性，轉(zhuǎn)移越多，CDC25A表達(dá)率越低（P＜0.05），見表1。

2.2 P57kip2 蛋白表達(dá)與病理分級(jí)及臨床分期的相關(guān)性患者年齡與P57kip2 蛋白表達(dá)無相關(guān)性；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)越多，P57kip2 蛋白表達(dá)越低（P＜0.05）；臨床分期越低，P57kip2 蛋白表達(dá)率越高（P＜0.05）；病理分級(jí)越低，P57kip2蛋白表達(dá)率越高（P＜0.05），見表2。

表1 CDC25A表達(dá)與病例分級(jí)及臨床分期的相關(guān)性分析Table 1 Correlation analysis of CDC25A expression with pathological grade and clinical stage

表2 P57kip2蛋白表達(dá)與病理分級(jí)及臨床分期的相關(guān)性Table 2 Correlation between P57kip2 protein expression and pathological grade and clinical stage

3 討論

乳腺上皮細(xì)胞癌變稱之為乳腺癌，誘發(fā)癌變因素較多，目前臨床對(duì)其誘因尚無完整定論。乳頭溢液、腫脹等是乳腺癌早期癥狀，隨病情發(fā)展，癌細(xì)胞逐漸向周圍組織、器官擴(kuò)散[3]。全球調(diào)查顯示[4]，發(fā)展中國(guó)家的乳腺癌發(fā)病率較高，女性為高發(fā)人群，發(fā)病率超過24%。Masuoka等[5]在1995年，采用雙雜交系統(tǒng)將P57kip2 蛋白成功克隆，經(jīng)長(zhǎng)期研究，發(fā)現(xiàn)P57kip2 是抑癌基因，在細(xì)胞增殖分化過程中，負(fù)責(zé)負(fù)性調(diào)控。人體染色體中的11p15.5是P57kip2的基因位置，57 KD為其分子量，能同時(shí)進(jìn)行多個(gè)氨基酸多肽的編碼，最多編碼數(shù)量為316 個(gè)。在此之后，關(guān)于P57kip2 表達(dá)與乳腺癌發(fā)生發(fā)展的研究逐漸增多，有學(xué)者研究顯示[6]，P57kip2蛋白能與促進(jìn)細(xì)胞增殖的相關(guān)因子進(jìn)行結(jié)合，如cyclin E-CDK2，細(xì)胞增殖被抑制，長(zhǎng)時(shí)間停滯在GI期，當(dāng)癌癥發(fā)展到后期，P57kip2表達(dá)率逐漸下降[7-8]。這一結(jié)論與本研究結(jié)論一致，對(duì)臨床分期Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期患者的癌細(xì)胞陽性、陰性檢出率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)隨分期程度、病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移程度加深，P57kip2 表達(dá)率逐漸下降（P＜0.05），但患者年齡與P57kip2表達(dá)無相關(guān)性。本研究對(duì)CDC25A表達(dá)與臨床分期、病理分級(jí)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)其與P57kip2 蛋白一樣，在臨床分期、病理分級(jí)中CDC25A表達(dá)呈現(xiàn)線性變化[9-10]。本研究結(jié)果顯示，隨分期程度增加、分級(jí)程度增加及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移枚數(shù)增多，陽性檢出率越高，CDC25A 表達(dá)越低（P＜0.05）。由上述結(jié)果可知，CDC25A、P57kip2與癌細(xì)胞分化、癌癥發(fā)展密切相關(guān)，兩者在癌細(xì)胞Ⅰ期表達(dá)較多，患者陽性檢出率較低，隨分期增加陽性檢出率增加，兩者表達(dá)率降低。在癌癥發(fā)展中，CDC25A、P57kip2 有一定協(xié)同作用，但此結(jié)論尚需大樣本量的臨床研究證實(shí)。

綜上所述，乳腺癌發(fā)展過程中，CDC25A、P57kip2 表達(dá)會(huì)對(duì)癌癥進(jìn)程產(chǎn)生影響，在臨床診斷中可將其作為診斷標(biāo)記。