付晶 尚春迎 劉麗

乳腺癌是一種以乳房腫塊、乳頭溢液和腋窩淋巴結(jié)腫大等為臨床特征的常見惡性腫瘤，發(fā)病率在世界范圍內(nèi)居高不下，位居女性惡性腫瘤的首位［1］。當(dāng)前，乳腺癌的治療以手術(shù)治療為主，并在術(shù)后采用化療進(jìn)行輔助治療［2］。研究發(fā)現(xiàn)，由于手術(shù)應(yīng)激反應(yīng)，乳腺癌患者免疫力下降，且在術(shù)后化療過程中一系列化療藥物的使用易導(dǎo)致患者皮膚、呼吸道受損，增加了患者發(fā)生醫(yī)院感染的幾率，進(jìn)而影響其生存質(zhì)量［3］。因此，在患者手術(shù)治療后，判斷其是否發(fā)生感染并采取積極有效的抗感染治療對提高患者的生存質(zhì)量具有重要意義。輔助性T 細(xì)胞17（helper T cell 17，Th17）和調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞（regulatory T cell，Treg）在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展具有重要作用，參與了機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)過程［4］；血清降鈣素原（procalcitonin，PCT）是評估機(jī)體感染嚴(yán)重程度的主要指標(biāo)之一，在重癥感染情況下，PCT 水平會(huì)發(fā)生明顯變化［5］。當(dāng)前，有關(guān)乳腺癌患者術(shù)后化療發(fā)生醫(yī)院感染的研究主要集中在病原菌種類分析、影響因素等方面，有關(guān)預(yù)測乳腺癌患者術(shù)后化療發(fā)生醫(yī)院感染的研究較少。本研究將探討 了Th17/Treg、PCT 及Th17/Treg 聯(lián)合PCT 在乳腺癌患者術(shù)后化療醫(yī)院感染預(yù)測中的價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年6月至2019年6月本院收治的乳腺癌患者152 例，根據(jù)術(shù)后化療后是否發(fā)生醫(yī)院感染將患者分為感染組（n=31）和非感染組（n=121）。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者年齡≥18 歲；②臨床病理檢查均符合乳腺癌的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］；③患者無手術(shù)禁忌證，均行乳腺癌根治術(shù)治療，并在術(shù)后接受化療；④感染患者為術(shù)后化療期間發(fā)生感染，臨床檢查符合《醫(yī)院感染診斷標(biāo)準(zhǔn)》［7］的相關(guān)規(guī)定。⑤患者及家屬簽署知情同意書，自愿參與。排除標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)檢查存在惡性腫瘤患者；②存在嚴(yán)重認(rèn)知功能障礙，難以配合治療患者；③存在嚴(yán)重心、肝、腎等重要臟器功能障礙患者。兩組患者的臨床基線資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

表1 兩組患者臨床基線資料比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of clinical baseline data between 2 groups［n（%），（±s）］

表1 兩組患者臨床基線資料比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of clinical baseline data between 2 groups［n（%），（±s）］

項(xiàng)目年齡（歲）BMI（kg/m2）腫瘤最大徑（cm）手術(shù)時(shí)間（min）TNM 分期（例）Ⅰ期Ⅱ期病變部位（例）左側(cè)右側(cè)感染組（n=31）47.85±6.48 25.37±2.17 4.53±0.75 116.87±25.31 11（35.48）20（64.52）18（58.06）13（41.94）非感染組（n=121）45.74±7.21 25.63±2.05 4.62±0.61 118.42±21.63 53（43.80）68（56.20）73（60.33）48（39.67）t/χ2值1.483 0.623 0.698 0.346 0.700 P 值0.140 0.535 0.486 0.732 0.403 0.0530.818

1.2 研究方法

比較兩組患者外周血Th17、Treg、Th17/Treg及血清PCT 水平，采用受試者工作特征曲線（receiver operating characteristics，ROC）分 析Th17/Treg 和血清PCT 對乳腺癌患者術(shù)后化療發(fā)生醫(yī)院感染的預(yù)測價(jià)值。

