葫蘆島市衛(wèi)生健康事業(yè)服務(wù)中心 （遼寧 葫蘆島 125000）

內(nèi)容提要：目的：探討酶聯(lián)免疫吸附法及電化學(xué)發(fā)光免疫分析法兩種手段應(yīng)用于人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體檢測(cè)中的效果及價(jià)值。方法：以本中心的8148份血清標(biāo)本為研究對(duì)象，嚴(yán)格依據(jù)其檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)和操作說(shuō)明對(duì)標(biāo)本分別施行酶聯(lián)免疫吸附法及電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)，比較兩種檢測(cè)手段的所得結(jié)果。結(jié)果：酶聯(lián)免疫吸附法的特異性為88.46%，相對(duì)低于電化學(xué)發(fā)光免疫分析法的100%；兩種檢測(cè)手段的臨界值或OD/CO值與陽(yáng)性診斷符合率呈現(xiàn)正相關(guān)。結(jié)論：電化學(xué)發(fā)光免疫分析法在人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體檢測(cè)中的開(kāi)展應(yīng)用，能獲得較高的特異性，加之具備分析時(shí)間短和自動(dòng)化程度高等優(yōu)勢(shì)，能有效彌補(bǔ)酶聯(lián)免疫吸附法的不足。

研究表明，臨床中尚未有任何治療手段能徹底消滅人類(lèi)免疫缺陷病毒，但是抗病毒治療能讓該病毒維持在較低水平，幫助人體免疫系統(tǒng)的正常運(yùn)作，從而起到延長(zhǎng)患者生命周期的作用。為此，人們?cè)诎l(fā)現(xiàn)人類(lèi)免疫缺陷病毒暴露后，應(yīng)立即入院實(shí)施病毒抗體篩檢[1]。目前，對(duì)人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體檢測(cè)常使用的手段為酶聯(lián)免疫吸附法及電化學(xué)發(fā)光免疫分析法，且經(jīng)研究顯示，兩者各有其應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。本文選擇8148份送檢的血清標(biāo)本為分析對(duì)象，探討這兩種檢測(cè)手段的應(yīng)用價(jià)值，體會(huì)如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

于本中心采集并送檢的血清標(biāo)本中選擇8148份為此次實(shí)驗(yàn)的分析樣本，其時(shí)間集中分布在2017年1月～2019年12月，且均在無(wú)菌條件下采集的合格標(biāo)本，放置在低溫冰箱中備檢。

1.2 檢測(cè)方式

所有標(biāo)本均分別實(shí)施酶聯(lián)免疫吸附法及電化學(xué)發(fā)光免疫分析法兩種手段的檢測(cè)，并嚴(yán)格依據(jù)其檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行各項(xiàng)檢測(cè)操作，每一種檢測(cè)方法的執(zhí)行在檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室、檢測(cè)員及試劑使用批號(hào)等方面均要保持一致。其中，電化學(xué)發(fā)光免疫分析法的檢測(cè)方式如下：（1）檢測(cè)儀器：選擇羅氏電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)，型號(hào)為cobas e 411，試劑盒為儀器自配套的e pack試劑盒；（2）檢測(cè)步驟：主要實(shí)施“三明治”手法。首先，組合形成“三明治”樣抗原-抗體復(fù)合體，其組成元素為生物素抗人類(lèi)免疫缺陷病毒標(biāo)單克隆抗體一份、待檢樣本一份及三聯(lián)吡啶釕符合標(biāo)記人類(lèi)免疫缺陷病毒特異性抗體一份；其次，借助磁微粒對(duì)“三明治”樣抗原-抗體復(fù)合體實(shí)施孵育，其磁微粒是由鏈條和素標(biāo)記所形成，依據(jù)生物素發(fā)揮的效果將“三明治”樣抗原-抗體復(fù)合體形成固相復(fù)合體；隨后，利用蠕動(dòng)泵的效應(yīng)將反應(yīng)液置入流動(dòng)室中，并借助磁鐵的吸附能力將磁微粒置入到電極表面；最后，加入三丙胺并實(shí)施電極加壓，開(kāi)啟電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，借助光電倍增管測(cè)量光的強(qiáng)度。注意，復(fù)合體濃度與光強(qiáng)度兩者呈現(xiàn)線性關(guān)系，可從此邏輯中獲取樣品人類(lèi)免疫缺陷病毒的Cutoff指標(biāo)[2]。酶聯(lián)免疫吸附法的檢測(cè)方式如下：（1）儀器選擇：應(yīng)用JX210672酶標(biāo)儀WD-9417B，及JX210694自動(dòng)洗板機(jī)WD-2103A（生產(chǎn)企業(yè)：河北潤(rùn)聯(lián)科技開(kāi)發(fā)有限公司）；（2）檢測(cè)步驟：在無(wú)菌的條件下對(duì)乙二胺四乙酸抗凝全血實(shí)施采集，并在800轉(zhuǎn)/min的速度下對(duì)其進(jìn)行離心處理。隨后，依據(jù)人類(lèi)免疫缺陷病毒的抗體診斷試劑盒說(shuō)明書(shū)的操作步驟實(shí)施抗體篩查與試驗(yàn)。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)