1.2.1 外周血Th17 及Treg 細(xì)胞檢測

取患者晨空腹靜脈血3 mL，抗凝后于1 500 r/min 離心15 min，分離得到外周血單個(gè)核細(xì)胞懸液，置于24 孔細(xì)胞培養(yǎng)板，選擇RPMI-1640 培養(yǎng)基（10%胎牛血清、豆蔻酰佛波醇乙酯、離子霉素和莫能菌素等）孵育4 h。加入20 μL 抗人CD4 單抗，室溫避光孵育20 min；加入20 μL 的IL-17 單抗和2 mL 染色緩沖液，室溫孵育15 min；離心后加入1 mL 染色固定液，使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。

1.2.2 血清PCT 水平檢測

采用雙抗體夾心法檢測兩組患者的血清PCT水平。取患者晨空腹靜脈血3 mL，1 500 r/min 離心15 min 后分離血清，低溫保藏待測；試劑盒購于上海晶抗生物工程有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以（±s）表示，行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，行χ2檢驗(yàn)；繪制ROC 曲線分析Th17/Treg、PCT 及二者聯(lián)合對乳腺癌患者術(shù)后化療發(fā)生醫(yī)院感染的預(yù)測價(jià)值，曲線下面積（AUC）比較采用Z檢驗(yàn)；P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者外周血Th17、Treg、Th17/Treg 及血清PCT 水平比較

感染組患者的Th17、Th17/Treg 和PCT 水平高于非感染組，Treg 水平低于非感染組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組患者外周血Th17、Treg、Th17/Treg 及血清PCT水平比較（±s）Table 2 Comparison of Th17，Treg，Th17/Treg and serum PCT levels in peripheral blood between 2 groups（±s）

表2 兩組患者外周血Th17、Treg、Th17/Treg 及血清PCT水平比較（±s）Table 2 Comparison of Th17，Treg，Th17/Treg and serum PCT levels in peripheral blood between 2 groups（±s）

組別感染組非感染組t 值P 值n 31 121 Th17（%）1.75±0.52 1.42±0.41 3.775＜0.001 Treg（%）0.68±0.25 0.97±0.32 4.688＜0.001 Th17/Treg 2.57±1.33 1.46±1.15 4.641＜0.001 PCT（ng/mL）5.78±1.13 0.94±0.25 43.509＜0.001

2.2 外周血Th17/Treg 及血清PCT 水平對乳腺癌患者術(shù)后化療醫(yī)院感染的預(yù)測價(jià)值

ROC 曲線分析Th17/Treg、PCT 及Th17/Treg+PCT 其預(yù)測價(jià)值。Th17/Treg、PCT 和Th17/Treg+PCT 的AUC 值分別為0.838、0.780 和0.863，對乳腺癌患者術(shù)后化療發(fā)生醫(yī)院感染的預(yù)測均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。各指標(biāo)的最佳閾值、約登指數(shù)、敏感度和特異度值。見表3、圖1。

表3 外周血Th17/Treg 及血清PCT 水平對乳腺癌患者術(shù)后化療醫(yī)院感染的預(yù)測價(jià)值（±s）Table 3 The predictive value of peripheral blood Th17/Treg and serum PCT levels on nosocomial infection after chemotherapy for breast cancer patients（±s）

表3 外周血Th17/Treg 及血清PCT 水平對乳腺癌患者術(shù)后化療醫(yī)院感染的預(yù)測價(jià)值（±s）Table 3 The predictive value of peripheral blood Th17/Treg and serum PCT levels on nosocomial infection after chemotherapy for breast cancer patients（±s）

指標(biāo)Th17/Treg PCT Th17/Treg+PCT AUC 0.838 0.780 0.863最佳閾值2.08 5.31-約登指數(shù)0.692 0.519 0.695敏感度87.54 84.62 92.30特異度69.23 67.31 76.90 P 值＜0.05＜0.05＜0.05

圖1 Th17/Treg、PCT 及Th17/Treg+PCT 預(yù)測乳腺癌患者術(shù)后化療發(fā)生醫(yī)院感染的ROC 曲線Figure 1 ROC curve of Th17/Treg，PCT and Th17/Treg+PCT in predicting nosocomial infection in breast cancer patients undergoing postoperative chemotherapy

3 討論

乳腺癌術(shù)后醫(yī)院感染是導(dǎo)致患者病情惡化、生存治質(zhì)量下降的直接原因，也是導(dǎo)致患者在治療過程中死亡的主要原因之一，在乳腺癌患者中的發(fā)生率高達(dá)30%，是臨床亟待解決的重難點(diǎn)問題［8］。Th17 是由初始T 細(xì)胞在轉(zhuǎn)化生長因子B（transforming growth factor-B，TGF-B）和白細(xì)胞介素6（interleukin，IL-6）共同誘導(dǎo)下分化而成的，Treg 則直接由初始T 細(xì)胞在TGF-B 的誘導(dǎo)下轉(zhuǎn)化形成，具有調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答強(qiáng)度、減輕機(jī)體損傷等作用［9-10］。研究發(fā)現(xiàn)，Th17 和Treg 在分化上相互關(guān)聯(lián)，但功能上相互拮抗，二者存在一定的平衡，當(dāng)平衡被打破時(shí)，對腫瘤的發(fā)生發(fā)展起到重要作用［11］。近年來也有研究發(fā)現(xiàn)Th17/Treg 具有抗炎作用［12］。PCT 是一種感染性生物標(biāo)記物，被廣泛用于術(shù)后感染診斷中，具有快速、高敏感度和特異度等特點(diǎn)，通過監(jiān)測其水平可指導(dǎo)術(shù)后感染患者的治療［13］。

Th17 具有促炎性反應(yīng)的作用，可誘導(dǎo)活化T細(xì)胞釋放多種促炎遞質(zhì)，引起炎癥細(xì)胞浸潤；Treg可抑制過強(qiáng)的免疫反應(yīng)，維持機(jī)體免疫穩(wěn)定［14］。當(dāng)患者的細(xì)胞免疫受到抑制，Th17 細(xì)胞大量分泌促炎因子，而Treg 細(xì)胞減少，抑制作用減弱時(shí)，會(huì)加重患者的感染程度。金燕芬等［15］研究了Th17/Treg 細(xì)胞平衡在老年感染性肺炎患者中的作用，發(fā)現(xiàn)重癥肺炎患者的Th17/Treg 水平明顯高于輕癥患者與非感染者，認(rèn)為Th17/Treg 細(xì)胞失平衡是加重患者感染嚴(yán)重程度的可能因素。但也有研究發(fā)現(xiàn)，Th17 細(xì)胞在細(xì)菌感染中具有一定的防御作用，其水平出現(xiàn)上升的變化，這可能與Th17 細(xì)胞在不同程度的細(xì)菌感染中表達(dá)水平不一樣有關(guān)，也可能與患者自身免疫紊亂有關(guān)［16］。研究發(fā)現(xiàn)，在正常生理狀態(tài)下，PCT 表達(dá)水平較低，當(dāng)發(fā)生細(xì)菌感染后，其數(shù)值會(huì)迅速上升，且PCT 的水平與感染程度呈正相關(guān)，與感染的進(jìn)展與消退關(guān)系密切［17］。

研究結(jié)果提示Th17/Treg、PCT 水平能較好地反映乳腺癌患者術(shù)后化療發(fā)生醫(yī)院感染的情況，且Th17/Treg 聯(lián)合PCT 預(yù)測價(jià)值高于單一指標(biāo)。因此，臨床可根據(jù)患者的Th17/Treg、PCT 水平對乳腺癌患者術(shù)后化療發(fā)生醫(yī)院感染進(jìn)行預(yù)測。

綜上所述，乳腺癌患者術(shù)后化療發(fā)生醫(yī)院感染的患者，其Th17/Treg 和PCT 水平高于非感染患者，Th17/Treg 聯(lián)合PCT 對判斷乳腺癌患者術(shù)后化療發(fā)生醫(yī)院感染具有較高的預(yù)測價(jià)值。由于條件限制，本研究仍存在樣本數(shù)量有限、觀察時(shí)間點(diǎn)有限等不足，有待后續(xù)擴(kuò)大樣本量，對研究結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。