以過(guò)夜孵育法WB的最終結(jié)果作為評(píng)價(jià)兩種檢測(cè)手段所得數(shù)據(jù)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，比較分析兩類(lèi)檢測(cè)手段的檢測(cè)結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

將統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS20.0作為本次實(shí)驗(yàn)的分析軟件，將所得數(shù)據(jù)置于其中實(shí)施處理；其中，計(jì)數(shù)資料的表達(dá)應(yīng)用%，且實(shí)施χ2檢驗(yàn)的分析。P＜0.05表示差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 兩組檢測(cè)手段的特異性分析

經(jīng)結(jié)果顯示，WB檢測(cè)結(jié)果顯示標(biāo)本呈陽(yáng)性的有23份。電化學(xué)發(fā)光免疫分析法中初篩的陽(yáng)性標(biāo)本數(shù)有23例，其特異性為100%；酶聯(lián)免疫吸附法的特異性為88.46%，與電化學(xué)發(fā)光免疫分析法相比較，差異未有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1.兩組檢測(cè)手段的敏感性分析

2.2 兩組檢測(cè)手段的陽(yáng)性結(jié)果研究

數(shù)據(jù)得知，在電化學(xué)發(fā)光免疫分析法中，臨界值越大，其陽(yáng)性診斷的符合率越高；在臨界值范圍為150～220中，陽(yáng)性標(biāo)本數(shù)最多，于總陽(yáng)性率中所占比例達(dá)73.91%（17/23）。在酶聯(lián)免疫吸附法中，其OD/CO值越大，陽(yáng)性診斷的符合率也越高，其中，OD/CO值為1.3～1.8的陽(yáng)性標(biāo)本數(shù)最多，共有16例為陽(yáng)性，占比為69.57%；在兩種檢測(cè)手段的臨界或OD/CO值最低時(shí)，其電化學(xué)發(fā)光免疫分析法（臨界值0.9～80）的2例送檢的標(biāo)本均被診斷為陽(yáng)性，而在酶聯(lián)免疫吸附法（OD/CO值0.1～0.5）中共送檢2份標(biāo)本，僅1份被檢出陽(yáng)性，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2.兩組檢測(cè)手段的陽(yáng)性結(jié)果研究

3.討論

艾滋病是一種因艾滋病病毒即人類(lèi)免疫缺陷病毒而導(dǎo)致的惡性傳染病，當(dāng)此類(lèi)病毒侵入人體后，會(huì)殺傷人體中一種名為CD4+T的淋巴細(xì)胞，嚴(yán)重降低人體的抵抗力，誘發(fā)各類(lèi)并發(fā)癥的出現(xiàn)，從而導(dǎo)致患者死亡。臨床中，對(duì)人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體檢測(cè)的常見(jiàn)手段為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法，此類(lèi)方式的操作實(shí)施為手工，耗時(shí)較長(zhǎng)、誤差較大的同時(shí)，也會(huì)在一定程度上降低檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，給臨床醫(yī)師診斷和制定疾病治療方案形成了一定阻礙[3]。而電化學(xué)發(fā)光免疫分析法作為一種自動(dòng)化程度高、靈敏性高及檢測(cè)速度較快的篩檢手段，通過(guò)封閉系統(tǒng)中的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)，能顯著縮短傳染病的窗口期，在弱陽(yáng)性樣本的檢出方面，檢出率較高，能讓醫(yī)護(hù)人員及早發(fā)現(xiàn)傳染病的早期患者，相比酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法而言，其在分析時(shí)間和檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性方面，優(yōu)勢(shì)更為明顯，是目前較為先進(jìn)的免疫檢驗(yàn)手段。有數(shù)據(jù)顯示，在入院患者八項(xiàng)傳染病采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法的篩檢結(jié)果顯示，在人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體測(cè)定陽(yáng)性率提升至29.5%，且特異性抗體存在顯著增多的趨勢(shì)[4]。同時(shí)，某研究表明，在人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體檢測(cè)中，使用定性且定量的電化學(xué)發(fā)光免疫分析法，能在提升檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性方面發(fā)揮積極作用[4]。本文結(jié)果表明，電化學(xué)發(fā)光免疫分析法的特異性為100%，略高于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法的88.46%。

綜上所述，電化學(xué)發(fā)光免疫分析法較于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法而言，其特異性相對(duì)較高，且能在一定程度上彌補(bǔ)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法分析時(shí)間長(zhǎng)的不足。